细胞角蛋白在微转移检测中的意义

李勇

(武警辽宁省总队医院妇产科,辽宁沈阳110000)

细胞角蛋白在微转移检测中的意义

李勇

(武警辽宁省总队医院妇产科,辽宁沈阳110000)

目的探讨广谱细胞角蛋白CK对宫颈癌患者盆腔淋巴结微转移情况的检测价值，所获数据采用χ2检验。方法利用CK免疫组织化学染色法对40例宫颈癌患者的229枚腋窝淋巴结进行微转移检测。结果40例患者中有17例发现有微转移，免疫组化有更好的敏感性，两种检测方法差异有显著性(P<0.05)。结论应用CK免疫组织化学法对检测宫颈癌盆腔淋巴结进行微转移是可行的，对指导治疗、判断预后具有积极的临床意义。

宫颈癌；盆腔淋巴结；微转移；免疫组织化学法

宫颈癌(cervical cancer)是一种对女性威胁较大的恶性肿瘤，其发病率逐年增高。宫颈癌的转移与复发仍然是宫颈癌治疗和预后的关键[1]。因此，如何早期判断宫颈癌是否出现淋巴结转移具有重要意义。目前，临床上常发现规范的宫颈癌根治术中清扫盆腔淋巴结，经常规病理检查未查见转移灶，但术后患者的复发与转移率仍高。这说明在术前已存在肿瘤微小癌灶。微转移（micrometastasis)是指常规病理HE染色组织切片不易发现的直径≤2mm，且＞0.2mm的肿瘤转移灶[2]，这可能是导致患者术后复发及远处转移的重要原因。因此，能否采用新的检测方法并发现评估宫颈癌潜在转移，使我们能够更有针对性的采取个体化治疗，对于改善患者预后有着重要意义[3]。

细胞角蛋白（Cytokeratin，CKs）在上皮细胞中广泛存在。目前在临床上，有关以CK作为肿瘤微转移标志物检测乳腺癌、胃癌、肺癌,大肠癌等患者淋巴结中的微转移检测已有广泛应用，发现此标志物的检测较敏感且高特异性。有作者使用常规病理切片HE染色联合CK免疫组化法检测对宫颈癌患者盆腔淋巴结转移的检出率有明显提高[4]。为此，我们通过研究细胞角蛋白CK对宫颈癌盆腔淋巴结转移或己经存在微转移的检测的效果。现报道如下。

1 临床资料

1.1 纳入标准宫颈癌根治性手术40例，所有患者

肿瘤组织均经常规病理检查并确诊为宫颈浸润性鳞癌。术前均未行放疗、化疗和其他治疗。患者年龄30～75岁，平均51.0岁。肿瘤直径：小于4 cm者26例，大于等于4 cm者14例。肿瘤组织细胞的分化程度：I级患者2例，II级患者27例，III级患者11例。10例经常规病理证实发现有盆腔淋巴结转移，其余患者未见转移。

1.2 标本收集及检测经常规病理检查证实有13枚淋巴结有癌转移，其余淋巴结未见转移。每个标本连续切3张（4μm厚度）分别行免疫组化染色及HE染色，同时1片备用。阳性微转移淋巴结切片的鉴别均采用由两位病理科医师分别鉴别的双盲法，两人都判定为阳性的为淋巴结微转移阳性。两人判断结果有歧义，经第三人会诊确定。实验中设立阴、阳性对照。

1.3 检测标准CK免疫组织检测的阳性细胞标准：结合切片中染色细胞形态，发现细胞质内和(或)胞膜上有棕黄色颗粒沉着，其直径≤2mm，且＞0.2mm的肿瘤转移灶判断为微转移阳性。

1.4 统计学处理应用SPSS16.0软件，所获数据采用χ2检验。

2 结果

宫颈鳞癌组织的CK检测的阳性率为100%（40/ 40)，常规病理检查已证实转移的淋巴结其CK检测的阳性为100%(13/13)，229个淋巴结中，CK检测的阳性率为8.73%(20/229)，经常规病理检查阴性淋巴结的CK的阳性率为3.24%(7/216)。17例患者的未发现转移的淋巴结中7枚存在微转移。

3 讨论

肿瘤的微转移灶在光镜下检测较容易被漏诊，分子生物学的发展使得对肿瘤微转移进行检测成为可能[4]。本研究采用CK免疫组化染色来判断宫颈癌患者盆腔淋巴结转移和微转移状况，发现宫颈癌患者淋巴结微转移是客观存在的，这使我们能够更全面认识宫颈癌患者淋巴结的转移状态，从而为手术方案的制定及后继个体化治疗提供理论依据以提高术后生存率。

宫颈癌患者淋巴结中存在的小簇的肿瘤细胞通过淋巴道转移到其他组织、器官后是否会出现继发性癌灶，这与患者的身体状态及原发灶、转移灶中肿瘤细胞的组织学类型新址的凋亡基因开放度有密切关系。当术后患者的免疫降低时，这些肿瘤细胞可能会出现增殖，潜在的肿瘤转移会演变为显性转移，进而影响患者的预后。

由于宫颈癌淋巴结中转移和微转移的肿瘤细胞与正常细胞颜色相似，在常规病理检查中，观测切片中是否存在有微转移灶不易，而淋巴结CK免疫组化染色法对检测转移和微转移癌灶较敏感。患有宫颈恶性肿瘤的患者行根治性手术后，其复发及远处转移常常是由潜在的淋巴道中微移发展而来的。由于患者免疫系统的“监视”，这些癌细胞可能会处于“非活动”状态。由于肿瘤的转移是一个复杂的过程，局部复发与远处转移是否发生决定于很多因素，如癌生物学特性、患者免疫强弱、局部微环境等。有作者对宫颈癌随访患者淋巴结进行CK19免疫组化的检测[5]，发现了宫颈癌患者盆腔所清扫的淋巴结中常规病理检查为阴性的淋巴结中的微转移，通过对患者随访，发现这些微转移阳性的患者的预后较差。尽管宫颈癌患者的盆腔淋巴结是否发生微转移在宫颈癌的临床分期中不像乳腺癌那样明显，但是若我们了解患者的淋巴结微转移状态，其后续的治疗方案可能有所改变。研究表明，同期的宫颈癌患者发生淋巴结转移后其5年生存率低[6]，复发率高[7]，可能这些患者术后体内，特别是淋巴道内存在着微小转移灶的缘故[8,9,10]，这或许是造成患者术后肿瘤复发和转移的原因。CK免疫组化法微转移检测将使我们对宫颈癌术后的诊治有更多的选项，因为这提供了对肿瘤早期转移及亚临床转移更精确的诊断方法，也为宫颈癌患者术后的预后研究并真正实现患者个体化治疗提供了坚实的基础。CK免疫组化对于早期宫颈癌来说微转移灶的早期检出，对于评价早期宫颈癌微转移和预后都具有重要意义。

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R737.33

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1008-4118（2015）03-0007-02

10.3969/j.issn.1008-4118.2015.03.003

2015-04-28