贵州麒麟鸡小肠肥大细胞的观察

裴占阳， 刘忠伟， 叶栋国， 杨 婷， 高登慧， 欧德渊*

(1.贵州大学 动物科学学院， 贵州 贵阳 550025； 2.贵州大学 贵州省农业生物工程重点实验室， 贵州 贵阳 550025)



贵州麒麟鸡小肠肥大细胞的观察

裴占阳1， 刘忠伟2， 叶栋国1， 杨 婷1， 高登慧1， 欧德渊1*

(1.贵州大学 动物科学学院， 贵州 贵阳 550025； 2.贵州大学 贵州省农业生物工程重点实验室， 贵州 贵阳 550025)

为了解贵州麒麟鸡小肠黏膜的免疫状态，揭示其与生长速度缓慢的关系，剖取10只健康成年贵州麒麟鸡小肠，采用改良甲苯胺蓝染色对其肥大细胞的形态、分布及数量变化进行观察分析。结果表明：贵州麒麟鸡小肠各段均有肥大细胞分布，其主要分布于黏膜固有层和黏膜下层，少量分布于黏膜下结缔组织中，多为圆形、卵圆形或长梭形；十二指肠中肥大细胞为(11.63±2.67)个/mm2，空肠为(37.88±8.17)个/mm2，回肠为(8.75±1.98)个/mm2，十二指肠、回肠与空肠中肥大细胞数量差异均极显著(P<0.01)，十二指肠与回肠间差异不显著(P>0.05)。贵州麒麟鸡的生长速度相对缓慢，可能与其十二指肠段的肥大细胞数量少有关。

贵州麒麟鸡； 小肠； 肥大细胞

肥大细胞(mastcell，MC)是机体的一种重要黏膜免疫细胞，其合成和分泌的组织胺、五羟色胺、蛋白多糖、中性蛋白酶等生物活性物质在动物健康和疾病预防方面有着重要作用[1]。自Ehrlich P首次发现并命名肥大细胞以来[2]，对其生物学研究表明，不同动物之间肥大细胞存在明显差异，其数量和分布可以反映动物的局部免疫水平[3-4]。肥大细胞是天然免疫的效应细胞之一，其不仅参与机体的免疫防御和免疫调节，而且反映机体的免疫水平。机体的肥大细胞分为2种：一种是分布于黏膜固有层中的黏膜肥大细胞(MMC)，主要功能是参与宿主的免疫反应；另一种是分布于黏膜下层结缔组织中的结缔组织肥大细胞(CTMC)，主要功能是参与血管生成和组织代谢[5]。此外，肥大细胞还与主要分布于十二指肠的淋巴细胞以及分布于回肠的杯状细胞相互作用，共同保持肠黏膜免疫系统的平衡[6]。

麒麟鸡又称倒毛鸡、翻毛鸡、卷毛鸡等，因羽毛向外翻卷，形如麒麟而得名，是我国特有鸡种，主要分布于两广、江浙、福建、湖南、贵州等地，但是因地域性差异，各地麒麟鸡的种质特性有较大区别。贵州麒麟鸡是黔东南小香鸡变种，该鸡肉质鲜美，并具有治疗关节痛、呕吐和妇科病等作用，但其生长速度慢、饲料消耗大、抗病力弱，现处于濒临灭绝状态。目前，关于肉鸡、乌骨鸡、贵州黄鸡等禽类肥大细胞的数量和分布均已有报道[7-9]，但关于麒麟鸡肥大细胞的研究未见报道。为此，笔者对贵州麒麟鸡小肠肥大细胞进行研究，以期揭示其是否与生长速度缓慢有关，为该种群的保护和养殖产业化提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 样品处理

选择贵州大学动物科学学院养鸡场自繁的健康成年贵州麒麟鸡10只，平均体重(1 200±100)g，颈静脉放血致死后立即取出十二指肠、空肠、回肠样品，生理盐水冲洗后修成1 cm3左右大小的组织块，Carony’s液固定12 h，梯度酒精脱水，常规石蜡包埋，5 μm连续切片，隔5片取1片进行染色，显微镜观察、采图。

