糖尿病足溃疡时血小板聚集、释放和膜糖蛋白Ⅵ变化的临床研究

柏素萍 李峥璟 刘大东 王旭

糖尿病足溃疡时血小板聚集、释放和膜糖蛋白Ⅵ变化的临床研究

柏素萍 李峥璟 刘大东 王旭

目的研究糖尿病足溃疡患者血小板聚集、释放和膜糖蛋白Ⅵ（GPⅥ）的变化。方法42例2型糖尿病患者按有无糖尿病足分为：非糖尿病足（DM）组（未患糖尿病足）17例和糖尿病足（DFU）组25例；同时选取15例健康志愿者为对照组。检测空腹血糖值、糖化血红蛋白、血小板聚集率、血小板P选择素释放和血小板GPⅥ阳性率。结果DFU组空腹血糖值和糖化血红蛋白（HbA1c）两项指标均高于对照组（P＜0.05）；DFU组血小板聚集率显著高于对照组与DM组（P＜0.05）；DFU组血小板P选择素释放高于对照组与DM组（P＜0.05）；DFU组的GPⅥ阳性率高于对照组和DM组， 差异均具有统计学意义（P＜0.05）。结论血小板功能的变化可能与糖尿病足的发病有关。

糖尿病足；溃疡；血小板；聚集率；膜糖蛋白Ⅵ；P选择素

糖尿病足是发生于糖尿病患者下肢远端的神经异常与不同程度的周围血管病变， 是导致糖尿病患者致残致死的主要原因［1-3］。血小板的异常活化引起的血栓在其病程中扮演重要的角色， 但关于糖尿病足时血小板功能的变化的研究尚未见报道， 本文将分析血糖水平、糖化血红蛋白（hemoglobin A1c ， HbA1c）、血小板功能参数与糖尿病足溃疡病情的关系。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 42例2型糖尿病患者（1999年WHO标准诊断）均来自本院门诊及住院患者， 平均年龄（60±5）岁。按有无糖尿病足分为：非糖尿病足（diabetes mellitus ， DM）组17例和糖尿病足（diabetic foot ulceration ， DFU）组25例；DFU的患者均符合经典Wagner分级法的Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ级［4］， 同时选取15例健康志愿者作为对照组。排除有严重肝肾疾患、心力衰竭、动静脉血栓患者， 入选者2周内未服用阿司匹林、氯吡格雷等影响血小板及凝血功能的药物。

1.2 标本采集 采集受试者空腹静脉血6 ml， 2 ml注入含EDTA-K2抗凝剂的抗凝管中、混匀待测HbA1c。另外4 ml注入含枸橼酸钠抗凝剂的抗凝管中， 以150 g离心10 min， 分离出富含血小板血浆（platelet rich plasma， PRP）， 待测血小板的相关指标。同时检测受试者的空腹血糖值。

1.3 血小板功能检测 取上述PRP于LBY-NJ4A全自动血小板聚集仪（北京普利生）上检测血小板聚集率。同时取上述PRP于流式细胞仪上检测血小板的P选择素（美国 Santa Cruz生物公司）和膜糖蛋白GPⅥ（美国 BD生物公司）［5］。

1.4 统计学方法 采用SPSS17.0统计学软件对数据进行统计学分析。计量资料以均数±标准差（ x-±s）表示， 采用t检验， 单因素方差分析采用one-way ANOVA。P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 DM组和DFU组患者的空腹血糖与HbA1c含量均较对照组显著增高， 差异具有统计学意义（P＜0.05）， DM组和DFU组之间差异无统计学意义（P＞0.05）， 见表1。

2.2 对血小板聚集率的分析显示：DFU组的血小板聚集率较对照组、DM组高， 差异具有统计学意义（P＜0.05）。对血小板P选择素释放的分析显示：DM组的P选择素与对照组比较，差异无统计学意义（P＞0.05）， DFU组P选择素较DM组和对照组明显高， 差异具有统计学意义（P＜0.05）。对血小板GPⅥ的阳性率分析显示： DM组和DFU组的血小板GPⅥ阳性率均较对照组高， 差异具有统计学意义（P＜0.05）， DFU组GPⅥ的阳性率较DM组明显高， 差异具有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表1 空腹血糖与HbA1c比较（ x-±s）

