母血中胎儿DNA、胎盘mRNA对于诊断前置胎盘并胎盘粘连的临床意义

冯会

摘要：目的 探讨母血中胎儿DNA、胎盘mRNA对于诊断前置胎盘合并胎盘粘连意义。方法 选取我院自2012年4月～2014年4月收治的60例经B超检查确诊为胎盘前置的单胎孕妇作为本次研究的观察组研究对象，其中胎盘粘连的观察A组孕妇30例，胎盘未粘连的观察B组患者30例，选取同期的30例正常接受身体检查的妊娠期孕妇作为对照组，对比三组患者的母血中胎儿DNA含量以及胎盘内mRNA含量。结果 观察A组患者的母血中胎儿DNA含量明显高于对照组，数据对比差异具有统计学意义，P<0.05；观察A组患者的mRNA含量明显高于观察B组和对照组，三组数据对比差异具有统计学意义，P<0，.05；观察B组的DNA含量明显高于对照组，观察B组中胎盘的mRNA含量与对照组对比差异不具有统计学意义，P>0.05。结论 孕妇外周血中胎儿DNA含量直接影响患者胎盘是否发生粘连情况，胎盘内mRNA含量直接反应胎盘是否出现粘连情况。因此在产前检查中测定母血中胎儿DNA、胎盘mRNA含量情况能够有效的预测胎盘前置以及粘连情况。

关键词：胎儿DNA；胎盘mRNA；前置胎盘；胎盘粘连

前置胎盘是指胎盘的附着位置比较靠子宫下段或者下缘部位，或者覆盖宫颈内口位置，该位置明显低于胎儿的显露部位。前置胎盘孕妇妊娠期比较严重的并发症，一般发病率为0.24%～1.57%，在妊娠晚期很容易导致孕妇大出血，影响母婴的生命安全[1]。我院在是通过实时荧光定量PCR法来测定孕妇外周血液中胎儿DNA含量以及胎盘中mRNA含量来测定前置胎盘以及胎盘粘连情况，现将研究结果报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取我院自2012年4月～2014年4月收治的60例经B超检查确诊为胎盘前置的单胎孕妇作为本次研究的观察组研究对象，其中胎盘粘连的观察A组孕妇30例，年龄在24～33岁，平均年龄为（26.7±1.6）岁，平均妊娠时间为（31.4±1.2）w；胎盘未粘连的观察B组患者30例，孕妇年龄在25～35岁，平均年龄为（31.0±0.4）岁，平均妊娠时间为（32.5±0.3）w；选取同期的30例正常接受身体检查的妊娠期孕妇作为对照组，年龄在27～32岁，平均年龄为（29.7±1.4）岁，平均妊娠时间为（32.3±1.4）w。

1.2试剂和设备的选择 试剂的选择：德国的QLAamp DNAmini Kit、Qiagen Protease、Buffer AL；PCR反应试剂，由上海博亚生物技术有限公司生产的引物SRY-109F： RY-254R5'-CCCCCTAGTACCCTGACAATGTATT-3'；探针由上海博雅生物技术有限公司提供，RY-142T：5'-（FAM）AGCAGTAGAGCAGTCAGGGAGGCAGA（TAMRA） -3'设备的选择：由上海医疗器械五厂提供的型号为H.H.S11-2型号的电热恒温水浴锅，由上海医用分析仪器厂制造型号为TGL-16的台式高速离心机；由德国Biometra公司生产的型号为FTC-2000的荧光定量PCR仪。

1.3方法 收集三组研究对象外周血液8ml，胎盘血液8ml，然后分别放入EDTA抗凝管内，经3000g的离心处理10min，将上层的离心出来的血浆取出，然后在进行3000g离心处理10min，再将上层的血浆提取出来，保存于温度在零下20℃的冰箱内；DNA和mRNA的提取，按照DNA和mRNA的提取盒说明进行操作，分别从离心并冷藏处理的血浆中提取50uL的DNA和mRNA提取物[2]。

1.4统计学分析 采用SPSS18.0统计学软件对数据进行处理分析，计数资料用率表示，采用χ2检验，计量资料采用（x±s）表示，用t检验，P<0.05为差异显著，具有统计学意义。

2 结果

观察A组、观察B组和对照组孕妇的外周血液中胎儿DNA含量（copies/ml），胎盘中mRNA含量（copy/ug）对比，观察A组的孕妇胎儿DNA含量明显高于观察B组和对照组孕妇，三组数据对比差异具有统计学意义，P<0.05，见表1。

胎盘位置的不同对于胎盘内mRNA和孕妇外周血液中DNA的含量（copies/ml）变化情况，检测显示孕妇外周血液中胎儿DNA含量（copy/ug），胎盘中mRNA含量与胎盘是否前置影响不大，见表2。

3 讨论

前置胎盘严重影响了母婴在分娩时的生命安全，虽然其发病率较低，同时出现胎盘粘连的情况也较低，但是其危害性较大所以一直是妇产科中非常关注的研究重点，本次研究中观察A组的孕妇外周血液中胎儿DNA含量和胎盘中mRNA含量均明显高于对照组和观察B组，三组数据对比差异具有统计学意义，P<0.05。

前置胎盘合并胎盘粘连的孕妇外周血液中胎儿的DNA来源有3点：①在胎盘粘连的过程中母胎界面需要重新塑造，在重塑的过程中细胞会出现凋亡现象，这样坏死细胞便会释放出胎儿的DNA进入到母体的血液中[3]；②胎儿细胞由于胎盘粘连的原因，然后直接进入母体的组织并进行血液循环，但是会出现免疫组织排斥的情况，然后将细胞杀死释放出胎儿的DNA；③胎盘内处于游离状态的DNA沿着粘连组织直接进入母体的血液循环系统。

mRNA即信使核糖核酸，该物质也携带由遗传信息的蛋白质合成物[4]，它能够从脱氧核糖核酸（简称DNA）中转录合成携带遗传信息的核糖核酸，本次研究中胎盘组织中基质金属蛋白酶（简称MMP）在胎盘粘连的组织中mRNA的表达水平高于未发生粘连的观察B组和对照组，因此表示胎盘界面的MMP增加了子宫细胞外基质的弹力蛋白以及胶原蛋白的水解，从而导致细胞过度的侵入从而造成组织的粘连现象[5]。

综上所述，孕妇产前检查时一定要详细检查孕产妇外周血液中胎儿DNA含量以及胎盘内组织的mRNA含量，从而预测胎盘发生粘连情况，做好相应的准备工作，尽可能的降低分娩时产妇和婴儿的危险。

参考文献：

[1]徐爱群，边旭明.胎儿游离RNA在产前诊断中的研究进展[J].国际妇产科学杂志， 2010，30（4）：442.

[2]段涛，黄一颖.母血中胎儿DNA预测前置胎盘合并粘连的探讨[J].现代妇产科进展，2010，15（11）：854-855.

[3]李凌.人工流产与前置胎盘、胎盘粘连及胎盘植入的临床发生率研究[J].医学信息，2013，（18）：71-71.

[4]张潇潇，陈廉.前置胎盘的病因研究及分类[J].实用妇产科杂志，2009，25（10）：577-578.

编辑/哈涛