1.2 染色方法

常规脱水，改良甲苯胺蓝(MTB)染30～40 s，水洗片刻，30% PBS分化，镜检直至有鲜红色颗粒细胞出现，脱水、透明，中性树脂封片。

1.3 数据处理

各样本随机抽取不连续的切片3张，用网形测微器(0.5 mm，武汉光学仪器厂)在低倍镜下记数每个视野内肥大细胞的数量，每张切片随机计数10个视野，每个视野计数100个小方格(25 μm2)内的肥大细胞，运用Spass 17.0软件进行数据处理、分析。

2 结果与分析

2.1 肥大细胞的形态与分布

经镜检，贵州麒麟鸡小肠各段均有肥大细胞分布，但主要分布于黏膜固有层和黏膜下层，少量分布于黏膜下结缔组织中。在低倍镜下，肥大细胞形态多样，但多为圆形、卵圆形或长梭形，可见数个肥大细胞聚集在一起。在高倍镜下，可见胞浆内有紫红色异染颗粒，胞核淡染，细胞核一般为圆形或椭圆形，位于中央或偏中央，常被胞质颗粒掩盖而不易分辨(图示)。

图示 贵州麒麟鸡小肠各段肥大细胞的组织学切片

Fig. Histological slices of mast cells in various small intestine sections of Guizhou Kirin chicken

2.2 肥大细胞的数量

经统计，贵州麒麟鸡十二指肠中肥大细胞为(11.63±2.67)个/mm2，空肠为(37.88±8.17)个/mm2，回肠为(8.75±1.98)个/mm2，小肠中肥大细胞数量呈倒“V”型变化，即其从十二指肠到空肠增加，从空肠到回肠减少。经差异显著性分析得出，十二指肠、回肠与空肠中肥大细胞数量差异极显著(P<0.01)，十二指肠与回肠间差异不显著(P>0.05)。

3 结论与讨论

小肠是食物消化和营养吸收的主要场所，但小肠内有大量微生物，小肠上皮又为单层柱状上皮，导致抵御外物入侵的能力较低，因此小肠中存在的大量免疫细胞构成了阻止病原物侵入体内的重要免疫屏障[7]。研究结果表明，贵州麒麟鸡小肠中肥大细胞多分布于黏膜固有层和黏膜下层等易表露于环境抗原的位点中，与其他动物的分布特征类似，表明肥大细胞是小肠黏膜重要的免疫细胞。

十二指肠是动物营养消化吸收的主要部位，肥大细胞分泌和合成大量的组胺和五羟色胺，这些胺类物质在肠道蠕动和营养吸收中有重要作用[8]，肠道肥大细胞的数量多少决定动物机体内胺类物质的含量，进而反映动物机体的营养吸收水平。该段肠道肥大细胞数量多，说明其营养吸收水平比较高，生长速度相对较快；反之则营养吸收水平比较低，生长速度相对缓慢。王子旭[9]研究表明，肉鸡小肠中肥大细胞的数量从十二指肠到空肠、回肠逐渐减少，小肠中肥大细胞主要集中在十二指肠段；王彤[10]研究表明，小鼠肠道肥大细胞的数量从十二指肠、空肠和回肠的顺序逐渐减少；肖红等[8]对泰和乌骨鸡小肠中肥大细胞研究表明，小肠中肥大细胞主要分布在十二指肠段；游蓉丽等[11]研究表明，羊驼小肠中肥大细胞的数量从十二指肠至空肠、回肠表现出先减少后增多趋势，但十二指肠中肥大细胞数量多于回场段，小肠中肥大细胞主要分布于十二指肠段；张文学等[12]研究表明，太行山猕猴空肠中肥大细胞数量显著高于十二指肠和回肠，小肠中肥大细胞主要分布于空肠。研究结果表明，贵州麒麟鸡小肠中肥大细胞数量从十二指肠至空肠、回肠表现先增多后减少趋势，空肠中极显著多于十二指肠和回肠，小肠中肥大细胞主要集中于空肠，与对太行山猕猴的研究结果[12]相似，与以上其他研究动物间存在差异。侯进怀[13]和占龙[14]研究表明，太行山猕猴的生长速度低于南方猕猴，太行山猕猴生长速度相对缓；黎观红[15]和陈洁波[16]研究表明，麒麟鸡相对泰和乌骨鸡的生长速度较慢，而太行山猕猴和麒麟鸡十二指肠段的肥大细胞数量均低于小肠其他肠段。因此推断，贵州麒麟鸡的生长速度相对缓慢可能与其十二指肠段的肥大细胞数量少有关，但其具体生理作用有待进一步研究。

[1] 周艳春，何韶衡.肥大细胞在细菌和病毒感染中的作用[J].中国病理生理杂志，2006，5(3)：607-611.

