淋巴管新生与胃癌淋巴道转移的关系

李开智，刘飞飞，王翠玲，王全义，李珍华

(1.济宁医学院附属医院病理科，山东 济宁272029；2.山东省安康医院，山东 济宁272051)

·临床病理·

淋巴管新生与胃癌淋巴道转移的关系

李开智1，刘飞飞1，王翠玲1，王全义1，李珍华2

(1.济宁医学院附属医院病理科，山东 济宁272029；2.山东省安康医院，山东 济宁272051)

目的检测胃癌组织中血管内皮生长因子(VEGF)-C、VEGF-D及其受体(VEGFR)-3的表达，探讨淋巴管新生与胃癌淋巴道转移的关系。方法应用免疫组织化学方法检测108例胃癌患者(伴淋巴结转移76例，无淋巴结转移32例)癌组织及癌旁组织中VEGF-C、VEGF-D和VEGFR-3的表达。结果胃癌组织中VEGF-C和VEGF-D检测阳性率均明显高于癌旁组织，且二者表达在有、无淋巴结转移组中比较差异有统计学意义(P＜0.05)；VEGF-C、VEGF-D和VEGFR-3之间的表达具有关联。结论VEGF-C、VEGF-D和VEGFR-3可能在胃癌淋巴结转移中起促进作用，联合检测三者表达可能有助于预测胃癌淋巴道转移情况。

胃癌；淋巴管新生；淋巴结转移；免疫组织化学

胃癌是常见的恶性肿瘤之一，发病率及死亡率居各类肿瘤前列，目前患者根治性手术后5年生存率仅30%。淋巴结转移是影响进展期胃癌患者预后的重要因素，近年来关于淋巴管新生在肿瘤扩散过程中的作用日益引起了人们的重视，而血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor，VEGF)对肿瘤淋巴管生成及转移起到不可忽视的作用[1]。在己知的VEGF家族中，VEGF-C、VEGF-D与其受体(Vascular endothelial growth factor receptor，VEGFR)-3在调节淋巴管新生中起到重要作用[2]。本研究旨在探讨VEGF-C、VEGF-D与VEGFR-3在胃癌及癌旁组织中的表达及其与胃癌淋巴道转移的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料108例胃癌标本均来源于本院2009-2013年行胃癌根治术的患者，所有诊断均经组织病理证实。患者年龄23～86岁，中位年龄59.81岁，男:女=4.14:1。其中高、中、低分化腺癌分别为21例、41例和46例；伴淋巴结转移76例，无淋巴结转移32例。所选标本包括癌中心组织和癌旁组织，癌旁组织距肿物边缘在3cm以内。

1.2 方法 所有标本均经4%中性福尔马林缓冲液固定、常规制片、苏木素-伊红(HE)染色、光镜观察，明确病理诊断组织学分级、浸润深度及淋巴结转移情况。免疫组化染色采用SP法，DAB显色。所用抗体(VEGF-C、VEGF-D、VEGFR-3)均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。实验中以PBS液代替一抗为阴性对照，已知阳性切片做阳性对照。

1.3 结果判定 VEGF-C和VEGF-D阳性表达＞10%的肿瘤细胞胞浆内有棕黄色颗粒，VEGFR-3阳性表达＞10%的脉管内皮细胞或肿瘤细胞胞浆内出现棕黄色颗粒。

1.4 统计学方法 应用SPSS19.0统计软件包进行数据分析，计数数据各组间比较采用χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 VEGF-C、VEGF-D的表达与胃癌临床病理参数的关系 VEGF-C、VEGF-D的表达在不同性别及不同分化程度的肿瘤组差异无统计学意义。在有淋巴结转移组中VEGF-C、VEGF-D阳性表达率明显高于无淋巴结转移组，差异有统计学意义(P＜0.05)。在浸润深度上，T2～3与T1比较，VEGF-C和VEGF-D的阳性表达率明显升高(P＜0.05)。VEGF-C在胃癌组织中阳性表达率为31.48%(34/108)，明显高于其癌旁组织的13.89%(15/108)，差异有统计学意义(P＜0.05)。VEGF-D在胃癌组织中阳性表达率为29.63%(32/108)，明显高于其癌旁组织的12.96%(14/108)，差异有统计学意义(P＜0.05)，见表1和图1～图4。

表1 VEGF-C和VEGF-D的表达与胃癌临床病理特征之间的关系

图1 肿瘤细胞呈腺管状浸润性生长(HE×200)

图2 肿瘤细胞VEGF-C阳性(SP法×200)

图3 肿瘤细胞VEGF-D阳性(SP法×200)

图4 肿瘤细胞VEGFR-3阳性（SP法×200）

2.2 胃癌中VEGFR-3的表达与VEGF-C、VEGF-D表达的关系 胃癌组织中随着VEGF-C和VEGF-D阳性表达率的增加，VEGFR-3阳性率明显增加，而VEGF-C和VEGF-D表达阴性者VEGFR-3阳性很少，说明VEGFR-3的表达与VEGF-C和VEGF-D之间具有关联(P＜0.05)，见表2。

表2 胃癌中VEGFR-3的表达与VEGF-C、VEGF-D表达的关系(例)

