不同提取方法对人参皂苷收率的影响

信小娟，陈旸，丛建华

(大兴安岭地区农业林业科学研究院，黑龙江加格达奇165000)

不同提取方法对人参皂苷收率的影响

信小娟，陈旸，丛建华

(大兴安岭地区农业林业科学研究院，黑龙江加格达奇165000)

通过对索氏提取法、超声波提取法、微波提取法3种不同方法提取人参皂苷，比较人参皂苷的收率。采用相同的提取试剂-甲醇，利用索氏提取法、超声波提取法、微波提取法提取人参皂苷；紫外可见-分光光度法测定人参皂苷含量，比较人参皂苷的收率。结果表明，3种提取方法，人参皂苷的收率分别为8.34%、9.36%、8.76%。超声提取法更适合应用于工厂化生产。

人参；索氏提取法；超声波提取法；微波提取法；人参皂苷

人参为五加科人参属植物(PanaxginsengC. A. Meyer)的干燥根和根茎，具有安神益智、大补元气、生津养血、补脾益肺的功效，人参中的主要活性成分为人参皂苷[1-2]。人参皂苷(ginsenosides)具有抗肿瘤、抗心律失常、延缓衰老及增强免疫力等作用[3-6]。目前，对于中草药中活性成分的提取主要采用索氏提取法、微波提取法和超声提取法进行。本研究对上述3种方法提取人参皂苷的收率进行比较，对工厂化提取人参皂苷具有一定的指导意义。

1 材料与方法

1.1 材料

5年生干燥人参根，由大兴安岭地区农业林业科学研究院提供；人参皂苷对照品Re(批号：110754-201324)购买于中国食品药品检定研究院。

索氏提取器(郑州兴华玻璃仪器设备直销店)；P70D20TLD4-型微波炉(广东格兰仕集团)；KQ250B-型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)；755-型分光光度计(上海圣科仪器设备有限公司)；AUY220-型电子分析天平(日本岛津公司)；电子恒温水浴锅(长春通州科技仪器厂)。

1.2 方法

1.2.1 人参皂苷的提取

将人参进行粉碎处理后过40目筛，精密称取9份，每份1g，中性滤纸包好作为供试品；分别进行如下操作：(1)取3份供试品，分别置于索氏提取器中，加入80mL三氯甲烷，加热回流提取8h；挥干三氯甲烷后加入60mL甲醇，加热回流提取6h；弃掉滤纸包，挥干甲醇，加入20mL蒸馏水溶解后转移至分液漏斗中；分别加入等体积的乙酸乙酯和水饱和正丁醇溶液进行除杂处理；挥干水饱和正丁醇溶液后加入10mL甲醇复溶，待测。(2)取3份供试品，分别置于50mL三角瓶中，加入20mL甲醇进行超声处理10min；弃掉滤纸包，挥干甲醇，加入20mL蒸馏水溶解后转移至分液漏斗中；分别加入等体积的乙酸乙酯和水饱和正丁醇溶液进行除杂处理；挥干水饱和正丁醇溶液后加入10mL甲醇复溶，待测。(3)取3份供试品，分别置于50mL烧杯中，加入20mL甲醇，低火微波5次，每次2min；弃掉滤纸包，挥干甲醇，加入20mL蒸馏水溶解后转移至分液漏斗中；分别加入等体积的乙酸乙酯和水饱和正丁醇溶液进行除杂处理；挥干水饱和正丁醇溶液后加入10mL甲醇复溶，待测。

1.2.2 人参皂苷标准曲线的绘制

精密称取人参皂苷-Re标准品适量，甲醇溶解后制备成2mg/mL的标准品溶液；分别吸取人参皂苷-Re标准品溶液10、20、30、40、50μL置于具塞试管中，向试管中分别加入90、80、70、60、50μL的甲醇，另备一支具塞试管加入100μL甲醇作空白处理；分别向具塞试管中加入0.5mL的0.5%香草醛-乙醇溶液和5mL的74%硫酸，振荡混匀；60℃恒温水浴20min后冰水浴10min终止反应；调节紫外-可见分光光度计至544nm处进行比色测定；以人参皂苷-Re标准品的进样量(X，mg/mL)为横坐标，吸光度(Y，OD544)为纵坐标，绘制出人参皂苷-Re的标准曲线，得到线性回归方程：Y=0.1798X+0.0108(R2=0.9983)。

