新生儿呼吸道分离凝固酶阴性葡萄球菌耐药性分析*

郭瑞林，李凯旋，苏 冰，郭建春，董昌虎，张晓雪

(陕西中医学院第二附属医院检验科，陕西咸阳 712000)



·论 著·

新生儿呼吸道分离凝固酶阴性葡萄球菌耐药性分析*

郭瑞林，李凯旋，苏 冰，郭建春，董昌虎，张晓雪

(陕西中医学院第二附属医院检验科，陕西咸阳 712000)

目的 探讨新生儿呼吸道感染凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)的耐药特点，指导临床合理用药和预防院内感染。方法 采用K-B纸片扩散法，测定CNS对l6种抗菌药物的耐药性。结果 1 332例新生儿呼吸道标本中检出CNS 132例，阳性率10.1%，其中耐甲氧西林CNS检出14例，占CNS的10.6%。132例CNS对青霉素类(97.7%)、红霉素(77.3%)、克林霉素(57.6%)耐药率较高，对头孢吡肟(7.2%)和头孢哌酮/舒巴坦(9.7%)耐药率较低，对万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺全部敏感。结论 CNS为新生儿呼吸道感染的重要致病菌，临床医生应根据新生儿感染CNS的药物敏感试验结果合理使用抗菌药物。

新生儿； 呼吸道感染； 凝固酶阴性葡萄球菌； 耐药性； 院内感染

凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)广泛存在于自然界和人体表面，是引起各种院内感染的常见致病菌。新生儿免疫系统不健全，呼吸道抵抗力较弱，在生产过程和出生后极易发生呼吸道CNS感染，因此，针对新生儿呼吸道感染CNS的治疗尤为重要。现将本院2012年1月至2013年12月新生儿病房呼吸道分离CNS 132例的耐药性进行分析，以期为临床合理使用抗菌药物提供依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 本院新生儿病房2012年1月至2013年12月送检的疑为呼吸道细菌感染患儿痰标本共1 332例。

1.2 仪器与试剂 分离培养基哥伦比亚羊血平板、巧克力平板、麦康凯平板由郑州安图生物工程股份有限公司生产，药敏培养基M-H琼脂由法国生物梅里埃公司生产，细菌鉴定采用API或手工鉴定，药敏纸片由英国Oxold公司生产。

1.3 方法

1.3.1 新生儿留取痰标本的方法 先清洁口腔，将一次性婴儿吸痰管的长管接好负压吸引器，用无菌持物镊将插入管经口咽或者呼吸道轻轻插入，开动吸引器，此时痰液慢慢吸出，并流入婴儿吸痰器中，吸痰完毕，分开接头，用一次性吸痰器的无菌盖将痰液存于痰液器中密封后送检。

1.3.2 细菌分离与鉴定 严格按照《全国临床检验操作规程》第3版和本科室操作规程执行，细菌鉴定采用API 微生物鉴定系统[1]。

1.3.3 药敏试验方法和资料统计 按美国临床和实验室标准化协会(CLSI)规定K-B纸片扩散法进行试验，根据2012年CLSI标准判断药敏试验结果，将中介并入耐药结果。

1.3.4 耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)检测 MRCNS的检测采用CLSI推荐的头孢西丁纸片扩散法(K-B法)进行筛选，即抑菌环直径小于或等于24 mm为MRCNS耐药菌株。用琼脂扩散进行确证，在含4%氯化钠注射液，6 μg/mL苯唑西林M-H平板中点种0.5麦氏单位菌液，经35 ℃，24 h孵育，只要有一个菌落生长即判断为MRCNS[2]。

1.3.5 质量控制 以金黄色葡萄球菌(ATCC 43300)为葡萄球菌阳性参考菌株，葡萄球菌(ATCC 12228)为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌阴性参考菌株，药敏质控菌株与试验菌株同时进行检测。

1.4 统计学处理 采用WHONET5.6软件统计分析药物敏感试验结果。

2 结 果

2.1 检出阳性率 1 332例新生儿呼吸道标本中检出CNS 132例，阳性率10.1%，其中MRCNS检出14例，占CNS的10.6%。CNS以表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌、人葡萄球菌为主，表皮葡萄球菌76例(57.6%)，溶血葡萄球菌28例(21.2%)，人葡萄球菌16例(12.1%)，松鼠葡萄球菌6例(4.5%),华纳葡萄球菌1 例(0.8%)，耳葡萄球菌1例(0.8%)，孔氏葡萄球菌1例(0.8%)，其他葡萄球菌3例(2.3%)。

2.2 细菌药敏试验结果 132例CNS对青霉素类耐药率达95.0%以上、对红霉素耐药率77.3%、对克林霉素耐药率57.6%、对复方磺胺甲噁唑耐药率51.5%；对4代头孢菌素头孢吡肟和3代头孢加酶抑制剂头孢哌酮/舒巴坦耐药率低于10.0%；对万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺全部敏感。各种抗菌药物对CNS药敏试验结果见表1。

表1 凝固酶阴性葡萄球菌药敏试验结果[n(%)]

3 讨 论

CNS是除金黄色葡萄球菌外的一类葡萄球菌，大量存在于人体表面，正常条件下不致病，但某些情况如免疫力降低或接受一些侵入性治疗容易引起CNS感染。新生儿免疫系统不健全，抵抗力差，可能存在体质量极低、中心静脉置管、胃肠外营养以及广谱抗菌药物不合理使用等因素，使CNS感染的机会大大增加[3]。感染新生儿的主要环境包括母婴同室时的产科病房、新生儿病房、新生儿重症监护病房等，主要通过母体及医护人员的手、口鼻、医疗器械、暖箱、奶嘴、衣物、敷料等物品在医护人员或患者间播散。特别是CNS能产生黏质物，在其表面形成生物膜，对光滑的生物医学材料具有吸附作用，细菌藏于厚厚的生物膜内，使抗菌药物治疗效果较差[4]。

