“瘦肉精”沙丁胺醇及其常用检测方法

孙书刚 李建伟 张富刚 孙书涛 陈国信 河北省沧州市青县农业局 062650

“瘦肉精”主要包括盐酸克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇和塞布特罗等，是属于β 类兴奋剂的苯乙胺类药物。其中的沙丁胺醇属于β2 类兴奋剂。养殖户喂饲沙丁胺醇后，可达到猪群生长速度提高、瘦肉率增加、屠宰后肉色鲜红和脂肪层薄的目的，往往是皮贴着瘦肉，瘦肉丰满，十分迎合大众消费市场。近年来消费者由于误食含有瘦肉精的猪肉而产生不良症状的事件屡有发生，甚至导致集体中毒。

1 沙丁胺醇的危害

沙丁胺醇具有很好的热稳定性及生化稳定性，日常的烹饪很难致其稳定性改变从而失去活性。同时由于人体对沙丁胺醇吸收快、排泄慢，极易在体内产生蓄积。研究发现，沙丁胺醇最易蓄积于眼角膜中，经检测，在毛发、肺、肝等部位也有沙丁胺醇的残留[3]。食用含有沙丁胺醇的猪肉，对心脏和肝肾的毒性较大，同时会引发人体各种不良反应，例如肌肉震颤、心悸、头痛、恶心和失眠等。有报道显示，沙丁胺醇会诱发和加重糖尿病、心血管和脑血管病人的病情，严重威胁着人们的身体健康和生命安全。

2 沙丁胺醇常用检测方法

（1）感官检测。长期饲喂沙丁胺醇的生猪皮肤白里透红、光洁、毛少，臀部结实上翘、匀称呈红亮状。背部被驱打后易见伤痕且长久不消退。行走不灵活，易发生跛行，蹄部易受伤并发生感染[4]。一般健康猪肉呈淡红色，肉质弹性好，不会有“渗血”现象。而饲喂沙丁胺醇比较严重的猪屠宰后，肉色异常鲜红透亮，后臀肌肉饱满，脂肪薄，肉皮紧贴着瘦肉，瘦肉纤维疏松。对屠宰后猪的感官识别，可以快速简便地作出初步判定。

（2）法胶体金免疫层析法。法胶体金免疫层析法具有方便快捷、操作简单、用时少且操作人员不需特殊培训的特点，一般10～15 分钟便可完成初步筛查得出结论。相对与其他检测方法而言，其生产成本和检测成本均较低[5]。但是，法胶体金免疫层析法只能作为样品的初步筛查方法，仅用来判断样品是否可疑，不能准确定性是否含有沙丁胺醇。

（3）酶联免疫吸附法。目前，在我国这种技术已经非常成熟，市场上有很多商品化的检测试剂盒，只要按照试剂盒中的说明书即可完成检测，操作简单快捷，准确率较高。但是需要注意的是，在分子结构方面，沙丁胺醇和克伦特罗较为相似，因此克伦特罗抗体和沙丁胺醇反应具有一定的交叉性，这就会导致同一个样品用沙丁胺醇试剂盒和克伦特罗试剂盒检测，如果是阳性样品就会显示两项都是阳性，不易区分此样品含有哪一种瘦肉精。因此，酶联免疫吸附法也常常用于大批量样品的筛选工作，不能作为最后科学准确定性的依据，必须使用其他方法来进行确证。

