大黄总蒽醌对结肠和肾脏水通道蛋白表达调节效应研究

宁 成，徐秀蓉，胡 耀

(成都大学附属医院 肾脏内科，四川 成都 610000)



大黄总蒽醌对结肠和肾脏水通道蛋白表达调节效应研究

宁 成，徐秀蓉，胡 耀

(成都大学附属医院 肾脏内科，四川 成都 610000)

目的：探讨大黄总蒽醌对大鼠结肠和肾脏AQP2、AQP4表达的调节效应。方法：选取33只SD大鼠为研究对象，随机均分为对照组、给药A组、给药B组各11只。对照组大鼠给予同体积生理盐水，给药A、B组大鼠予以大黄总蒽醌，监测三组大鼠的AQP2、AQP4表达情况。结果：①给药A组大鼠结肠AQP2、APP4表达均显著低于对照组，差异具有统计学意义(P<0.05)；②给药B组大鼠24h尿量显著高于对照组(P<0.05)，尿Na+含量显著低于对照组(P<0.05)，Na+差异不明显(P>0.05)；给药B组大鼠肾脏AQP2、APP4表达均显著低于对照组，差异具有统计学意义(P<0.05)。结论：大黄总蒽醌对结肠和肾脏水通道蛋白表达具有重要影响，可用于治疗相关疾病。

大黄总蒽醌；结肠；肾脏；蛋白表达；调节效应

作为传统的泻下药物，大黄还具有利尿作用，被广泛应用于肾病临床中。大黄提取物(大黄总蒽醌)对结肠、肾脏代谢具有一定影响[1]，为探讨大黄总蒽醌对大鼠结肠和肾脏AQP2、AQP4表达的调节效应，本研究选取33只大鼠为研究对象，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取33只雄性大鼠为研究对象，体重195～225g，均健康。将其随机均分成对照组、给药A组、给药B组，每组各11只。

1.2 方法

1.2.1 给药方法 给药A、B组：每日给予每只大鼠2 500mg/kg大黄总蒽醌，同时以2mL生理盐水对药物进行稀释，每天灌胃1次，连续给药5天。对照组大鼠每天给予等体积生理盐水。

1.2.2 检测方法 给药A组大鼠取距直肠5cm结肠，采用矢状剖开，并包好存于-80℃的冰箱中；给药B组大鼠取肾脏部位；对照组大鼠按上述方法取结肠和肾脏部位。采用免疫组化法对结肠和肾脏AQP2、APP4进行监测，所有操作均严格按照相关标准执行。

1.3 观察指标

①比较对照组与给药A组大鼠结肠AQP2、APP4表达情况；②比较对照组与给药B组大鼠肾脏AQP2、APP4表达情况。

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 对照组与给药A组大鼠结肠AQP2、APP4表达免疫组化染色比较

经统计结果显示，给药A组大鼠结肠AQP2、APP4表达量均显著低于对照组，组间比较差异具有统计学意义(P<0.05)，详见表1。

表1 对照组与给药A组大鼠结肠AQP2、APP4表达免疫组化染色比较 (±s)

2.2 对照组与给药B组血尿、肾脏AQP2、APP4表达免疫组化染色比较

经统计结果显示，给药B组大鼠24h尿量显著高于对照组(P<0.05)，尿Na+比较差异具有统计学意义(P<0.05)，而Na+差异不明显(P>0.05)；同时给药B组大鼠肾脏AQP2、APP4表达均显著低于对照组，组间比较差异具有统计学意义(P<0.05)，详见表2和表3。

表2 对照组和给药B组大鼠血尿情况比较 (±s)

表3 对照组与给药B组大鼠肾脏AQP2、APP4表达免疫组化染色比较 (±s)

3 讨论

3.1 大黄总蒽醌对结肠AQP2、APP4表达的影响

在祖国医学中很早就记录了大黄的“泻下”作用，如《神龙本草经》《药性论》《本草正义》等。现代药理学研究显示，大黄对小鼠结肠壁膜Na+-K+-ATP酶具有抑制作用，其主要作用机制为抑制肠道对水、Na+的重吸收，进而间接增强肠蠕动，加快肠内物质消化，出现“下泄”现象[2-3]。近年来，学者发现AQPs是细胞膜上的一种转运蛋白，与水的通透有重要关系[4]。结肠组织中表达的水通道蛋白比较多，主要包括AQP1、AQP4和AQP87。其中，AQP2主要负责结肠上皮细胞管腔膜，AQP4则主要负责结肠上皮细胞基底膜。相关研究结果发现，应激喜腹泻大鼠模型与AQP4表达下调存在密切关系，肠道菌群失调也会造成AQP2表达改变[5]。由此可见，在结肠水分吸收的过程中，AQPs发挥着重要作用。

