水飞蓟残渣中蛋白质的制备工艺优化及性能评价

文 / 樊玉芬，刘琳，匡彦蓓，刘晓风（. 甘肃银河食品集团有限责任公司，甘肃张掖 74000，

2. 兰州理工大学生命科学与工程学院，甘肃兰州 730050 3. 华南师范大学生命科学学院，广东广州 510630）

水飞蓟残渣中蛋白质的制备工艺优化及性能评价

文 / 樊玉芬1，刘琳2，匡彦蓓3，刘晓风2（1. 甘肃银河食品集团有限责任公司，甘肃张掖 734000，

2. 兰州理工大学生命科学与工程学院，甘肃兰州 730050 3. 华南师范大学生命科学学院，广东广州 510630）

本实验用碱提法提取蛋白质，并结合单因素实验和正交实验法确定最佳提取工艺。结果表明，水飞蓟分离蛋白的最佳提取工艺为：料液比1∶12，浸提时间60 min，提取液pH 9，提取温度 50℃。

水飞蓟粕；可溶性蛋白质；提取工艺

近年来国内对水飞蓟的研究利用大都以提取水飞蓟素为主，水飞蓟素是从水飞蓟籽中提取的，其副产品水飞蓟粕一般用作饲料或肥料，利用的附加值较低[1,2]。本文以水飞蓟粕为原料，研究水飞蓟分离蛋白的工艺[3,4]，以期为水飞蓟分离蛋白资源的开发利用提供理论依据。

1、 材料与方法

1.1 试验材料与试剂

水飞蓟粕：实验室提供，经低温加压溶剂萃取技术脱脂，将脱脂水飞蓟粕过80目筛备用。考马斯亮蓝G-250（生化试剂）（取考纳斯亮蓝G-250试剂100mg溶于50ml 95%的乙醇溶液中，然后加100ml 85%的磷酸，加蒸馏水稀释至1L）。牛血清蛋白，其他试剂均为分析纯。

1.2 试验方法

本实验采取碱溶法提取蛋白质，考马斯亮蓝法测定蛋白质含量[5]。

1.2.1 牛血清蛋白标准曲线的建立以牛血清蛋白标准溶液（0-200μg/mL）制作标准曲线。

1.2.2 水飞蓟分离蛋白提取的工艺优化

1.2.2.1 单因素试验

选取料液比1∶12，浸提时间 60 min，提取液pH 9，提取温度50 ℃为蛋白质提取单因素的基本参数。确定一项最优条件后，后续实验操作均按前面最优条件进行下一个试验。

1.2.2.2 正交试验设计

在单因素试验基础上，对影响水飞蓟分离蛋白提取率的主要因素pH，温度，料液比和水解时间进行了L9(34)试验。

2 、结果与分析

2.1 标准曲线

2.2 单因素试验结果

从图2，3，4，5可以看出，料液比1∶12，浸提时间 60 min，提取液pH 9，提取温度50℃为蛋白质提取的最佳单因素条件。

2.3 正交试验结果

正交试验结果见表1。

表1 正交试验结果

由表1的极差分析可知，各因素对水飞蓟蛋白提取率的影响顺序依次为pH＞温度＞料液比＞浸提时间。表2直观分析可知，碱提法提取水飞蓟蛋白的最佳工艺条件为D2B2C2A1，即pH为9.0，浸提温度为50℃，料液比为1∶12，水解时间为60min，此条件下，提取水飞蓟蛋白浓度为12.48mg/mL。

3、结论

正交实验法优化水飞蓟蛋白提取工艺，最佳提取条件为：提取液pH为9.0，温度为50℃，料液比为1∶12，浸提时间60min，并提取最多的水飞蓟蛋白12.48mg/ mL。

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[4] 朱淑云，董英，陈晓东，周越.水飞蓟粕蛋白氨基酸组成及加工功能特性研究[J ].中国粮油学报，2011,26（8）:71-74

[5] 扶庆权，华春，陈全战. 正交实验法优化红小豆蛋白提取工艺[J ]江苏农业科学，2012,40（6）:248-250