（4）气相色谱法。使用气相色谱法（如高效气相色谱法、气相质谱联用法等）来检测动物组织和尿液中的沙丁胺醇含量，目前已经比较成熟，相应的国家标准也已经建立。在使用气相质谱联用法来检测样品中沙丁胺醇含量时，样品通常要经过前处理、净化、衍生化三步后才能置于气相质谱联用分析仪进行分析。样品在进行前处理时，常常使用的是酶解法。不用水解的方法是由于水解法反应非常强烈，并且需要使用浓盐酸或高氯酸，危险性比较大。与水解法相比较，酶解法的优点为较为温和，但是反应的时间较长，常常为十几个小时。净化这一步使用的是固相萃取法，多数实验人员选择使用MCX 或SCX 固相萃取小柱。净化过柱后，使用BSTFA 试剂来进行衍生化。需要注意的是，衍生化一定要防水，尤其值得注意的是空气中的水分对衍生化的干扰较大，衍生完毕后，要置于气相质谱联用分析仪上进行测定[6]。气质联用检测法检测动物组织、尿液中沙丁胺醇时，具有低检出限、高稳定性、高准确性、高灵敏度等优点，通过前处理和净化两步，很大程度上降低了样品中杂质的干扰。但是该方法也有不足之处，例如气相质谱联用分析仪仪器设备昂贵，很难在基层普遍使用。另外，检测操作方法比较复杂，对实验室的要求较高，且检测需要的时间较长，不适用于一线快速检测。

（5）液相色谱法。使用液相色谱法（高效液相色谱法、超高效液相色谱法、液相质谱联用法），不需要对样品进行衍生化，并且样品的处理方法较为简单。秦永平等学者第一个建立了反相高效液相色谱-紫外法，用来检测血浆中沙丁胺醇残留的含量，该方法的最低检测限为0.3ng／g，回收率一般为98%～109%，RSD＜8%。金雁等研究者通过高效液相色谱-二极管阵列检测器来检测动物组织中沙丁胺醇的含量。尚红霞等学者改进此方法，利用大孔吸附树脂进行固相萃取，很好地解决了萃取过程中的乳化难题。二级阵列管检测器的使用，不仅提升检测的准确性，还在很大程度上降低了成本，操作过程简单，易于推广。也有学者利用高效液相色谱-串联质谱法来检测猪肝高效液相色谱法、超高效液相色谱法、液相质谱联用法中沙丁胺醇的残留量，其结果为最低检出限0.1ng／g，平均回收率为76.8%～82.8%，RSD 小于5.8%[7]。此方法具有高灵敏度和高准确性等优点。但是液相质谱仪仪器操作较为复杂，购买及维护价格非常昂贵，也不适用于基层一线检测。超高效液相色谱优点很多，首先其能获得更高的柱效，同时在更宽的线性范围内也可以保持柱效恒定，检测时间明显缩短，试剂耗费显著减少，在分析效率和灵敏度等方面也有很大提高。

3 展望

虽然沙丁胺醇残留检测的方法非常多，但是目前我国行业标准和国家标准中使用的方法为液相质谱联用法和气相质谱法，此两种方法都能够较准确地检测沙丁胺醇的含量，但是样品预处理过程都非常复杂且耗时较长。酶联免疫法处理样品预处理过程操作简便，可同时检测多个样品，很大程度上缩短了分析时间，但是仅可以作为快速筛选手段，不能作为定性确证依据。因此，对液相质谱联用法和气相质谱法的进行简化，对现有复杂、繁琐、耗时长的样品预处理方法的进行改进是非常必要的。这就需要我们监察工作者不断探索新的方法，使得沙丁胺醇的检测工作更加方便、快捷、准确，为老百姓食用放心肉提供可靠保障。

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［2］郑桃源，尹辉龙，肖文庆.建立畜产品质量安全的长效机制的几点建议[J].中国动物检疫，2010，27（4）：22.

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［4］毕玉香.瘦肉精的残留危害及监控对策[J].畜牧兽医科技信息，2009，4（6）：136.

［5］管健，王立媛，吴平谷，等．同位素作内标气质联机测定动物源食品中4 种β2-兴奋剂的含量［J］.中国卫生检验杂志，2007，17（12）：2194-2196．

［6］王建平，史为民，沈建忠．免疫亲和色谱-气相色谱／质谱法（I-AC-GC／MS）检测猪肝中的沙丁胺醇与克伦特罗［J］.畜牧兽医学报，2007，38（3）：271-275．

［7］谷丽丽，李飞，牛英豪，等．沙丁胺醇的病理作用研究及其液相色谱-串联质谱方法的检测［J］.食品科学，2010，31（3）：224-229．