脑膜瘤患者围手术期脑脊液中MMP—2、MMP—9、HGF水平的动态变化及其临床意义

胡俊峰　王建祯

摘要：目的 研究脑膜瘤患者围手术期脑脊液中基质金属蛋白酶（MMP-2、MMP-9）及肝细胞生长因子（HGF）水平的动态变化并探讨其临床意义。方法 2013年5月～2014年10月在我院神经外科手术的42例脑膜瘤患者作为实验组，所有病例均为我院病理科诊断为脑膜瘤患者，依据WHO脑肿瘤分级将所有患者分为低级别组（I级）和高级别组（Ⅱ-Ⅲ级），选取同期10例门诊健康体检人群为对照组，行腰椎穿刺分别采集患者术前24h、术后24h、术后72h和术后120h脑脊液。采用ELISA法检测标本中MMP-2、MMP-9、HGF的表达水平并进行统计学分析。结果 42例脑膜瘤患者术前CSF中MMP-2、MMP-9、HGF水平显著增高（P<0.05），其中高级别组CSF中MMP-2、MMP-9、HGF水平显著高于低级别组（P<0.05）；CSF中MMP-2、MMP-9、HGF的水平在手术后24h内明显降低。结论 脑膜瘤患者脑脊液中MMP-2、MMP-9、HGF的水平与对照组相比都有显著性差异，这些细胞因子可能在脑膜瘤免疫和侵袭中起主导或决定性作用；脑膜瘤患者脑脊液中MMP-2、MMP-9、HGF的表达在高级别与低级别之间有显著性差异，可以作为脑膜瘤级别的参考指标，其水平在术后24h内明显降低，可能与载瘤状态解除有关，可以作为预测患者临床预后的生化指标。

关键词：脑膜瘤；基质金属蛋白酶；肝细胞生长因子；脑脊液

浸润性是脑膜瘤重要的生物学特征，肿瘤组织产生的多种蛋白酶对细胞外基质和基底膜的降解是肿瘤浸润和转移的首要条件。MMP-2、MMP-9是最重要的基质蛋白酶，HGF是一种多肽生长因子，与其受体结合后，具有强促分裂、组织形成、诱导肿瘤细胞迁移、侵袭以及诱导血管生成等作用，本研究应用ELISA法检测脑膜瘤患者围手术期脑脊液中MMP-2、MMP-9、HGF水平的动态变化，以探讨这些酶的表达与肿瘤恶性程度及预后的关系。

1 资料与方法

1.1一般资料 2013年5月～2014年10月在我院神经外科手术的42例脑膜瘤患者作为实验组，年龄12～60岁，平均38.5岁，其中男18例，女24例，所有病例均由我院病理科确诊为脑膜瘤患者，依据WHO脑肿瘤分级将所有脑膜瘤患者分为低级别组（I级）和高级别组（Ⅱ-Ⅲ级），其中低级别组29例，高级别组13例；选取同期10例门诊健康体检人群为对照组，年龄26～60岁，平均38.8岁，其中男4例，女6例。所有手术治疗均得到我院伦理委员会同意，术前均行手术风险评估，告知患者及家属手术风险及术后可能并发症，并签手术知情同意书。

1.2方法 术前高颅压患者，给予甘露醇脱水降颅压治疗，幕上肿瘤患者给予丙戊酸钠预防癫痫，同时纠正水、电解质紊乱，控制血脂、血糖、血压，改善胃肠道功能。42例手术患者均用显微技术切除，14例位置表浅并远离功能区行肿瘤全切除，5例肿瘤临近重要功能区，行肿瘤部分切除，17例肿瘤呈弥漫性生长而无明显边界，6例肿瘤部位较深。严格按照腰椎穿刺操作规范，实验组患者分别留取术前24h、术后24h、术后72h和术后120h脑脊液。采集脑脊液后，立即行脑脊液常规生化检查，剩余标本4℃4000×r/min离心20min后，收集上清液置于-80℃冰箱保存，对照组处理方法同手术组，采用双抗夹心酶联免疫吸附法，根据试剂孔的OD值与空白孔OD值得差值作为纵坐标，以标准品浓度作为横坐标绘制相关曲线，依待测标本的OD值查得其浓度。

