水溶性牡蛎多糖的降血压活性

石璇　郭国丽　马慧慧　佟长青　宫芳婧　曲敏　李伟

摘要：牡蛎中含有丰富的多糖。从牡蛎中制备的水溶性多糖经HPLC测定，其单糖组成为葡萄糖，以葡聚糖分子筛测定其分子量为（3.93～10.84）×106 Da。以牡蛎多糖（7 g/kg）对高血压模型大鼠灌胃均具有较明显的降低收缩压和舒张压作用。

关键词：牡蛎；多糖；降压活性

牡蛎属于软体动物门、瓣鳃纲、列齿目、牡蛎科。牡蛎不但营养丰富，而且还具有一定的药用价值。《神农本草经》中记载牡蛎具有敛阴、潜阳、化痰、软坚等药用价值[1]。我国沿海所产牡蛎有20多种。从渤海、黄海至南海均有养殖，主要的养殖品种有近江牡蛎（Crassostrea rivularis Crould）、褶牡蛎（Crassostrea plicatula）、长牡蛎（Crassostrea gigas Thunberg）、大连湾牡蛎（Crassostrea talienwhanensis）以及密鳞牡蛎（Ostrea denselamellosa Lischke）[2]。研究表明，牡蛎含有氨基酸、多糖、B族维生素、牛磺酸以及钙、磷、铁、锌等成分。临床研究表明，牡蛎具有提高机体免疫力、降血压、治疗失眠、慢性中耳炎、小儿多汗症、子宫肌瘤以及小儿遗尿等作用[3]。

对于牡蛎肉酶解产物降血脂、降血压以及调整血糖的作用已有报道[4]。牡蛎肽具有的抗菌活性也有报道[5]。牡蛎多糖是牡蛎中的重要成分之一。它主要为通过α-（1，4）糖苷键相连且具有α-（1，6）糖苷键分支的葡萄聚糖[6]。对于牡蛎多糖的降血压活性动物实验研究尚未见到报道。本文利用高血压模型Wistar大鼠进行牡蛎多糖降血压作用研究，为利用牡蛎多糖开发降血压功能保健食品提供基础数据。

1材料与方法

1.1材料

牡蛎（Crassostrea gigas）购于大连长兴农贸市场。购回后置于冰箱中（ -20 ℃） 保存，直至使用。

1.2方法

1.2.1牡蛎多糖制备在4 ℃时，清洗牡蛎，在0.5 MPa 压力下，80 ℃蒸煮牡蛎，3 500 r/min离心20 min，弃去沉淀。

将上清液用浓度70%的乙酸调至pH 5，酸解2 h，3 500 r/min离心20 min，弃去沉淀。上清利用膜分离器去除分子量30 000 Da以下的物质，用NaOH调解30 000 Da以上滤液pH至7。加入乙醇使终浓度为70%，3 500 r/min离心20 min离心得多糖沉淀。沉淀溶于蒸馏水中，在蒸馏水中透析后冷冻干燥，制得牡蛎多糖。

1.2.2牡蛎多糖性质按照Fu及ONeill的方法测定水溶性牡蛎多糖中的单糖组成[7]。所得的水溶性牡蛎多糖经三氟乙酸酸解，以3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮（PMP）衍生后用高效液相色谱（HPLC，美国Waters公司）分析。

水溶性牡蛎多糖分子量通过TSK-gel G3000PWXL柱（7.8 mm×30 cm）测定，标准水溶性多糖分子量为10、70、80及500 kDa的葡聚糖。

1.2.3牡蛎多糖降压作用高血压模型Wistar大鼠随机分为3组，每组6只。分别以生理盐水（阴性对照组）、卡托普利 （20 mg/kg）（阳性对照组）和牡蛎多糖（7 g/kg）灌胃，1次/d，2 mL/次，共22 d，通过ALC-NIBP无创血压测量分析系统（上海奥尔科特生物科技有限公司）监测大鼠给药前后血压的变化情况。

1.2.4统计方法用SPSS13.0统计软件进行单因素方差分析处理，p<0.05表示差异显著，数值以（±sd）表示。

2结果与讨论

2.1牡蛎多糖性质

牡蛎多糖经过蒸煮、酸解、醇沉以及干燥等步骤制得。制得的牡蛎多糖经过PMP衍生后，经HPLC检测发现其单糖的组成单位是葡萄糖。这与陈骞报道的牡蛎糖原组成是相同的[8]。牡蛎多糖分子量通过TSK-gel G3000PWXL柱层析测定为（3.93～10.84）×106 Da。本实验所提取的牡蛎多糖分子量比陈骞报道的牡蛎糖原分子量大[8]。

2.2牡蛎多糖降压活性

从试验结果来看，经过灌胃22 d后，高血压大鼠的收缩压明显降低（图1）。牡蛎多糖的降压效果与20 mg/kg的卡托普利相当。其中，牡蛎多糖与阴性对照相比，它们之间的收缩压存在显著性差异（P<0.05）。

经过灌胃19 d后，高血压大鼠的舒张压明显降低（图2）。牡蛎多糖的降压效果与20 mg/kg的卡托普利相当。其中，牡蛎多糖与阴性对照相比，它们之间的舒张压存在显著性差异（P<0.05）。

3结论

牡蛎多糖由葡萄糖组成，是一种相对分子量在数百万至数千万的大分子量多糖。以牡蛎多糖对高血压模型大鼠灌胃均具有较明显的降低收缩压和舒张压作用。随着深入研究，牡蛎多糖可以被开发成降血压的保健食品。

参考文献：

[1]

董晓伟，姜国良，李立德，等.牡蛎综合利用的研究进展[J].海洋科学，2004，28（4）：62-65

[2] 吴涛园，孔恢礼.牡蛎营养功能制品研究进展[J].河北渔业，2007（8）： 6-9.

[3] 冯丽，赵文静，常惟智.牡蛎的药理作用及临床应用研究进展[J].中医药信息，2011，28（1）： 114-116

[4] Tanaka K，Nishizono S，Kugino K，et al.Effects of dietary oyster extract on lipid metabolism，blood pressure，and blood pressure，and blood glucose in SD rats，hypertensive rats，and diabetic rats[J].Biosci.Biotecchnol.Biochem.，2006，70（2）：462-470

[5] Liu Z，Dong S，Xu J，et al.Production of cysteine-rich antimicrobial peptide by digestion of oyster （Crassostrea gigas） with alcalase and bromelin[J].Food Control，2008，19：231-235

[6] 陈骞.牡蛎糖原的提取与抗疲劳活性研究[D].无锡：江南大学硕士学位论文，2005

[7] Fu D，ONeill RA.Monosaccharide composition analysis of oligosaccharides and glycoproteins by high-performance liquid chromatography[J].Analytical Biochemistry，1995，227（2）：377-384

[8] 陈骞，杨瑞金，顾聆琳.牡蛎糖原的研究（I）—牡蛎糖原的分离提取和化学组成[J].食品科学，2005，26（6）：99-101

Abstract：A water-soluble polysaccharide was isolated from Crassostrea gigas （CGPS-1） by hot-water extraction.For the polysaccharide，glucose was the monosaccharide unit.Based on the calibration with Dextran，the CGPS-1 had a molecular weight of about 3.93～10.84×106 Da.The plysaccharides （7 g/kg）have better antihypertensive effect on renovascular hypertensive rats.

Key words：Crassostrea gigas； polysaccharide； antihypertensive effect

（收稿日期：2014-12-08）