类风湿性关节炎患者血清抗环瓜氨酸肽抗体水平及溶血对检测结果的影响

胡慧霞 郭日函琳 李 艳

类风湿性关节炎患者血清抗环瓜氨酸肽抗体水平及溶血对检测结果的影响

胡慧霞 郭日函琳 李 艳*

目的：检测类风湿性关节炎(RA)患者血清抗环瓜氨酸肽抗体(Anti-CCP)水平，并分析溶血对电化学发光法检测Anti-CCP结果的影响。方法：采集45例RA患者(RA组)、45例其它风湿性疾病患者(对照组)及30例体检健康者(正常组)血液标本，平行检测血清Anti-CCP水平；另将RA组全血标本置于-20℃冰箱过夜，使其溶血，检测溶血标本(RA溶血组)血清Anti-CCP水平。结果：RA组血清Anti-CCP水平(476.13±66.75U/ml)显著高于正常组(7.73±3.18U/ml)和对照组(47.17±5.84U/ml)，溶血标本血清Anti-CCP水平(573.85±77.17U/ml)明显高于未溶血标本，差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论：RA患者Anti-CCP水平升高，标本溶血对电化学发光法检测Anti-CCP会产生正干扰。

类风湿性关节炎；抗环瓜氨酸肽抗体；溶血；电化学发光

类风湿性关节炎(Rheumatoid Arthritis，RA)是一种最常见的自身免疫性疾病，既往以类风湿因子(RF)和X线检查作为RA辅助诊断的常用指标，临床确诊时多已是RA的进展期或晚期[1，2]。因此，早期诊断RA并进行药物治疗，对控制病情非常重要。抗环瓜氨酸肽抗体(Anti-Cyclic Cirullinated Peptide Antibodies,Anti-CCP)是RA的高特异性血清标志物[3-4]。化学发光法定量检测Anti-CCP具有很好的敏感性和特异性[5]，本文检测RA患者血清Anti-CCP水平变化及溶血对电化学发光法检测结果的影响。

1 资料与方法

1.1 对象和分组

2012年-2014年本院门诊及住院RA患者(RA组，45例，男18例，女27例，平均年龄43±10岁)、其它风湿性疾病患者(对照组，45例，包括18例系统性红斑狼疮、13例强直性脊柱炎、10例骨关节炎、4例干燥综合征，其中男17例，女28例，平均年龄44±13 岁)及同期体检健康者(正常组，30例，其中男15例，女15例，平均年龄41±15岁)。RA临床诊断主要依据2010年美国风湿病学会及欧洲抗风湿病联盟(ACR/EVLAR)共同修订的RA诊断标准[6]。其它疾病的诊断均符合各自疾病的国际诊断标准。三组间性别、年龄差异均无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2 检测方法

取对照者及患者治疗前清晨空腹肘静脉血4ml，RA组患者多取4ml置-20℃冰箱过夜，使之溶血(RA溶血组)，分离4组血清标本，采用Cobase 601全自动电化学发光免疫分析仪(电化学发光法)及配套试剂(罗氏公司，德国)检测各组Anti-CCP水平。

1.3 统计学处理

2 结 果

各组间血清Anti-CCP水平差异有统计学意义(F=115.76，P<0.01)。RA组血清Anti-CCP水平显著高于对照组和正常组，差异均有统计学意义(P均<0.01)；RA溶血组血清Anti-CCP水平高于RA组，差异亦有统计学意义(t=4.52，P<0.05)。见表1。

表1 各组Anti-CCP检测结果

注：与正常组和对照组比较，1)P<0.01；与RA组比较，2)P<0.05

3 讨 论

RA是一种自身免疫性疾病，致残率高，一般在发病2年左右即可发生不可逆性的骨关节损害，因此，早期诊断和治疗，防止关节畸形显得尤为关键。Anti-CCP是环状聚丝蛋白的多肽片段，是以IgG型为主的抗体，虽然在RA发病中的致病机制还未完全明确，但是作为疾病早期诊断指标展现了较好的作用。Anti-CCP检测对RA疾病诊断具有较高的特异性和敏感性[7]。有学者[8]认为，Anti-CCP不仅是RA早期诊断指标，而且是鉴别侵蚀性和非侵蚀性RA的敏感指标，Anti-CCP阳性者较Anti-CCP阴性更容易发生或发展成严重关节骨质破坏。本文结果显示，RA患者血清Anti-CCP水平显著高于健康对照者和其它风湿性疾病患者(P<0.01)，再次验证了血清Anti-CCP水平升高可作为诊断RA的特异性指标。

化学发光法原理是进行待测物质浓度与光量子数之间的换算，理论上标本颜色变化不会影响待测物浓度。因此，采用化学发光法检测溶血标本血清Anti-CCP水平与非溶血标本应无差别。徐克等[9]报道，当血红蛋白<5g/L时对Anti-CCP检测结果无明显影响。但本文结果显示，溶血标本的Anti-CCP检测值明显高于非溶血标本，其间的原因以及与溶血程度是否具有相关性有待进一步研究。因而提醒检验人员在检测血清Anti-CCP时采用新鲜无溶血标本，以保证检测结果的准确可靠。

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本文第一作者简介：

胡慧霞(1983-)，女，汉族，硕士

1 Svensson B, Hafstrom L. Effect on joint destruction and remission, bone turnover and lack of influence on atherogensis: A review of the barfot low-dose prednisolone studies on patients with early RA[J]. Clin Exp Rheurmatol, 2011,29(5S):S63-S67.

2 乐惠荣，袁 慧.类风湿性关节炎患者抗环瓜氨酸肽抗体检测的临床分析[J].微循环学杂志，2008，18(3)：73，75.

3 张 园，张吟眉，崔丽艳，等.抗CCP抗体、抗角蛋白抗体及类风湿因子联合检测在类风湿关节炎诊断中的应用[J].中华检验医学杂志，2014，37(7)：582-586.

4 van Venrooij WJ, van Beers JJ, Pruijn GJ. Anti-CCP antibody, a marker for the early detection of rheumatoid arthritis[J]. Ann N Y Acad Sci,2008,1 143:268-285.

5 徐雪亮，缪 怡，张 琦. 电化学发光免疫测定法检测抗环瓜氨酸肽抗体的方法比较[J]. 诊断学理论与实践，2011，10(3)：260-262.

6 吕 芳，李兴福. 2010年美国风湿病学会联合欧洲抗风湿病联盟的类风湿关节炎分类标准解读[J]. 诊断学理论与实践，2010，9(4)：307-310.

7 Correia ML, Carvalho S, Fortuna J, et al. Comparison of three anti-CCP antibody tests and rheumatoid factor in RA and control patients[J]. Clin Rev Allergy Immunol, 2008,34(1):21-25

8 Nielen MM, van Schaardenburg D, Reesink HW, et al. Specific autoantibodies precede the symptoms of rheumatoid arthritis: a study of serial measurements in blood donors[J]. Arthritis Rheum, 2004,50(2):380-386.

9 徐 克，李素蘋，金珍术，等.电化学发光法测定血清抗环瓜氨酸肭抗体的临床应用[J].现代实用医学，2013，25(12)：1 383-1 384.

武汉大学人民医院，武汉 430060；*

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本文2014-12-06收到，2015-02-10修回

R593.22 R446.11

A

1005-1740(2015)02-0064-02