3 讨论

淋巴道是胃癌转移的重要途径，随着血管内皮生长因子(VEGF-C和VEGF-D)及其受体VEGFR-3的相继发现，对淋巴管新生的研究不断深入。与产生促血管生成因子一样，肿瘤可能产生促淋巴管生成的因子，在促淋巴管生成因子的刺激下，先前存在的淋巴管可能被入侵，同时，高血管密度的血管生成，可能会增加淋巴管间接传播，在淋巴路径形成局部淋巴结转移；许多淋巴管分流可能会绕开局部淋巴结，引起淋巴播散，形成恶性肿瘤早期传播[3]。VEGF-C、VEGF-D与其受体VEGFR-3在调节淋巴管新生中起到至关重要的作用。

在本研究中，淋巴结转移组(N1～3)与无淋巴结转移组(N0)相比较，VEGF-C和VEGF-D的阳性表达率显著增高，VEGF-C与VEGF-D的高表达和淋巴结转移的高发生率一致，说明VEGF-C和VEGF-D对诱导淋巴管新生起到至关重要的作用。同时，VEGFR-3阳性率与VEGF-C和VEGF-D的表达具有关联，说明胃癌组织中VEGF-C、VEGF-D及其受体VEGFR-3相结合对淋巴管新生和肿瘤的淋巴转移可能起到密切相关的作用。在浸润深度上，T2～3与T1比较，VEGF-C和VEGF-D的阳性表达率明显增高，说明VEGF-C和VEGF-D对肿瘤浸润起到促进作用。胃癌组织与癌旁组织相比较，VEGF-C及VEGF-D的阳性率显著升高，说明VEGF-C和VEGF-D在胃癌发展过程中可能起到促进作用。在本研究中，发现胃癌组织中VEGF的表达在不同性别或肿瘤分化程度差异无统计学意义。本课题组在淋巴结转移与浸润深度的研究与相关文献研究基本吻合[4]。

综上所述，VEGF-C、VEGF-D和VEGFR-3可能在胃癌淋巴结转移中起到促进作用，联合检测三者表达有助于预测胃癌淋巴结转移情况，抑制三者功能可能是一个有效的胃癌治疗方法[5]。

[1]Sun L,Duan J,Jiang Y,et al.Metastasis-associated in colon cancer-1 upregulates vascular endothelial growth factor-C/D to promote lymphangiogenesis in human gastric cancer[J].Cancer Lett,2015,357(1):242-253.

[2]Kostis G,Ioannis L,Helen K,et al.The expression of vascular endothelial growth factor-C correlates with lymphatic microvessel density and lymph node metastasis in prostate carcinoma:An immunohistochemical study[J].UrolAnn,2014,6(3):224-230.

[3]Tacconi C,Correale C,Gandelli A,et al.Vascular endothelial growth factor C disrupts the endothelial lymphatic barrier to promote colorectal cancer invasion[J].Gastroenterology,2015,148(7):1438-1451.

[4]Wang X,Chen X,Fang J,et al.Overexpression of both VEGF-A and VEGF-C in gastric cancer correlates with prognosis,and silencing of both is effective to inhibit cancer growth[J].Int J Clin Exp pathol,2013,6(4):586-597.

[5]Villarejo-Campos P,Padilla-Valverde D,Martin RM,et al.Serum VEGF and VEGF-C values before surgery and after postoperative treatment in gastric cancer[J].Clin Transl Oncol,2013,15(4):265-270.

Relationship between lymphangiogenesis and lymph node metastasis of gastric carcinoma.

LI Kai-zhi1,LIU Fei-fei1,WANG Cui-ling1,WANG Quan-yi1,LI Zhen-hua2.1.Department of Pathology,the Affiliated Hospital of Jining Medical University,Jining272029,Shandong,CHINA;2.Shandong Ankang Hospital,Jining272051,Shandong,CHINA

ObjectiveTo study the relationship between lymphangiogenesis and lymph node metastasis of gastric carcinoma by detecting the expression of vascular endothelial growth factor(VEGF)-C,VEGF-D and their receptor-3(VEGFR-3)in patients with gastric carcinoma.MethodsParaffin-embedded specimens from108 patients with gastric carcinoma(including76 patients with lymph node metastasis and32 patients without node metastasis)were used to evaluate the expression of VEGF-C,VEGF-D,and VEGFR-3 by S-P immunohistochemical staining.ResultsThe expression of VEGF-C and VEGF-D was significantly higher in specimens of gastric carcinoma than that of the corresponding adjacent peritumoral tissues.And there was statistically significant difference between the group with lymph node metastasis and the group without lymph node metastasis(P＜0.05).Positive correlation was found among the expression of VEGF-C,VEGF-D and VEGFR-3 in gastric carcinomas.ConclusionVEGF-C,VEGF-D and VEGFR-3 may promote the lymphatic metastasis of gastric carcinoma.Combined detection of these three markers in biopsy specimens of gastric carcinoma may be helpful in predicting the lymphatic metastasis．

Gastric carcinoma;Lymphangiogenesis;Lymphatic metastasis;Immunohistochemistry

R735.2

A

1003—6350（2015）22—3391—03

2015-04-23)

10.3969/j.issn.1003-6350.2015.22.1229

济宁市科技局基金(编号：济科字[2010]85号)

王翠玲。E-mail：Wcuiling690@sina.com