MMP-9表达在胃癌转移侵袭中的作用*

黄宇珊　刘汉冕　曾书君　许良峰　严　山　陈惠新

(惠州市中心人民医院，广东 惠州　516001)

MMP-9表达在胃癌转移侵袭中的作用*

黄宇珊刘汉冕曾书君许良峰严山陈惠新

(惠州市中心人民医院，广东 惠州516001)

摘要：目的探讨MMP-9表达在胃癌转移侵袭中的作用。方法选取我院2012年1月至2015年1月间确认的胃癌患者26例，作为观察组，再选取26例非胃癌患者作为对照组，采用免疫组织化学S-P法，用MMP-9单克隆抗体对两组患者进行表达情况的标记分析。结果在观察组的胃癌组织中，其阳性表达分别在胃癌的淋巴结转移、浸润深、肿瘤分化程度及TNM分期达到64.5%、50.0%、60%、60%，对照组中的正常胃组织中无阳性表达。两组间数据比较，差异显著，具有统计学意义(P<0.05)。结论在胃癌组织中MMP-9的表达与胃癌的淋巴结转移、浸润深、肿瘤分化程度及TNM分期都有着较为密切的关系，可以将其作为标志对其侵袭性与转移性加以判断。

关键词：MMP-9；胃癌；转移侵袭

胃癌是癌症中的一大杀手，其致死的原因集中体现在侵袭与转移方面。所以，应该对其转导机制加以研究，以便对其采取防预措施。根据研究来看，对胃癌转移与侵袭方面的判断可以通过肿瘤相关蛋白检验[1]。本次研究选取我院2012年1月至2015年1月间确认的胃癌患者26例作为观察组，再选取26例非胃癌患者作为对照组，在探讨胃癌组织MMP-9基因表达方面对胃癌的侵袭与转移作用中，取得了较好效果。现将具体情况报告如下。

1资料与方法

1.1一般资料选取我院2012年1月至2015年1月间确认的胃癌患者26例作为观察组，其中，男性18例，女性8例，年龄在37岁到72岁，平均年龄为(51.23±2.03)岁，均未进行化疗与放疗治疗。再选取26例非胃癌患者作为对照组，其中，男性17例，女性9例，年龄在41岁到73岁，平均年龄为(54.26±1.89)岁，排除重症非典型增生者。

1.2方法准备切片，以石蜡标本连续切片为宜；选择试剂：S-P试剂盒，兔抗人抗MMP-2多克隆抗体，羊抗兔二抗，兔抗人抗PGP9.5多克隆抗体。其次，染色。对切片进行常规HE、S-P(也称作链霉素亲和素—生物素—过氧化酶复合物)法染色；第三，严格依照染色程序，以说明书具体要求，按照步骤进行实验；设立对照，应该对每组染色进行对照，并且需要一抗为阴性对照；第四，观察：其阳性与阴性结果表示及判断，主要以胞膜、胞质内呈现棕黄色颗粒，或者出现团块作为阳性结果；并且应该按照常规方法，以每视野中计数大约一百个细胞中的阳性细胞数为主要标准，通过百分数形式表示出细胞的阳性指数。用符号可表示为阳性细胞<10%标为阴性，用符号表示为“-”，不<10%或≥10%为阳性，用符号表示为“+”。

2结果

在正常胃组织中均无表达，在观察组的胃癌组织中，其阳性表达分别在胃癌的淋巴结转移、浸润深、肿瘤分化程度及TNM分期达到64.5%、50.0%、60%、60%，而且表明MMP-9的表达与胃癌的淋巴结转移、浸润深、肿瘤分化程度及TNM分期都有着较为密切的关系，其中MMP-9表达与胃癌临床病理学特征的关系具体如表1所示。