本研究1 332例疑为新生儿呼吸道感染患者标本中检出CNS 132例，阳性率10.1%，其中MRCNS 14例，占CNS的10.6%。表皮葡萄球菌在新生儿呼吸道CNS感染中有76例，占57.6%，与彭敬红等[5]的报道一致，由此提示新生儿呼吸道感染不可忽视表皮葡萄球菌感染。

新生儿呼吸道分离CNS对青霉素类耐药率达95.0%以上，对红霉素、克林霉素、复方磺胺甲噁唑耐药率大于50.0%,表现为多重耐药。本研究尚未发现万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺耐药株。万古霉素和替考拉宁是针对成人葡萄球菌感染的首选抗菌药物，但它们对耳、肾的不良反应较大，新生儿患者使用应十分慎重，未成熟的新生儿，最好测定血清药物浓度以积累使用经验。万古霉素在肺组织的浓度低，并不推荐用于肺部感染的治疗[6]。

利奈唑胺是一种新型恶唑烷酮类合成抗菌药物，2000年获得美国食品和药物管理局批准上市，已被批准用于新生儿和儿童，此类药物对各类耐药的革兰阳性球菌具有抗菌活性，通过抑制细菌蛋白质起始阶段的合成发挥作用，与其他抑制合成的抗菌药物很少有交叉耐药，且体外不易诱导细菌耐药性产生[7]。国内一项研究也显示利奈唑胺对革兰阳性球菌包括耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染的疗效和安全性良好[8]。利奈唑胺在肺组织具有较高浓度，利奈唑胺在治疗新生儿革兰阳性球菌感染的有效性和安全性方面取得良好效果[9-11]，在治疗新生儿呼吸道CNS感染时值得进一步积累经验。

其他敏感性较高的抗菌药物包括头孢噻肟、头孢吡肟、头孢哌酮/舒巴坦等。头孢噻肟为第3代头孢菌素，抗菌谱广，对大部分非耐药革兰阴性杆菌有良好的抗菌活性。本研究显示，头孢噻肟对CNS也具有良好的抗菌活性，可作为经验用药之一。头孢吡肟虽然体外耐药率(7.2%)较低，但在新生儿的治疗经验较少，对2个月以下儿童使用本品应谨慎。舒巴坦为一种不可逆的β-内酰胺酶抑制剂，与第3代头孢菌素联合应用具有良好的杀菌活性。本项研究证明头孢哌酮与舒巴坦的复合制剂在体外具有良好的抗菌效果，耐药率为9.7%，是控制新生儿感染的良好抗菌药物，可作为治疗新生儿呼吸道CNS感染的经验抗菌药物之一。总之，CNS呼吸道感染治疗中应尽量根据药敏试验结果合理使用抗菌药物，避免盲目用药或联合使用。

新生儿发生的呼吸道CNS感染多为院内感染，防范是重点。应积极做好产前保健，预防早产及羊膜早破，减少产前、产时窒息损伤、减少气管插管机会；应加强对产房和新生儿病房的院内感染防范，规范工作人员手消毒；在产科新生儿室和儿科新生儿病房内一旦出现院内感染，应予以高度重视，尽快清除病原体和传播途径，积极采取相应消毒隔离措施，防止发生院内交叉感染和大规模暴发流行。临床用药应根据药敏试验结果并结合新生儿CNS呼吸道的特点合理使用抗菌药物，加强耐药监测和感染控制，从而改善CNS耐药现状。

[1]叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程[M].南京:东南大学出版社，2006:1744．

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Resistance analysis of coagulase negative staphylococcus in newborn respiratory tract samples*

GUORui-lin,LIKai-xuan,SUBing,GUOJian-chun,DONGChang-hu,ZHANGXiao-xue

(DepartmentofClinicalLaboratory,theSecondAffiliatedHospitalofShanxiUniversityOfChineseMedicine,Xianyang,Shanxi712000,China)

Objective To explore drug resistance characteristics of neonatal respiratory infections coagulase-negative staphylococci (CNS),and to guide clinical rational drug use and to prevent nosocomial infection.Methods K-B disk diffusion method was used to determinate CNS on l6 antimicrobial drug resistance.Results CNS 132 cases were detected from 1 332 cases of neonatal respiratory specimens,the positive rate was 10.1%,in which MRCNS detected in 14 cases,accounting for 10.6% of coagulase-negative staphylococci.And 132 coagulase-negative staphylococci had higher resistance rates to penicillin (97.7%),erythromycin (77.3%),clindamycin (57.6%) ;had lower resistance rates to cefepime (7.2%) and cefoperazone/sulbactam (9.7%),and with all sensitive to vancomycin,teicoplanin,linezolid.Conclusion CNS might be important pathogenic bacteria for neonatal respiratory tract infection,clinicians should rational use of antimicrobial drugs based on the results of drug susceptibility testing of newborns infected with CNS.

newborn; respiratory infections; coagulase-negative staphylococci; resistance; nosocomial infections

陕西省咸阳市科学技术研究发展计划项目(2011K13-2)。

郭瑞林，男，本科，主任技师，主要从事微生物检验与细菌耐药研究。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.03.014

A

1672-9455(2015)03-0322-02

2014-07-07

2014-10-15)