清热胶囊正交优选水提工艺*

蹇小婷 郭 冬 李彤晖 王春柳

西电集团医院 (西安 710077)

清热胶囊正交优选水提工艺*

蹇小婷 郭 冬△李彤晖△王春柳△

西电集团医院 (西安 710077)

目的：探索清热胶囊提取工艺。方法：采用正交实验方法，选用三因素、三水平即L9(34)试验表安排实验，以方中君药龙胆所含主要成分龙胆苦苷为指标，用高效液相色谱法测得其含量[1]，同时测定水提干膏得率，通过方差分析，得出水提次数、加水量和水提时间最佳参数，并进行三批验证实验，获得最优水提工艺。结果：加12倍量水，煎煮2次，每次1.5h。结论：水提工艺方法科学、稳定、可操作性强。

清热胶囊来源于我院临床长期使用的经验方，由龙胆、黄柏、柴胡等10味中药组成，具有清热解毒，利尿通淋作用。用于心烦急躁，大便秘结，小便黄赤，或尿急，尿频等疾病，疗效显著。临床以汤剂使用，服用、携带、储藏很不方便，因此选用服用量小、稳定、崩解度快的胶囊剂剂型进行研究，针对水提部分药材用正交试验方法筛选工艺条件，而君药龙胆中的龙胆苦苷具有抗炎、抗病原微生物等作用，以龙胆苦苷为指标，兼顾水提出膏率能较全面的筛选最好水提工艺条件。

1 仪器与试药 1.1 仪 器 日本岛津Waters2690型高效液相色谱仪，UV-VIS紫外-可见检测器,十八烷基硅烷键合硅胶柱(250mm×4.6mm)；塞多利斯电子天平(d=0.01,北京)。

1.2 试 药 乙腈为色谱纯，水为纯净水，其他试剂均为分析纯。龙胆苦苷对照品(供含量测定用，110770-201013)、对照药材均购自中国药品生物制品检定所。所用中药材均购自盛兴中药饮片厂，经检验全部符合《中国药典》2010年版一部规定[2]。

2 方法与结果 2.1 提取正交实验设计[3]正交实验因素为提取次数、提取时间及加水量，每因素选三个水平[1]。见表1。

表1 水提正交因素水平表

2.2 供试品的处理 按处方比例称取龙胆等水提部分药材共九份，以L9(34)表进行试验，过滤提取液，定容。

2.3 干浸膏制备 精密量取各提取液50mL，分别置于已恒重的蒸发皿中，水浴蒸干，残渣于105℃烘箱干燥5h，至恒重。放冷，迅速称重，结果见表2。

2.4 龙胆苦苷的含量测定[4]色谱条件：色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶；流动相：甲醇-水(25∶75)；检测波长为270nm；流速：1.0mL/min；柱温：30℃；对照品溶液制备：精密称取龙胆苦苷对照品适量，加甲醇制成0.2148mg/mL的溶液，即得。供试品溶液制备：精密量取上述各提取液5mL，置10mL容量瓶中，加入甲醇定容，粗滤，再用0.45μm微孔滤膜精滤，得滤液，即得[2]。分别精密吸取对照品溶液及供试品溶液各10μL，注入液相色谱仪测定，结果见表2。方差分析结果见表3、表4。

2.5 验证试验 因提取最佳工艺不在九组试验中，为此进行验证试验，从结果得出，龙胆苦苷含量及浸膏得率均高于正交表中最优值，说明选择提取条件合理，工艺稳定，结果见下表5。

表2 L9(34)正交试验安排及数据分析表

表3 干膏方差分析

注：F0.1(2.2)=9.00， F0.05(2.2)=19.00，F0.01(2.2)=99

表4 龙胆苦苷方差分析

注：F0.1(2.2)=9.00， F0.05(2.2)=19.00，F0.01(2.2)=99

由表3显示，提取时间、加水量、提取次数均无显著影响，其影响顺序为加水量>提取次数>提取时间；从表4可知，提取时间、加水量、提取次数均无显著影响，其影响顺序为加水量>提取次数>提取时间，结合大生产实际及耗能，因此最佳提取条件为B3C2A2，即最佳工艺为加12倍量水，提取2次，每次1.5h。

表5 验证试验结果

3 讨 论 清热胶囊水提工艺的加水量、提取时间、提取次数是决定药物疗效的主要因素；正交实验优选水提工艺，指标的选定非常关键。本方中的君药为龙胆，龙胆苦苷为其主要成分[3-4]；而水溶性成分是中药汤剂起治疗作用的部分，因此以龙胆苦苷含量和水提出膏率两个指标作为正交实验评价指标，能客观、全面的筛选出最佳水提工艺条件。通过三批验证试验及中试放大实验,证明该提取工艺准确、简便、可行。

[1] 李 馨,王金宏.HPLC法测定龙胆中龙胆苦苷的含量[J].黑龙江医药,2010,(23)3:319-320.

[2] 国家药典委员会．中国药典[S]． 北京：人民卫生出版社,2010:291.

[3] 王 凌,白吉庆，李 芳，等.正交试验法优选养心开郁片的水提取工艺[J].陕西中医, 2013,(33)12:1666-1667.

[4] 王艳艳,王英平.龙胆化学成分及药理作用研究进展[J].特产研究,2006,17:68-71.

(收稿2014-12-01;修回2015-01-22)

*西安市科技计划项目SF1205-(5)

色谱法,高压液相 @清热胶囊

R282

A

10.3969/j.issn.1000-7369.2015.05.044

△陕西省中医药研究院 (西安 710003)