表1　MMP-9表达与胃癌临床病理学特征的关系

3讨论

胃癌是严重威胁着人类健康，对其转移机制的研究至今未能进行明确阐释。但是根据近些年来的研究表明，诸多胃癌患者切片有关胃癌的表达中，IL-8自分泌趋化因子、受体、及相应受体的结合，可能会通过Raf- Raf-MEK-MAPK通路，从而对肿瘤造成较大刺激，激发其不断增长，经过该方式的刺激，也可能使血管新生，促进细胞外基质降解的间接作用，从而命名肿瘤发生增长与转移[2]。因此，研究中提示，胃癌转移可能与该经典通路有关[3]。所以，对其下游的靶基因进行研究就显得尤其重要了。其中，基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)家族值得进一步研究[3]。而MMP-9即是其家庭成员之一， MMP-9，又称基质金属蛋白酶-9，英文全称为matrix metalloproteinases 9， 归类于明胶酶，或IV型胶原酶，其作用是，利用降解细胞外间质与基底膜，为肿瘤侵袭与转移提供便利。

在本组研究中，主要是探讨MMP-9?表达在胃癌转移侵袭中的作用。根据对胃癌组织切片、染色后进行的观察研究表明：在正常胃组织中均无表达，在观察组的胃癌组织中，其阳性表达分别在胃癌的淋巴结转移、浸润深、肿瘤分化程度及TNM分期达到64.5%、60%、50.0%，而且表明MMP-9的表达与胃癌的淋巴结转移、浸润深、肿瘤分化程度及TNM分期都有着较为密切的关系。基质金属蛋白酶-9是以前酶原形式表达和分泌(其中包括结缔组织细胞、巨噬细胞、肿瘤细胞等)，其氨基酸序列中有四大区域，一是活性前区，二是催化基团，三是细胞外基质同源序列区，四是C-末端区；在其调节方式中，主要是依靠转录调节来实现表达，集中于启动子区的多个转录因子(比如C-Jun、Ets-1)结合位点。

研究发现，在基质金属蛋白酶-9上调中，需要结合位点的原因即在于Ras癌基因所诱导发生的[4]。其中，可能性最大的还是在MAPK的活化作用下使C-Jun、Ets-1活化，从而达到最大限度的去诱使基质金属蛋白酶-9完成其表达。而且由于数据分析，可以推断出当MMP-9表达出现较高的患者身上时，其胃癌侵袭与转移的可能性较大，愈后也不能达到较好的效果[5]。

综上所述，在胃癌组织中MMP-9的表达与胃癌的淋巴结转移、浸润深、肿瘤分化程度及TNM分期都有着较为密切的关系，可以将其作为标志对胃癌侵袭性与转移性进行研究。

参考文献：

[1]王舰,李胜军,赵成海,等.幽门螺杆菌感染胃癌组织MMP-2和MMP-9表达及其对胃癌侵袭转移能力的影响[J].世界华人消化杂志,2012,15(7):755-756.

[2]方勇,秦建岭,郭勇,等.复方藤梨根制剂抑制胃癌转移与MMP-9、TIMP-1和E-cad表达的关系研究[J].全科医学临床与教育,2013,8(1):35-36.

[3]黄茂涛,陈志新,魏兵,等.塞来昔布联合奥曲肽抑制胃癌转移的体内试验研究[J].中华医学杂志,2006,86(46):3255-3256.

[4]张成武,邹寿椿,徐文娟,等.胃癌基质金属蛋白酶-9表达的临床意义[J].中国胃肠外科杂志,2000,3(1):25-26.

[5]李新华,张桂英,罗非君,等.胃癌细胞系幽门螺杆菌感染对金属蛋白酶表达的影响[J].世界华人消化杂志,2003,11(5):544-545.

(收稿日期2015-9-18)

doi:10.3969/j.issn.1004-7115.2015.12.024

中图分类号：R735.2

文献标识码：B

文章编号：1004-7115(2015)12-1387-02

作者简介：黄宇珊 ( 1982—)，女 ，广东惠州人 ，本科，主要从事临床消化内科工作。