表2 各组血小板的功能参数比较（ x-±s， %）

3 讨论

随着生活水平的提高， 糖尿病发病率逐年上升， 继发于糖尿病的一系列并发症严重威胁患者的健康与生命［6］。糖尿病足是糖尿病常见的重要并发症之一， 是糖尿病致残、致死的主要原因。研究显示， 中国有12%～15%糖尿病患者会发生糖尿病足部溃疡［7］。糖尿病足发病机制复杂， 高血糖及脂代谢异常所引起的广泛的微血栓形成在糖尿病足的发生与发展中扮演重要的角色［8，9］。

血小板是一种由巨核细胞分化而来的无核细胞， 主要参与机体的病理生理性止血， 但最近研究显示血小板与机体的免疫功能密切相关［10，11］。研究证实， 糖尿病时患者体内产生一种毒性物质——糖基化终产物（advanced glycation end products， AGEs）， 该物质能够通过与血小板上的CD36受体特异性结合， 从而激活血小板， 活化后的血小板的粘附、聚集和释放功能明显增强［12］。血小板的聚集反应是血小板的一个重要生理特性， 是血小板参与止血和血栓形成过程的重要因素之一。本研究发现DFU患者血小板的聚集率明显高于DM患者和对照组患者。此外， 活化后的血小板也会释放大量的物质参与机体的凝血和炎症反应， P选择素是衡量血小板释放功能的重要指标［13］。本研究发现DFU患者血小板的P选择素释放明显高于DM患者和对照组患者。血小板表面的膜糖蛋白GPⅥ是血小板表面的一种免疫超家族受体，GPⅥ介导了血小板的活化， 启动生理性与病理性的血栓形成［14，15］， 本研究发现DFU患者血小板的GPⅥ阳性率明显高于DM患者。血小板的聚集率、P选择素释放和GPⅥ的阳性率在DFU和DM患者体内存在明显地差异， 因此作者推测对血小板的聚集率、P选择素释放和GPⅥ阳性率的检测有助于对DFU的判断与防治提供客观的指标依据。

本研究首次揭示了血小板的功能与糖尿病足的发生发展相关， 为糖尿病足的基础研究以及临床防治提供了新的思维，对于糖尿病并发症及合并症的监控有重要临床意义。

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Clinical research of platelet aggregation, release and change of membrane glycoprotein Ⅵ in diabetic foot ulceration

BAI Su-ping,
LI Zheng-jing, LIU Da-dong, et al.
Department of Burn and Plastic Surgery, Jiangsu Zhenjiang City Affiliated Hospital of Jiangsu University, Zhenjiang 212001, China

ObjectiveTo research platelet aggregation， release and change of membrane glycoprotein Ⅵin diabetic foot ulceration.MethodsA total of 42 patients with type 2 diabetes mellitus were divided into non diabetic foot （DM）group （without diabetic foot） with 17 cases and diabetic foot （DFU） group with 25 cases.Another 15 healthy volunteers were selected as control group.Detection was made on fasting blood-glucose， glycosylated hemoglobin， platelet aggregation rate， platelet P-selectin release， and platelet GP Ⅵ positive rate.ResultsDFU group had higher indexes of fasting blood-glucose and glycosylated hemoglobin （HbA1c） than the control group（P＜0.05）.DFU group had higher platelet aggregation rate than the control group and DM group （P＜0.05）.DFU group had higher platelet P-selectin release than the control group and DM group （P＜0.05）.DFU group had higher GP Ⅵ positive rate than the control group and DM group， and the differences had statistical significance （P＜0.05）.ConclusionChange of platelet function have relationship with the progress of diabetic foot.

Diabetic foot; Ulceration; Platelet aggregation rate; Membrane glycoprotein Ⅵ; P-selectin

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.07.013

2014-11-07］

江苏省镇江市科技支撑计划指导性项目（项目编号：F22012040）

212001 江苏省镇江市江苏大学附属医院烧伤整形科

李峥璟