1.3统计学分析 所有数据均以±标准差（x±s）表示，采用统计学软件SPSS 17.0对数据进行分析，应用t检验及单因素方差分析比较各组间差别和组内不同时间点的差别，P﹤0.05代表有统计学差异。

2 结果

42例脑膜瘤患者手术均顺利完成，无术后脑脊液漏、颅内血肿及切口感染等近期并发症，2例术后出现胃肠紊乱，内科治疗后均缓解，实验组和对照组年龄差异无统计学差异，MMP-2、MMP-9、HGF水平结果如表1。

高级别组中MMP-2、MMP-9、HGF水平明显高于低级别组，结果如表2。

脑膜瘤患者CSF中MMP-2、MMP-9、HGF术后较术前明显降低，结果如表3。

3 讨论

脑膜瘤是脑肿瘤系统中仅次于胶质瘤的常见肿瘤，它不仅向颅骨及硬膜浸润，还可向脑组织浸润。MMP-2、MMP-9是Ⅳ型胶原酶，能降解以Ⅳ型胶原为主的细胞外基质和基底膜，在肿瘤浸润转移中起着重要作用。HGF是一种多肽生长因子，与其受体结合后，具有强促分裂、组织形成、诱导肿瘤细胞迁移、侵袭以及诱导血管生成等作用。因此我们对42例脑膜瘤CSF中MMP-2、MMP-9、HGF进行ELISA检测，发现术前脑脊液中MMP-2、MMP-9、HGF水平显著增高（P<0.05）；高级别组的脑脊液中MMP-2、MMP-9、HGF水平显著高于低级别组（P<0.05），MMP-2、MMP-9、HGF水平在手术后24 h内明显降低，MMP-9在三个指标中差异最显著，灵敏度较高。

Sandeng等在恶性及浸润性脑膜瘤中检测到MMP-9高表达，在良性脑膜瘤中MMP-9少量表达，MMP-2在良、恶性脑膜瘤中均高表达。本研究显示高级别组中MMP-9、MMP-2高表达，MMP-9水平明显高于MMP-2、HGF，表明侵袭性脑膜瘤高分泌MMP-9，MMP-2可能又通过激活MMP-9协同作用[1]，从而共同降解细胞外基质和基底膜，促进肿瘤细胞向周围侵袭，MMP-9和MMP-2共同高表达在脑膜瘤浸润中起重要作用。术后MMP-9、MMP-2水平的降低，这可能与载瘤状态解除有关，也提示它有可能来源于肿瘤细胞本身或肿瘤刺激周围正常细胞产生，MMP-9、MMP-2与浸润性脑膜瘤存在的关系密切，可以作为脑膜瘤预后重要参考指标，值得深入研究。

HGF最初是从部分肝切除的大鼠血小板和血浆中纯化获得，被认为是一种刺激肝细胞增生的因子，其主要通过细胞膜上的特异性跨膜受体C-Met而发挥生物学效应，HGF是有效的血管生成因子，能诱导多种上皮细胞形成分支管状结构，具有直接刺激微血管内皮细胞生长作用。在本研究中，HGF在高级别组中高表达，其原因可能是HGF与C-Met结合后激活受体发生自身磷酸化，进而导致多种底物蛋白磷酸化，从而形成一种包括膜外结合位点、跨膜蛋白、膜内激酶区域完整的细胞膜受体，决定着脑膜瘤的浸润能力，术后因肿瘤消失而逐渐降低，在高级别组中表达高于低级别组，其水平与肿瘤恶性程度呈正相关。Martinez-Rumayor A等对42例脑膜瘤患者的研究发现，测定HGF及其受体C-Met在脑膜瘤中的表达可以作为一个脑膜瘤复发预测因素。

脑膜瘤的发生发展是多方面、多因素共同作用的结果，在对肿瘤的研究中，许多学者对多种因素进行的大量的研究，但是，最终没有找到令人满意的答案，本研究中MMP-2、MMP-9、HGF与脑膜瘤的密切相关性，为脑膜瘤临床的治疗提供了有力的参考价值，笔者相信，对脑膜瘤细胞因子的深入研究可能会推动肿瘤生成机制、以及肿瘤治疗的研究进展。

参考文献：

[1]Fridman R，Toth M，Pena D.et al.Activation of progelatinase B（MMP-9）by gelatinase A（MMP-2）[J].Cancer Res，1995，55：2548.编辑/哈涛