浅谈风险分析在药品生产设备清洁验证中的应用

王 刚

浅谈风险分析在药品生产设备清洁验证中的应用

王 刚

（泰凌生物制药江苏有限公司，江苏泰州225300）

通过风险分析，确定了设备清洁验证的方法，包括清洁标记物和清洁溶剂的选择、清洁方法的选择、活性物质残留限度的确定、取样方式和采样点的确定、取样回收率的测定、清洁验证用分析方法验证以及持续检测，为药品生产企业的清洁验证提供了新方法和新思路。

药品；清洁；验证；风险分析

0 引言

设备的清洁是指在某种条件下，用一种或一套清洗方法，清除残留在设备上可见及不可见产品组分的过程，并达到可接受的残留限度。设备的清洁验证，是企业对其制定的设备清洁规程草案的科学性、合理性、合法性（符合清洁标准）进行确认的过程。

1 清洁标记物和清洁溶剂的选择

1.1 根据风险分析确定清洁标记物

设备清洁的目的是清除残留在设备上可见及不可见产品组分的过程，并达到可接受的残留限度。基于此，可以从残留物的清洁难易程度、毒性大小进行风险评估。其中，清洁难易程度通常取决于每个品种活性成分的理化性质等信息，如溶解度、黏度、吸附性、活性成分的浓度、生产批量、辅料对清洗效果的影响等。

因此，从风险评估的角度考虑，清洁标记物应该是在同种清洁方法、同种清洁剂的情况下，最难清洁的毒性最大的产品。

1.2 根据风险分析选择清洁溶剂

设备清洁的目的是清除残留在设备上可见及不可见产品组分的过程，并达到可接受的残留限度。基于此，清洁剂的选择要考虑在清除残留的同时，不能引入新的有毒物质，因此，清洁剂首先要能溶解清洁标记物，其次要有明确的组成，低毒、易除去，还要有监控清洁剂本身的方法。

对于在水中有一定溶解度的产品，清洁剂应尽量选择水、热水、碱性或酸性水；对于不溶水、极性小的产品，清洁剂首选乙醇，其次选择异丙醇、乙酸乙酯、丙酮、甲基异丙酮等三级溶剂。但需要注意的是，车间要有防爆和防污染的直排设施。另外，一、二级溶剂，如乙氰、氯仿、环乙烷等不能作为清洁剂使用。

2 清洗方法的选择

设备清洁的目的是清除残留在设备上可见及不可见产品组分的过程，并达到可接受的残留限度。基于此，药品专用设备不存在上批产品对下批产品的残留污染问题，通常不需要做残留验证，只需做微生物的清洁验证。而对于共用设备，则必须做残留验证。

根据设备材质、结构、几何形状等特点，可分为易拆卸可擦洗的设备，最好用擦洗法清洁；不易拆卸或拆卸后也无法擦洗的设备，则只能用冲洗法清洁。

冲洗法要求清洗液能到达设备内表面的各部位，被清洗的标记物必须能溶解在清洗液中，以保证冲洗样品的一致性及有效性。

3 活性物质残留限度的确定

通常有4种方法来确定活性物质的残留限度：

（1）目测检查，每次清洁必须先目测检查合格，否则其他的判定标准一定会失败；

（2）以日剂量的0.1%为考核指标；

（3）以残留物浓度限度10 mg/kg为考核指标。

其中，方法2和方法3都涉及到设备表面接触面积的计算，通常可以以单个设备计算活性物质的残留限度，也可以以整条生产线一起计算活性物质的残留限度，由于整条生产线设备的总面积远大于单个设备的面积，也就是限度要小于单个设备的计算限度，相当于降低了污染的风险，因此，可以采用整条生产线的设备计算的限度代替单个设备的限度，作为统一的接受标准。

通常方法2和方法3计算的结果是不同的，有时方法2的限度更低，有时方法3的限度更低，因此，简单地采用方法2或方法3作为活性物质残留限度的计算是不合适的，最好两种方法分别计算，取限度最小者，则是风险最小的。

