茶树花多糖微波辅助提取工艺
2015-03-12韩艳丽凡军民李静贾君何宜艳
韩艳丽 凡军民 李静 贾君 何宜艳
摘要:采用微波辅助法从茶树花中提取茶多糖,通过单因素试验、正交试验,以茶多糖提取率为指标,研究茶树花多糖微波辅助提取的最佳工艺。结果表明,茶树花微波辅助提取的最佳工艺参数为:微波强度100%,浸提时间1 h,料液比1 g ∶15 mL,提取温度50 ℃。在此条件下,茶树花多糖提取的最佳工艺参数为:醇沉浓度80%,醇沉温度 25 ℃,醇沉时间6 h,提取率为2.61%。微波提取法能显著缩短提取时间,较大程度地提高茶多糖的提取率。
关键词:茶树花;茶多糖;微波;提取工艺
中图分类号: TS201.1文献标志码: A文章编号:1002-1302(2015)02-0273-02
收稿日期:2014-04-23
基金项目:江苏农林职业技术学院重点课题(编号:28012011)。
作者简介:韩艳丽(1979—),女,江苏徐州人,硕士,副教授,从事食品分析与检验技术研究。Tel:(0511)87290302;E-mail:45600134@qq.com。茶树花是茶树的生殖器官之一,因花芽生长发育时要从茶树中吸取养分,影响茶叶的产量、质量,茶农常修剪弃之或任其自生自灭,很少加以利用。近年来,研究人员发现,茶树花化学成分与茶鲜叶相似,且多糖含量比新茶叶高[1]。茶多糖具有一定生理活性,具有降血糖、降血脂、增强免疫功能、降血压等作用[2-5]。茶多糖提取主要采用微波法[6]、超声波[7]、酶法提取法[8]等,目前关于茶树花多糖的提取研究较少。本试验以茶树花为原料,采取微波辅助法提取茶树花中的多糖,探讨微波处理强度、微波处理时间、料液比、浸提时间、醇沉浓度、醇沉温度、醇沉时间等因素对茶多糖提取率的影响,旨在为茶树花多糖的提取以及茶树花资源的开发利用提供依据。
1材料与方法
1.1材料
茶树花采于江苏农林职业技术学院茅山校区江苏茶博园内。摘取新鲜的茶树花,装入牛皮纸袋中,置于干燥箱中105 ℃下杀青10 min,70 ℃下烘干,粉碎,过60目筛备用。
1.2方法
1.2.1茶树花多糖提取工艺流程称取茶树花粉→乙醇处理→微波处理→真空抽滤→浓缩→加无水乙醇→离心→醇沉→真空干燥→获得茶树花多糖。
1.2.2微波处理单因素试验设计选择微波强度、浸提时间、料液比、温度为考察因素,每因素设定3个水平,即微波强度设定为50%、75%、100%;浸提时间设定为0.5、1.0、2.0 h;料液比设定为1 g ∶5 mL、1 g ∶15 mL、1 g ∶25 mL;提取温度设定为40、50、60 ℃。以茶树花提取率为指标,研究微波处理茶树花的最佳工艺条件。
1.2.3正交试验设计在单因素试验基础上,以醇沉浓度、醇沉温度、醇沉时间为考察因素,采用正交试验对微波辅助提取茶树花多糖工艺进行研究(表1),确定茶树花多糖微波辅助提取的最佳工艺参数。
1.3测定项目
1.3.1茶多糖含量测定采用蒽酮-硫酸比色法,将上述提取的茶树花多糖加蒸馏水复溶、定容至设定体积,用蒽酮-硫酸显色后,依据葡萄糖标准曲线A=0.007 6C+0.003 4(r=0.999 6),计算葡萄糖质量浓度(C),由精制茶多糖测得茶多糖相对葡萄糖的换算因子f=4.220。
1.3.2茶多糖提取率计算[6] 多糖提取率计算公式如下:
多糖提取率(%)=C×D×f×100/m。(1)
式中:C为葡萄糖质量浓度(mg/mL),D为多糖稀释倍数,f为换算因子,m为供试茶树花质量(g)。
2结果与分析
2.1微波处理单因素试验
