钒钼黄比色法测定食品中磷的研究

2015-04-22向晓黎王国红

绿色科技 2015年4期

向晓黎，王静，王国红

（1.新疆农垦科学院分析测试中心，新疆石河子832000；2.农业部食品质量监督检验测试中心，新疆石河子832000）

1 引言

磷是人体含量较多元素之一，是构成人体骨骼主要元素，钙磷比值是判断软骨症的重要指标［1］，是细胞膜和核酸的构成成分，还参与生命活动的很多代谢过程［2］，因此检测食品中磷的含量很有意义。实际工作中发现，GB/T5009.87—2003钼蓝分光光度法测定食品中磷含量显色时间长，所用试剂不够稳定，方法不够灵敏［3］，为此，本方法通过对消解液酸度的调节，显色剂进行了改进，简化了操作过程，得到了较好的精密度和准确度，满足日常检测的需要，大大提高了工作效率。

2 材料与方法

2.1 仪器

紫外可见分光光度计（TU－1901型，北京普析通用仪器有限责任公司）；数控电热板（Lab tech EG－35A型，昆山恒仪电子科技有限公司）等实验室常用设备。

2.2 试剂

（1）氢氧化钠溶液（2mol/L）：80.0g氢氧化钠（分析纯）溶于水，用水定容到1L。

（2）硫酸溶液（4.52mol/L）：吸取28.0mL浓硫酸（分析纯），缓缓注入水中，并用水定容到1L。

（3）2，4—二硝基酚（或2，6—二硝基酚）指示剂：溶解0.20g 2，4—二硝基酚溶于100mL水中。

（4）钒钼酸铵溶液：

A：称取25.0g钼酸铵溶于400mL水中。

B：称取1.25g偏钒酸胺溶于300mL沸水中，冷却后加250mL硝酸，冷却。

再搅拌下将A液缓缓注入B液中，用水稀释至1L，混匀，贮于棕色瓶中。

（5）磷（P）标准储备溶液（100μg/mL）：精确称取0.4390g在105℃烘干2h的磷酸二氢钾（优级纯），用水溶解后，转入1L容量瓶中，加入5mL浓硫酸（防腐，分析纯），用水定容到1L，该溶液1mL含磷（P）100μg。此溶液可以长期保存。

（6）磷（P）标准使用溶液（50μg/mL）：吸取100μg/mL（P）标准贮备溶液50mL于100mL容量瓶中，加水定容，此溶液1mL含磷（P）50μg。

2.3 测定方法

2.3.1 方法原理

待测液在一定酸度下，其中的磷酸根离子与偏钒酸和钼酸反应形成黄色三元杂多酸。在一定浓度范围［1mg/L～20mg/L］内，黄色溶液的吸光度与含磷量成正比例关系，用分光光度法定量分析磷含量［4］。

2.3.2 标准曲线绘制

分别移取磷标准使用溶液（每毫升相当于50μg磷）0.0mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL、6.0 mL，置于50mL容量瓶中，加水至15～20ml，依次加入2，4—二硝基酚指示剂2滴，用前述稀氢氧化钠溶液和稀硫酸（1.2.2）溶液调节pH值至溶液刚呈微黄色，以标准曲线零管为参照。加入10.00mL钒钼酸铵溶液，加蒸馏水稀释至刻度，摇匀，静止30min后，在分光光度计波长440nm处用2cm光径比色皿，以零管溶液作参比调节仪器零点，进行比色，测定各标准溶液的吸光度，并绘制标准曲线。

2.3.3 未知样品中磷的测定法

将瓷蒸发器在火上加热灼烧、冷却，准确称取均匀样品0.3（精确0.0001）g，在火上灼烧成炭分，再于550℃下成灰分。直至灰分呈白色为止（必要时，可在加入浓硝酸湿润后再灰化，有促进样品灰化至白色的作用），加稀盐酸（1＋1）10mL及硝酸2滴，在水浴上蒸干，再加稀盐酸（1＋1）2mL，用水分数次将残渣完全洗入100mL容量瓶中，并用水稀释至刻度，摇匀，过滤（如无沉淀则不须过滤）。取滤液5mL（视磷量多少定）置于50mL容量瓶中，以空白试验溶液作参比调零，以下同标准曲线绘制。

同时做样品空白试验。