第4种方法是针对特殊产品而言的，如高毒性、高致敏性的产品，方法2和方法3已经不再适用，由于很低的残留都可能导致过敏反应等，因此，应选择最低检测限度作为标准。

4 根据风险分析确定取样方式和采样点

4.1 取样方式的确定

取样方式通常包括两种：擦拭取样方法和冲洗取样法。擦拭取样方法的优点是更直观、更有效地针对难清洁区域，特别是对已经干燥的或者不溶的残留物进行清洁和评估。冲洗取样法是一种间接的取样方法，直接用取样瓶收集清洗过程中的最终洗出液即可，冲洗取样法的缺陷是收集的残留物浓度很可能代表不了实际残留物浓度。

由于污染物可能是不易清洁的物质或者吸附在设备缝隙中，所以，从降低风险的角度看，首选擦拭取样方法，冲洗取样法可以作为辅助方法。采用擦拭取样方法时要注意棉签对分析方法的干扰，如果棉签选择不当会干扰残留的检测结果，因此，在清洁验证用分析方法验证时要重点关注空白棉签的干扰。

4.2 采样点的确定

选择采样点的原则是必须具有代表性，应包括接触药品多的高浓度区，如搅拌桨；结构复杂难以清洗区，如观察口、阀门、管路接口处等；冲洗也不易达到的区域，如设备投料口等，均应定为擦拭采样点。取样过程要注意，清洁用水和取样用水应采用符合《中国药典（2010版）》规定的纯化水，微生物残留取样应先于活性物质残留取样；生产过程中可先用饮用水清洗设备，最后用纯化水冲洗设备。

5 取样回收率的测定

擦拭取样方法并不能将所有的残留物都收集起来，因此，直接采用擦拭取样方法的测试结果作为残留测试结果是不合适的，通常需要将回收率的结果计算进去，这样才能反映真实的残留情况。

回收率实则包括了取样的回收率和检验方法的回收率。我们采用HPLC法测定药物A和药物B的含量，测定其检验方法的回收率均在98%～102%之间，棉签擦拭回收率主要受到棉签、溶剂、取样员的操作和药物溶出情况的影响，一般回收率在60%以上。因此，为了降低取样不均匀的风险，取样人员要经过严格的培训，取样方法要一致。

6 清洁验证用分析方法验证

清洁验证用分析方法验证通常不同于产品检验的方法，清洁验证用分析方法必须是经过验证的，这样才能保证清洁验证的有效性。验证包括：

6.1 检验方法的专属性

专属性是指在其他成分，如杂质、降解物、辅料等存在的情况下，采用的检验方法能较准确地检测被测物质。

6.2 检验仪器的灵敏度

要求使用的仪器在检测标记物时有足够的灵敏度。常用的检验仪器有：高效液相色谱，是最为广泛使用的分析方法；紫外可见分光光度法，取决于被测物质吸收度的大小；总有机碳测定法（TOC，Total Organic Carbon），具有灵敏度高（＜1 ppb）、测试快速等优点。

6.3 线性

准备至少5个覆盖中间浓度的标准溶液（建议在分析方法浓度的50%～150%之间），相关系数不得小于0.99。

6.4 精密度

系统精密度测定应取标准溶液同法测定6次，检验结果的RSD应不得大于10%。

6.5 检测限（LOD）和定量限（LOQ）

清洁验证分析属于痕量分析。一般使用信噪比法，LOD约是噪音的3倍，LOQ约是噪音的10倍量。

6.6 标记物溶液的稳定性

应考察标记物溶液至少在室温和光照下48 h内的稳定性。如稳定性较低，则检测应在规定的时间范围内完成，以保证数据可靠。

7 持续检测

清洁验证不是一劳永逸的工作，在初始验证合格后，必须定期监测清洁效果的有效性。企业应制定相应的流程，确保清洁效果持续有效。

8 结语

一个优化的、合格的设备清洁验证是企业药品质量的重要保证，是避免污染和交叉污染的有效保障，也是企业节省能源、降低成本的有效方法。设备清洁验证应根据具体问题，进行具体分析，只有运用风险分析和风险控制的指导思想，才能做到有的放矢，效率和成本兼顾。

2015-07-07

王刚（1978—），男，吉林人，工程师，研究方向：质量管理。