2.1.1不同微波强度对茶树花多糖提取率的影响取5 g茶树花粉,加95%乙醇溶液浸泡,用不同强度的微波处理 30 s,浸提时间为1 h,料液比为1 g ∶15 mL,提取温度为 60 ℃,醇沉浓度为70%,醇沉温度为15 ℃,醇沉时间为12 h,提取茶树花多糖。由图1可知,随着微波强度的增加,茶树花多糖提取率也逐渐增高,当微波强度为100%时,茶树花多糖提取率显著增加。因此,茶树花多糖微波辅助提取工艺最适宜的微波强度为100%。
2.1.2不同浸提时间对茶树花多糖提取率的影响取5 g茶树花粉,加95%乙醇溶液浸泡,用100%强度的微波处理30 s,料液比为1 g ∶15 mL,提取温度为60 ℃,醇沉浓度为70%,醇沉温度为15 ℃,醇沉时间为12 h,考察不同浸提时间对茶树花多糖提取率的影响。由图2可知,随着浸提时间的延长,茶多糖的提取率呈先升高后下降的趋势 其中浸提1 h
茶树花多糖提取率最高,达1.98%,所以茶树花多糖微波辅助提取工艺最适宜的浸提时间为1 h。
2.1.3不同料液比对茶树花多糖提取率的影响取5 g茶树花粉,加95%乙醇溶液浸泡,用100%强度的微波处理 30 s,浸提时间为1 h,提取温度为60 ℃,醇沉浓度为70%,醇沉温度为15 ℃,醇沉时间为12 h,考察不同料液比对茶树花多糖提取率的影响。由图3可知,当料液比为1 g ∶15 mL时,茶树花多糖提取率最高。另外,从成本角度分析,料液比不可能无限量增大。因此,树花多糖微波辅助提取工艺中最适宜的料液比为1 g ∶15 mL。
2.1.4不同提取温度对茶树花多糖提取率的影响取5 g茶树花粉,加95%乙醇溶液浸泡,用100%强度的微波处理30 s,料液比1 g ∶15 mL,浸提时间1 h,醇沉浓度70%,醇沉温度15 ℃,醇沉时间12 h,考察不同提取温度对茶树花多糖提取率的影响。由图4可知,当提取温度为 40 ℃ 时,提取率为1.92%;提取温度为50 ℃时,提取率为2.31%;当提取温度高于60 ℃时,随着提取温度升高,茶树花多糖提取率急剧下降,这可能是由于温度过高对茶树花多糖有破坏作用,所以茶树花多糖微波辅助提取工艺中最适宜温度为50 ℃。endprint
2.2茶树花多糖微波辅助提取工艺正交试验
在单因素试验的基础上,取5 g茶树花粉,选择微波强度
100%、料液比1 g ∶15 mL、浸提时间1 h、提取温度50 ℃,对茶树花粉进行微波辅助处理,醇沉过程中,选择醇沉温度、醇沉时间、醇沉浓度,得出茶树花多糖最佳提取工艺参数。由表2可知,各因素对茶多糖提取率影响从大到小依次为醇沉浓度>醇沉温度>醇沉时间,茶树花多糖醇沉最佳提取工艺组合为A3B3C3,即醇沉浓度80%,醇沉温度25 ℃,醇沉时间 24 h。由表3可知,醇沉浓度对茶多糖提取率在0.1水平有显著影响。综合考虑提取效率,醇沉时间可选6 h。综上所述,确定茶树花多糖醇沉最佳工艺组合为A3B3C1,即醇沉浓度80%,醇沉时间25 ℃,醇沉时间6 h。根据茶树花多糖醇沉最佳工艺组合重复试验3次,提取茶树花多糖提取率为2.61%。
3结论
茶树花多糖含量相对较高,微波提取法能显著缩短多糖提取时间,较大程度地提高茶多糖的提取效率,且微波辅助提取法对茶多糖等的化学结构并无影响[9]。本试验采用微波辅助技术 对茶树花多糖的提取工艺进行了研究,结果表明,
茶树花微波处理最佳工艺参数为微波强度100%,浸提时间 1 h,料液比为1 g ∶15 mL,提取温度为50 ℃。在此微波辅助条件下进行正交试验,得到茶树花多糖提取的最佳工艺参数为醇沉浓度80%,醇沉温度25 ℃,醇沉时间24 h,提取率为261%,比杨玉明等水提法提取茶多糖提取率[10]高。
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