海安县集约鸡场大肠杆菌分离及防治试验

王炳翔林发根张金玉

（1.海安县雅周镇畜牧兽医站，江苏海安 226600；2.海安县动物卫生监督所，江苏海安 226600）

海安县集约鸡场大肠杆菌分离及防治试验

王炳翔1林发根2张金玉1

（1.海安县雅周镇畜牧兽医站，江苏海安 226600；2.海安县动物卫生监督所，江苏海安 226600）

作为中国的禽蛋之乡，江苏省海安县这几年的养鸡规模是逐年扩大。随着养鸡规模化、产业化发展，禽病问题是不断蔓延，造成的经济损失达数千万元之多。而禽病中属大肠杆菌危害最大，几乎所有鸡群都有发生大肠杆菌的可能。文章分离海安县集约化鸡场大肠杆菌病致病病毒血清型，结合药敏试验和微生态制剂防治试验，探究综合防治理念，以供参考和借鉴。

大肠杆菌 防治 药敏实验

鸡大肠杆菌病目前已成为集约化养鸡业中最受重视的细菌性传染病。临床上鸡的脐炎、关节炎、腹膜炎、输卵管炎、眼球炎、大肠杆菌败血症和大肠杆菌性肉芽肿都与致病性大肠杆菌有关，这些疾病常给养鸡业造成巨大的经济损失。

1 研究方法

1.1 细菌分离培养

从海安县兽医站门诊及12个大型养殖场剖检采集具有疑似大肠杆菌病病变的病死鸡的心血、肝、腹水、脾和气囊等病料，画线于麦康凯斜面，37℃培养18h，选取单个典型菌落纯培养后冻干保存。

1.2 生化试验

按文献报道方法，对所有分离株进行11项生化指标（葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露糖、蔗糖、尿素、硫化氢、柠檬酸盐、M.R、V-P、靛基质试验）进行测定。

1.3 血清型鉴定

参照文献，所有分离株首先进行玻板凝集试验初步筛选可能的O血清型，然后通过试管凝集试验确定其O血清型，定型标准试管凝集价不小于1：640。

1.4 药敏试验

按K-B纸片扩散法将被检分离株细菌涂布接种于营养琼脂培养基上，间隔一定距离贴上下列各种药敏试纸片，于37 ℃培养24 h。判定标准：抑菌圈直径小于10 mm 为不敏感，直径在10.1～15mm 为中度敏感，大于15.1 mm 为高度敏感。我们选择了头孢噻呋、头孢噻肟、阿米卡星、氧氟沙星、环丙沙星、沙拉沙星、诺氟沙星、多粘菌素B、氟苯尼考、多西环素、恩诺沙星、阿莫西林、林可霉素、四环素、庆大霉素、链霉素、复方新诺明、头孢氨苄等18种常用做药敏试验，为选择敏感药物提供科学依据。

1.5 微生态制剂防治试验

1.5.1 试验分组

自种禽场购买1日龄健康海兰褐雏鸡，按正常饲养方法饲养至14日龄（期间不接种任何大肠杆菌疫苗），选择500只鸡随机分成高、中、低3个不同剂量试验组（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组），喂服微生态制剂（乳酸菌复合活菌制剂，每克制剂中含活嗜酸乳杆菌1000万个，粪链球菌100万个，枯草杆菌10000个，用时以凉水溶解后饮服）。同时设阳性对照组（Ⅳ组）和阴性对照组（Ⅴ组），共5组，每组100只。

1.5.2 动物试验

雏鸡于15日龄时按高（0.2g/次）、中（0.1g/次）、低（0.05g/次）3个不同剂量分别给供试雏鸡灌服供试微生态制剂，每天2次，连续用药5d，试验组与阴性对照组于20、22、25日龄时采血备用，测定血清中SOD、GSH-PX、MDA的活性。26日龄时按1×109个cfu/ml剂量攻菌，记录攻菌后供试鸡的临床健康状况，观察14d，计算发病率、死亡率和保护率。

