PAA-CS超吸水海绵应用于喂服华法林大鼠拔牙创模型的止血效果

张玉成，张欣然，刘 翠，朱 彪，钱智勇，郭希民，郭红延

PAA-CS超吸水海绵应用于喂服华法林大鼠拔牙创模型的止血效果

张玉成1,2，张欣然1,2，刘 翠1,2，朱 彪1,2，钱智勇3，郭希民3，郭红延1

目的 探讨PAA-CS超吸水海绵应用于口腔拔牙创的优势。方法 建立对照组(A组)SD大鼠拔牙创模型和华法林组(B组)SD大鼠凝血功能异常拔牙创模型，以纱布棉球做阴性对照对拔牙创进行止血，比较PAA-CS超吸水海绵与纱布棉球的止血效果。结果 B组凝血酶原时间(s)较A组显著延长[(19.73±2.74)vs(10.04±0.95)，P<0.05]，INR值增大(3.49vs1)。A、B两组中，PAA-CS超吸水海绵止血时间均少于纱布棉球，差异有统计学意义(P<0.05)；A组止血后无继发出血；B组应用纱布棉球止血后有4只继发出血。结论 成功建立了因喂服华法林而导致凝血功能异常的大鼠拔牙创模型，PAA-CS超吸水海绵的止血效果明显优于纱布棉球。

PAA-CS超吸水海绵；华法林；拔牙创止血

心血管疾病已成为中国成人首要的死亡原因，华法林是治疗心血管疾病常用药物[1]。同时,华法林也有不良反应，如导致出凝血时间延长。因此，长期服用抗凝药物华法林的患者,在拔牙时会有出凝血时间延长和持续出血的风险。因此，对这类患者进行拔牙操作，一直被口腔颌面外科视为禁忌。然而,国内外最新研究认为，该类患者可以在不停药的情况下拔牙,条件是在国际标准化率(international normalized ratio，INR)值的安全范围内[2]，同时保证局部有效止血[3],而用合适的材料进行有效止血则是关键的一步。本研究旨在探讨新型止血材料——PAA-CS超吸水海绵用于拔牙创快速止血的效果。

1 材料与方法

1.1 材料 纱布棉球；PAA-CS超吸水海绵由军事医学科学院基础医学研究所研制；华法林钠片由齐鲁制药药业有限公司提供；SD大鼠由军事医学科学院动物实验中心提供；凝血检测仪器是SYSMEX系列CA7000全自动凝血分析仪。

1.2 动物模型的建立 将体重均为300±5 g左右的60只SD大鼠随机分为两组：对照组(A组)30只，每次1 ml生理盐水灌胃，1次/d；华法林组(B组)30只，用生理盐水和华法林粉末混匀(华法林含量0.15 mg/kg[4])，每次1 ml混匀液灌胃，1次/d。两组均给药7 d。

1.3 凝血功能异常的检测 大鼠喂服华法林7 d，全麻后取血3 ml进行凝血四项检测[5]，记录PT，然后计算华法林钠的国际标准化比值INR(INR=PTRISI；PTR 为喂药大鼠PT均值/正常对照PT均值；ISI 为国际敏感度指数1.85)。

1.4 拔牙创模型的建立 两组SD大鼠腹腔注射2%戊巴比妥钠液(30 mg/kg)，固定于实验台，口腔消毒，铺巾。下颌左侧切牙分离牙龈，将牙与牙槽骨轻轻分离使持针器能夹住大鼠下颌切牙即可。快速拔除，以减少出血时间[6](图1)。

图1 SD大鼠拔牙创模型建立

A.完整的大鼠下颌切牙；B.拔下大鼠下颌切牙后出血,拔牙创出血迅速，很快充满口腔内，右侧前牙也很快被血液覆盖；C.拔除下颌切牙后用PAA-CS超吸水海绵止血,30 s后材料紧紧黏附在拔牙创周围，不易被取下来；D.PAA-CS超吸水海绵止血后的大鼠拔牙创，无流动性出血，创面干净

1.5 拔牙创止血 准备质量均等的纱布棉球和PAA-CS超吸水海绵各30块，两组均抽取15只大鼠用纱布棉球止血，另15只用PAA-CS超吸水海绵止血。将纱布棉球或PAA-CS超吸水海绵止血材料按压在拔牙创上30 s后慢慢松开，观察纱布棉球或止血材料止血的情况。如果没有流动性出血，证明止血完全，记录止血时间；如果有流动性出血则继续压迫，直到不出血，记录止血时间。将吸收了血液的纱布棉球和止血材料取下，进行称重，减去止血材料或纱布棉球自身的重量后，记录为出血量。完全止血后的0.5、1、6、12 h，观察有无继发出血情况。

2 结 果

2.1 凝血时间比较 B组凝血酶原时间较A组显著延长[(19.73±2.74)svs(10.04±0.95)s，P<0.05]，INR值增大(3.49vs1)，证明B组大鼠凝血时间延长，凝血受到抑制，模型建立成功。

2.2 拔牙创止血实验 在B组拔牙后，可以观察到拔牙创出血迅速，血液很快充满口腔，右侧前牙也被浸润。分别用纱布棉球和PAA-CS超吸水海绵止血后，按压30 s，观察到两者均有流动性出血。止血完全后，用镊子夹取止血用的PAA-CS超吸水海绵时，观察到止血材料是黏附在拔牙创上的，而纱布棉球较易被取下。A组行常规拔牙。