本研究中，给药A组大鼠给予大剂量大黄总蒽醌药物，对照组仅给予等体积生理盐水，给药A组大鼠结肠AQP2、APP4表达量均显著低于对照组(P<0.05)，提示大黄总蒽醌对结肠AQP2、APP4表达具有下调作用，但大黄对AQP2、APP4表达量的具体调节机制还尚未明确，结肠对水分的吸收还存在不确定性，有可能是多个AQPs协同作用的结果，同时也有可能是大黄产生泻下效应的作用靶点之一，因此后期还需要加强研究。

3.2 大黄总蒽醌对肾脏AQP2、APP4表达的影响

大黄性寒味苦，具有凉血、泻火、活血祛瘀、利尿等功效，一直被广泛应用于多种疾病的治疗中，尤其是胃肠疾病、慢性肾功能衰竭等，且取得了良好的效果。中医治疗“泻下”的方法主要包括通便、逐水、下积[6]。其中，逐水的途径有两种，分别是肠道和肾脏，后者则为中医中的利尿作用，且中医中也有很多关于这方面的记载，如《药性论》《本草正义》等。

本研究结果表明，给药A组大鼠结肠AQP2、APP4表达均显著低于对照组，差异具有统计学意义(P<0.05)；给药B组大鼠24h尿量显著高于对照组(P<0.05)，尿Na+含量显著低于对照组(P<0.05)，Na+差异不明显(P>0.05)；给药B组大鼠肾脏AQP2、APP4表达均显著低于对照组，差异具有统计学意义(P<0.05)。结果提示大黄总蒽醌对结肠和肾脏水通道蛋白表达具有重要影响，可用于治疗消化和泌尿系统相关疾病。

[1] 刘青.大黄总蒽醌及其衍生物对LoVo、NRK细胞AQP2、AQP4表达的调节效应与机制[D].西安:第四军医大学,2009.

[2] 刘青,李锋,任秦有,等.大黄酚对LoVo细胞AQP2表达的调节效应[J].第四军医大学学报,2009,16(9):849-852.

[3] 刘青,李锋,任秦有,等.大黄总蒽醌含药血清对NRK细胞AQP2与AQP4表达的调节效应[J].中国中西医结合肾病杂志,2009,30(9):812-815,849.

[4] 刘青,李锋,李军昌,等.大黄总蒽醌含药血清对LoVo的AQP4表达的调节效应[J].中国中药杂志,2009,16(24):3247-3250.

[5] 张进文.大黄蒽醌类成分结肠靶向给药的泄下作用及药代动力学研究[D].兰州:兰州大学,2010.

[6] 刘青,李锋,任秦有,等.大黄素对体外培养NRK细胞水通道蛋白2表达的影响[J].中国中西医结合杂志,2010,21(8):871-874.

(责任编辑：尹晨茹)

Research on Water Channel Protein Expression Regulation Effect of Rhubarb Total Anthraquinone in Colon and Kidney

Ning Cheng,Xu Xiurong,Hu Yao

(Kidney Internal Medicine ,Affiliated Hospital of Chengdu University,Chengdu 610000,China)

Objective:To investigate the correlation between the total rhubarb anthraquinones in rats colon and kidney AQP2, the regulation of AQP4 expression effect.Methods:select 33 SD rats as the research object, random are divided into three groups, namely the control group, for group A and group B, each group of each 11. Control group to give the same volume of physiological saline, dosing A, B group of rhubarb total anthraquinone, monitoring AQP2, AQP4 expression of three groups of rats.Results:(1)to rats colon AQP2, APP4 expression of group A were significantly lower than control group (P<0.05); (2) for group B in the rat of the 24h urine is significantly higher than control group (P<0.05), urine Na+significantly lower than that of control group (P<0.05), Na+difference (P>0.05); And give medicine group B in the rat kidney AQP2, APP4 expression were significantly lower than control group (P<0.05).Conclusion:rhubarb total anthraquinone in colon and kidney water channel protein expression influence, in the treatment of related diseases need to refer to its functions.

Rhubarb Anthraquinone; Colon; Kidney；Protein Expression；Regulating Effect

2015-01-19

宁成(1982-)，女，成都大学附属医院医师，研究方向为慢性肾脏疾病及血液净化。

R285.5

A

1673-2197(2015)10-0016-02

10.11954/ytctyy.201510007