1.2.3 人参皂苷含量的测定

根据2010年版《中国药典》(一部)关于人参皂苷含量测定的相关阐述，本研究采用紫外-可见分光光度法对人参皂苷含量进行测定[7]。分别精密吸取各组供试品溶液0.1mL，置于具塞试管中，加入0.5mL的0.5%香草醛-乙醇溶液和5mL的74%硫酸，振荡混匀；将试管置于60℃恒温水浴锅中加热20min后置于冰水中冷却10min；在波长544nm处进行比色测定。

2 结果与分析

采用索氏提取法、超声波提取法、微波提取法，以相同提取试剂—甲醇提取人参皂苷，3种不同提取方法对人参皂苷收率的影响见表1所示。在相同除杂处理的条件下，3组人参皂苷收率分别为8.34%、8.76%、9.36%。结果表明同样以甲醇作为提取试剂，相同的除杂处理，超声提取法提取人参皂苷的收率更高。

表1 不同提取方法对人参皂苷得率的影响

3 讨论

超声提取法是利用超声波在液体介质中传播时产生的“空化效应”，不断产生无数个内部压力达到上千个大气压的空气穴，而空气穴不断爆破产生微观上的强大冲击波，不断的轰击人参粉末，使其含有的人参皂苷更容易溢出，从而加大了人参皂苷的得率。微波提取法同样具有提取时间短、操作简便的优点，但是相对于超声提取法而言，其人参皂苷得率略低，且操作过程中容易发生危险，并不适合大规模生产。超声提取法与微波提取法的提取时间较短、能源消耗少，而索氏提取法不但耗时、耗能而且还产生大量的废液，从工厂生产的角度考量，超声提取法更适合应用于大规模的人参皂苷提取。

[1]罗洁琦, 沙先谊,方晓玲. 三七总苷离子敏感型鼻用原位凝胶的制备 [J]. 中草药, 2011, 42(7): 1299-1304.

[2]石楸鸣. 人参皂苷的药理作用研究进展 [J]. 中草药, 2010, 21(31): 2967-2969.

[3]Hasegawa H, Sung J H, Matsumiya S, et al. Reversal of daunomycin and vinblastine resistance in multidrug-resistant P388 leukemia in vitro through enhanced cytotoxicity by triterpenoids [J]. Planta Med, 1995, 60(5): 409-413.

[4]吕文伟, 刘 洁, 田建明, 等. 20-(S)和20-(R)人参皂苷Rg2对心源性休克犬血流动力学和血氧含量的影响 [J]. 中草药, 2003, 34(3): 254-256.

[5]贾继明, 王宗权, 吴立军, 等. 人参皂苷Rh1的药理活性研究进展 [J]. 中国中药杂志, 2008, 33(12): 1371-1377.

[6]陈旸, 王义, 孙亮, 等. 植物乳杆菌发酵转化人参皂苷的研究 [J]. 中国中药杂志, 2014, 39(7): 58-63.

[7]国家药典委员会汇编. 中国药典 [M]. 2010年版一部, 北京:化学工业出版社, 2010: 8.

Effects of Different Extraction Methods on the Yield of Ginsenosides

Xin Xiaojuan,Chen Yang,Cong Jianhua

(North Drug Development Research Laboratory, Agriculture & Forestry Science Research Institute of Daxing’an Mountain range, Daxing’an Mountain range, Heilongjiang Province,165000)

Objective Through three different extraction method on ginsenosides of soxhlet extraction, ultrasonic extraction, microwave extraction, compared ginsenosides yield. Method Selected the same extraction reagent-methanol, used soxhlet extraction method, ultrasonic extraction method, microwave extraction method extractcted ginsenosides, determination of ginsenosides by UV visible spectrophotometry, compared ginsenosides yield. Results Three kinds of extraction methods, ginsenosides yield was 8.34%, 9.36%, 8.76%. Conclusion Ultrasonic extraction method is more suitable for industrial production .

Ginseng; Soxhlet extraction method; Ultrasonic extraction method; Microwave extraction method; Ginsenosides

2014-09-18

R284.2

A

doi.:10.13268/j.cnki.fbsic.2015.01.013