2.3 止血效果比较 A、B两组中，PAA-CS超吸水海绵止血时间均少于纱布棉球，差异有统计学意义(P<0.05)，而两种材料止血时的平均出血量无统计学差异。A组止血后无继发出血；B组应用纱布棉球止血后有4只继发出血。

组别止血材料止血时间(s)出血量(ml)A组 PAA-CS超吸水海绵60±3①1.37±0.16 纱布棉球90±10 2.29±0.36B组 PAA-CS超吸水海绵60±5①1.82±0.26 纱布棉球120±10 2.73±0.63

注：A组为对照组，B组为华法林组；与纱布棉球比较，①P<0.05

3 讨 论

最近研究表明，服用抗凝药物华法林的患者，可以在不停药的情况下进行拔牙操作[7]，但需要在术后应用有效的止血材料进行止血，目前国内外还没有专门针对服用抗凝药物患者拔牙创应用止血材料的相关研究。临床上医师会要求患者停服1周抗凝药物，然后再进行拔牙操作，但这种方法增加了患者心血管疾病复发的风险。同时，应用纱布棉球止血对凝血功能异常的拔牙创患者达不到预想的止血效果。笔者应用的PAA-CS超吸水海绵是在壳聚糖链上支接了聚丙烯酸，材料依靠强吸水性和壳聚糖的止血特性对拔牙创进行止血[8,9]；材料本身未添加任何凝血因子，生物相容性好；壳聚糖具有抗菌作用，还可促进损伤组织修复。

本实验用剂量为0.15 mg/kg的华法林溶液1 ml[10,11]灌胃给药SD大鼠，经凝血四项检测证实大鼠的凝血功能产生障碍后，进行拔牙操作，成功建立了凝血功能异常的拔牙创大鼠模型。在今后的研究中，本课题组会继续应用同种方法进行其他抗凝药物的大鼠拔牙创模型研究，进而，将PAA-CS超吸水海绵应用于多种模型，检验PAA-CS超吸水海绵对其他拔牙创模型的止血有效性。

本研究中PAA-CS超吸水海绵与纱布棉球的止血效果比较表明，PAA-CS超吸水海绵止血时间明显缩短(P<0.01)，继发性出血情况为零，但出血量无明显差异。总体来说，对于凝血功能正常的拔牙创出血，PAA-CS超吸水海绵和纱布棉球止血效果均可；而对于凝血功能异常的拔牙创出血，PAA-CS超吸水海绵较纱布棉球止血效果更好。这一结果表明，PAA-CS超吸水海绵可能是潜在的口腔拔牙创止血材料，且止血效果明显优于纱布棉球，笔者下一步拟将该材料应用于人口腔拔牙创完全止血，替代临床上用的纱布棉球，提高凝血功能异常患者拔牙的安全性。

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(2015-01-22收稿 2015-04-15修回)

(责任编辑 尤伟杰)

PAA-CS superabsorbent sponge used for hemostasis of tooth extraction wounds in rats fed on warfarin

ZHANG Yucheng1,2，ZHANG Xinran1,2，LIU Cui1,2，ZHU Biao1,2，QIAN Zhiyong3，GUO Ximin3，and GUO Hongyan2.

1.Deptartment of Dentistry，General Hospital of Chinese People’s Armed Police Forces，Beijing 100039，China； 2. Liaoning Medical College，Jinzhou 121001, China; 3.PLA Key Labaratory of Stem Cells and Regenerative Medicine, Beijing Institute of Basic Medical Sciences, Beijing 100850, China

Objective To observe hemostatic effects of PAA-CS(poly(acrylic acid)-chitosan) superabsorbent sponge on SD rats fed on warfarin after their tooth extraction, discussing the advantages of PAA-CS superabsorbent sponge applied for tooth extraction wounds.Methods Group A,a model of tooth extraction wounds of SD rats, and Group B,a model of tooth extraction wounds of SD rats with coagulation function abnormality, were established to carry out hemostasis on tooth extraction wounds with a negative control group using gauze tampons. Hemostatic effects of PAA-CS superabsorbent sponge and gauze cotton balls were compared.Results By four coagulation tests, the coagulation function of rats in Group B became abnormal. During the examination of hemostasis of tooth extraction wounds, the time used for hemostasis by the PAA-CS Superabsorbent Sponge(about 60 s) was significantly less than that by gauze tampons(>90 s,P<0.01). After the PAA-CS superabsorbent sponge was used to stop bleeding of tooth extraction wounds in the bleeding model of rat tooth extraction wounds, there was no secondary hemorrhage and its hemostatic effect was reliable. Conclusions This examination established a model of tooth extraction wounds of rats fed on warfarin resulting in abnormality of rats’ coagulation function successfully. The hemostatic tests have proved that the hemostatic effect of PAA-CS superabsorbent sponge is much better than that of gauze cotton balls.

PAA-CS superabsorbent sponge；warfarin；hemostasis on tooth extraction

武警总医院二类课题基金项目(WZ20130209)

张玉成，硕士研究生，E-mail:yucheng0728@163.com

1.100039 北京，武警总医院口腔医学中心；2.121001 锦州，辽宁医学院；3.100850 北京，军事医学科学院基础医学研究所，全军干细胞与再生医学重点实验室

郭红延，E-mail:ghyfmmu@126.com

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