全自动固相萃取-高效液相色谱-荧光检测法测定生活饮用水中苯酚

张玲玲 顾耀秦

（苏州大学卫生与环境技术研究所 江苏苏州 215000）

酚类化合物中苯酚的毒性最大，苯酚是重要的有机化工原料，在化工原料、合成纤维、塑料、合成橡胶、医药、农药、香料、涂料和炼油等工业中有着广泛的用途。因此苯酚对水体有着很大的影响。是水污染的重要来源，其生活饮用水也深受其害。生活饮用水中苯酚含量较低，水样在测定之前需要前期的预富集处理。常用的处理方法有液液萃取、固液萃取、浊点萃取。液液萃取等方法其操作繁琐，消耗大量的有机试剂，对人体和环境造又成很大的危害和二次污染；浊点萃取作为一种新兴的萃取方法具有安全、节约、操作简单、毒性小的优点，目前被广泛的应用于金属离子、生物大分子、有机污染物等物质的提取中。但是表面活性剂的选择浓度，添加剂、溶液的PH和离子强度、平衡时间温度等对浊点萃取的萃取效率有着很大的影响。固相萃取法是目前替代液液萃取的最主要技术，如今固相萃取已经被广泛认为是水样中待测化合物提取净化的首选方案。特别是全自动固相萃取仪，不仅操作简便，减少手动操作所产生的误差，减少有机溶剂的用量，而且时间大大缩短，可以做到无人看守，大大提高了实验的工作效率。建立全自动固相萃取-高效液相色谱-荧光检测器测定饮用水中苯酚的分析方法，操作简便、准确度、精密度高，适用于饮用水中苯酚的含量测定，结果令人满意。

1 实验

1.1 仪器与试剂

高效液相色谱仪：AllianceE2695-2475荧光检测器(美国Waters公司)。

全自动固相萃取仪：LabTechSepLine-S4（北京莱伯泰科公司）

氮吹仪：AUTOSCIENCEMTN-2800W

苯酚标准溶液：1.0g/mL 色标5mL（天津光复精细化工研究所）

四氢呋喃:色谱纯4L 批号123829（美国赛默飞世尔科技）

甲醇：色谱纯4L 批号124635（美国赛默飞世尔科技）

乙酸：分析纯 500mL批号20140305（国药集团化学试剂）

乙酸铵：分析纯 500g 批号20141114（国药集团化学试剂）

1.2 标准曲线的配制

将1.0g/mL的苯酚标准溶液用水分步稀释成1000μg/mL、1.0μg/mL最后稀释为100μg/L的苯酚标准使用液100mL。

准确移取苯酚标准使用液：10μL、20μL、40μL、120μL、200μL、280μL、400μL于1.5mL液相色谱专用样品瓶中定容到1mL。标准曲线系列溶度：1.0μg/L、2.0μg/L、4.0μg/L、12.0μg/L、20.0μg/L、28.0μg/L、40.0μg/L。

在后续发展中，相关养殖人员以及疾病防控单位应进一步将非洲猪瘟重视起来，针对具体的防控办法及疫苗等进行研究，尽量将这一疾病对我国猪养殖业的影响降低到最小，避免因为这一疾病导致养殖人员遭受经济损失，最终达到促进我国养殖业不断发展的目的。

1.3 样品处理

水样-饮用水均为实验室自来水。

1.3.1 用固相萃取专用样品瓶分别取2份50mL水样。

1.3.2 将样品瓶放置全自动固相萃取仪的样品板盘上，并放置收集瓶于全自动固相萃取仪的收集盘上，收集洗脱液，注意样品瓶、收集瓶的位置编号。

1.3.3 加载苯酚萃取方法（如图1）并运行仪器参数

Condition润洗——10mL纯化水，流速10.0mL/min

SampleLoading上样——50mL水样，流速10.0mL/min

Flowpathrinsing淋洗——10mL纯化水，流速10.0mL/min

Elution洗脱——5.0mL四氢呋喃，流速5.0mL/min

图1 全自动固相萃取苯酚萃取方法

1.3.4 等整个方法运行结束后将收集瓶取下，将洗脱液氮吹浓缩至近干，然后用水重新定容至1mL，待测。

1.4 色谱条件

检测波长：激发波长:230nm 发射波长:320nm

色谱柱：WatersXBridger-C18（3.5um 4.6*150mm）

柱温箱温度：25℃

流动相：甲醇+0.01mol/L乙酸-乙酸铵缓冲溶液（PH=4.0）=55+45

流速：1.0mL/min

进样量：20ul

2 结果与讨论

2.1 苯酚标准品色谱图（如图2）

图2 苯酚4.0ug/L 的标准品

2.2 标准曲线及方法检出限

根据信噪比S/N=3计算检出限，苯酚的检出限为：1.0ug/L。

图3 苯酚标准曲线图（y=3.624e+001+1.658e+002 R2=0.9995）

2.3 回收率与精密度

取5份49.7mL水样分别加入100μg/L苯酚标准使用液300μL，即样品加标为6.0μg/L，取5份48.6mL水样分别加入100μg/mL苯酚标准使用液1400μL，即样品加标为28μg/L。按照苯酚萃取方法（如图1）进行萃取，按照1.4色谱条件进行检测。

表1 回收率与精密度实验

3 结语

本实验表明全自动固相萃取-高效液相色谱-荧光检测器测定饮用水中苯酚的分析方法操作简便、准确度精密度高，减少手动萃取带来的误差，可以做到无人萃取，节省时间，提高了实验效率，便于大批量样品的测定。

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