每只鸡的采血量均为10mL，血样4℃过夜后，3000r/min离心15min，分离血清。血清中相关酶的含量或活性的测定按照试剂盒说明进行操作，用Execl软件进行方差分析。

2 研究结果

2.1 分离血清型结果

从剖检具有疑似大肠杆菌病的252羽病死鸡中，分离鉴定出大肠杆菌226株，定型198株，共测出23个血清型，其中O78（32株）、O18（26株）、O2（21株）、O88（17株）、O1（13株）、O11（10株）6种主要血清型。

2.2 药敏试验结果

我们对定型的198株大肠杆菌用临床常用的18种抗菌药物做了药敏试验，结果详见表1。

表1 大肠杆菌对18 种抗菌药物的敏感性试验结果

从表1可以看出，随着大量抗菌药物应用于临床，所试药物均有不同程度的耐药现象，但多数菌株对头孢噻呋、头孢噻肟、阿米卡星、氧氟沙星、环丙沙星、沙拉沙星敏感性较高，这为我们选择临床药物来防治大肠杆菌病提供了科学依据和参考。

2.3 微生态制剂

用微生态制剂给大肠杆菌病鸡投喂，探索防控效果，结果详见表2。

表2 微生态制剂对鸡大肠杆菌病的临床防治结果

从表2可以看出，微生态制剂按高、中、低3个不同剂量连续喂药5d后攻菌，均能对雏鸡提供有效保护（93%以上）。虽然部分鸡群出现了精神不振，食欲减少，甚至个别排黄绿色稀便等症状，但死亡率低，其中高、中剂量试验组死亡率仅为3%，而阳性对照组则高达62%。

微生态制剂分不同剂饲喂鸡只，并检测了鸡只的血清酶，结果详见表3。

表3 微生态制剂对雏鸡血清酶影响的试验结果

从表3可以看出，微生态制剂按高、中、低3个不同剂量给药后，雏鸡血清SOD、GSH-PX的含量均显著高于阴性对照组（P＜0.05），MDA含量显著低于阳性对照组（P＜0.05），在同一时间，剂量越高，SOD、GSH-PX的含量越高，MDA含量越低，但无显著差异（P〉0.05）。

3 结论

实验结果表明，按0.1g/只给雏鸡饲喂适当的微生态制剂，能提高机体免疫力，减少大肠杆菌的发病率和死亡率。

本地大肠杆菌共有23个血清型，其中，O78（32株）、O18（26株）、O2（21株）、O88（17株）、O1（13株）、O11（10株）6种主要血清型。分离株对18 种常见药物均有不同程度的耐受性，而且敏感性也各不相同。相对而言，所分离的大肠杆菌多数对头孢噻呋、头孢噻肟、阿米卡星、氧氟沙星、环丙沙星、沙拉沙星高度敏感，对诺氟沙星、多粘菌素B、氟苯尼考、多西环素、恩诺沙星、阿莫西林、林可霉素中敏，对四环素、庆大霉素、链霉素、复方新诺明、头孢氨苄不敏感。比较西药疗法，微生态制剂同样有着不错的疗效，而且无毒副作用、无耐药性、无残留、成本低、效果显著、不污染环境等特点。它不仅能促进动物胃肠道正常微生物区系的建立，增强畜禽免疫力，减少疾病的发生，促进生长，提高畜禽日增重，改善畜产品的质量，还能产生多种氨基酸、维生素及一些未知促生物质，还能刺激肠道内免疫功能，及时杀死入侵病菌，又能减少氨及其他腐败物质的产生，阻碍有害物质及废物的吸收，有显著的经济效益和社会效益。

[1] 廖晓萍，岳磊，曾振灵.禽源大肠杆菌耐药现状与防治对策[J].中国家禽，2008，（6）：1-5.

[2] 白静，王宇.河南省鸡致病性大肠杆菌血清型、耐药性的研究[J].河南农业科学，2007，（10）：105-107.

[3] 朱金凤，王汝都.山西省鸡源大肠杆菌耐药性的监测[J].安徽农业科学，2007，（25）：7850-7852.