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[8] 肖 红，周作红，张家禾，等.泰和乌骨鸡小肠肥大细胞的形态和分布特点[C]//中国畜牧兽医学会.中国畜牧兽医学会动物解剖学及组织胚胎学分会第十七次学术研讨会论文集.北京：中国畜牧兽医学会，2012：460-465.

[9] 王子旭.锌硒互作对肉鸡肠黏膜结构及黏膜免疫相关细胞影响的研究[D].北京：中国农业大学，2003.

[10] 王 彤.小鼠消化道肥大细胞分布的定量研究[J].中国实验动物学杂志，1996，6(1)：7-10.

[11] 游蓉丽，董常生，贺俊平，等.不同月龄羊驼小肠肥大细胞的数量变化研究[J].山西农业大学学报：自然科学版，2009，29(1)：11-15.

[12] 张文学，薛德明，胡兵役，等.太行山猕猴消化道肥大细胞分布的研究[J].河南师范大学学报：自然科学版，1997，25(3)：98-100.

[13] 侯进怀，陈 莉，李全福，等.饲养条件下太行山猕猴幼仔某些生长指标的研究[J].河南师范大学学报：自然科学版，1999，27(2)：91-93.

[14] 和占龙，赵 远，鲁帅尧，等.人工繁育幼年猕猴生长指标的研究[J].中国自然医学杂志，2009，11(2)：84-86.

[15] 黎观红，瞿明仁，朱年华，等.泰和乌骨鸡生长曲线分析[J].江西畜牧兽医杂志，2002(3)：6-7.

[16] 陈洁波，陶 林，杜炳旺，等.麒麟鸡生长、屠宰性能和肉品质测定[J].家禽科学，2013(4)：16-20.

(责任编辑： 冯 卫)

Observation of Mast Cells in the Small Intestine of Guizhou Kirin Chicken

PEI Zhanyang1, LIU Zhongwei2, YE Dongguo1, YANG Ting1, GAO Denghui1, OU Deyuan1*

(1.CollegeofAnimalScience,GuizhouUniversity,Guiyang,Guizhou550025; 2.GuizhouKeyLaboratoryofAgriculturalBioengineering,GuizhouUniversity,Guiyang,Guizhou550025,China)

In order to understand the immune status of Guizhou Kirin chicken small intestine mucosa, revealing its relationship with the slow yrowth speed,the authorship dissected 10 healthy adult Guizhou Kirin chicken small intestine, by using MTB staining, the morphology, distribution and quantity changes of the MC were observed and analyzed.Results: Guizhou Kirin chicken small intestine has the mast cell distribution, mainly distributed in mucosa lamina propria and submucosa, a small amount of distribution in submucous connective tissue, mostly round, long ovoid or fusiform; Mast cells in the duodenum is (11.63±2.67)individuals/mm2, the jejunum is (37.88±8.17)individuals/mm2, the ileum is (8.75±1.98)individuals/mm2, Duodenum, ileum and jejunum difference in the number of mast cells was significant(P<0.01), the difference between the duodenum and ileum was not significant (P>0.05). The growing speed is relatively slow, which may be relevant to less mast cells in duodenum.

Guizhou Kirin chicken; small intestine; mast cells

2014-11-28； 2015-02-15修回

贵州省科技厅农业攻关项目“贵州3个优质地方土鸡保种选育与产业化关键技术研究及示范”[黔科合NZ字(2012)3007]；贵州省农业动植物育种合作项目“黔东南倒毛鸡种质资源保护与开发利用”[黔农育专字(2013)010]

裴占阳(1987-)，男，在读硕士，研究方向：动物组织胚胎学与细胞生物学。E-mail:pzy08@139.com

*通讯作者：欧德渊(1971-)，男，教授，从事动物病理学研究。E-mail: oyl1000@sina.com

1001-3601(2015)05-0260-0157-03

S831

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