结肠管状腺癌GATA3的免疫组化表达检测及其意义

结肠管状腺癌GATA3的免疫组化表达检测及其意义

佟强1,金梅1,姜慧1，刘天戟2*

(一汽总医院 病理科,吉林 长春130011；2.吉林大学中日联谊医院)

结肠管状腺癌是临床较为常见且预后不良的大肠癌之一，其发病率高，恶性度高，且死亡率高，手术和化疗均不能达到根治的效果。GATA3转录因子是GATA超家族成员之一，我们对其在结肠管状腺癌中的特异性表达进行检测，进而进一步探讨结肠管状腺癌的发病机理等，以期达到治愈结肠管状腺癌的目的。结肠管状腺癌约占大肠癌的80%，患者多为老年人，多数患者诊断后很难治愈，近年来报道GATA3在诸多恶性肿瘤细胞中有表达，如乳腺癌[1,2]，宫颈癌[3]，胰腺癌[4]等。国外也有学者研究表明，GATA3的表达与肿瘤分级、淋巴结转移等指标相关[5]。国内尚未见结肠管状腺癌中GATA3表达情况的报道。因此我们通过免疫组织化学染色法检测GATA3在结肠管状腺癌中的表达情况，通过研究其组织级别和分化程度的关系，探讨其在结肠管状腺癌中的发病机理及预后中的意义。

1材料和方法

1.1材料

60例结肠管状腺癌标本和60例正常结肠组织标本均来自我院普外科手术切除，已经过2位以上资深病理科医生明确诊断。经得患者知情同意，进行试验研究。患者年龄在42-80岁(平均59岁)，男女各半。所有标本均经过HE染色和免疫组织化学染色。

1.2主要试剂

GATA3兔抗人多克隆抗体及其他试剂均购自北京中衫生物科技有限公司。

1.3方法

所有标本均按照GATA3试剂盒说明书进行操作，经过DAB显色，苏木素复染细胞核，以出现黄褐色产物为阳性结果，以60例正常结肠组织患者作为对照。经过一系列过程，于高倍镜下观察GATA3的表达情况。GATA3在结肠管状腺癌细胞的胞核中表达为黄褐色，以GATA3广泛均匀分布在结肠管状腺癌细胞核中认定为阳性表达。120例标本经过常规HE染色和免疫组织化学染色后，观察其阳性表达情况。

1.4结果判定

GATA3阳性颗粒主要定位在细胞核，当细胞核中出现均匀分布的棕黄色颗粒时，即可定义该细胞为阳性细胞，在组织切片中随机选取5-15个高倍视野，当阳性染色细胞数占总癌细胞数25%以上即可认为GATA3阳性表达。

1.5统计学

采用SPSS17.0软件进行统计学分析，用χ2检验进行分析，P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1免疫组化检测组织中GATA3蛋白表达及定位情况

正常结肠组织中GATA3呈阴性，腺上皮未着色，如图1；结肠管状腺癌组织中GATA3染色60%以上细胞核着色，呈阳性表达，如图2。

图1正常结肠组织中GATA3表达(×40)图2结肠管状腺癌组织中GATA3表达(×100)

2.2正常结肠组织和结肠管状腺癌组织中GATA3的表达情况

GATA3主要定位在细胞核内，免疫组化提示GATA3在结肠管状腺癌组织中高表达，在正常结肠组织中弱表达甚至不表达(P<0.05)，见表1。

表1　正常结肠组织和结肠管状腺癌组织中GATA3的

2.3GATA3与肿瘤TNM分期和分化程度的关系

通过实验我们发现，结肠管状腺癌组织TNM分期越高，GATA3的阳性表达越强；结肠管状腺癌组织分化程度越低，GATA3的阳性表达越强(P<0.05)，见表2。

表2　GATA3与肿瘤TNM分期和分化程度的关系

3讨论

结肠管状腺癌发病率正呈逐年增高的趋势，且男性多于女性。迄今为止，其病因学尚未完全清楚，可能与饮食因素，体力活动，遗传因素等相关。

GATA3是GATA家族成员之一，在多种恶性肿瘤细胞的生长调节和分化中起重要作用，在很多恶性肿瘤细胞中高表达。GATA3是CD4+辅助性T细胞Th2特异性转录因子，Th2细胞对机体的免疫功能有着重要的调节作用[6]，CD4+辅助性T细胞的分化与机体内的各种疾病有着密切的关系，作为Th2特异性转录因子，GATA3调控Th2 细胞的分化过程，为控制与治疗某些疾病提供了新的靶点，在分子水平、转录水平以及蛋白水平上它受到了众多信号通路的调节。GATA3能识别并与DNA的特定序列结合，从而促进或抑制相关基因的转录[7]。GATA3除了通过直接结合到相应的DNA序列上调节靶基因的表达，还能通过染色质重塑的过程来

整体改变基因的遗传性状。它直接参与T淋巴细胞的分化调控，诱导Th2细胞生物生成，亦直接或间接参与红细胞、巨噬细胞、嗜酸性粒细胞等的分化调控。

GATA3在诸多正常组织和肿瘤组织均有所表达，但在结肠管状腺癌中的研究尚无报道，本实验通过免疫组织化学方法观察了GATA3的表达情况，发现60例结肠管状腺癌组织与60例正常结肠组织相比，GATA3在结肠管状腺癌组织中强阳性表达，在正常结肠组织中弱表达甚至不表达(P<0.05)，且结肠管状腺癌组织TNM分期越高，GATA3的阳性表达越强；分化程度越低，GATA3的阳性表达越强(P<0.05)。研究GATA3的表达调控与功能,既能深化人们在分子水平上对CD4+辅助性T细胞的分化机制的了解，也能拓宽相关疾病治疗的思路，为临床用药及预后提供了扎实的理论基础和实验依据。

参考文献：

[1]Mehra R’Varambally S’ Ding L et al.Identification of GATA3 as a breast cancer prognostic marker by global gene expression meta-analysis[J].Cancer Res,2005,65(24):11259.

[2]Abba MC,Nunez MI,Colussi AG,et al.GATA3 protein as a MUC1 transcriptional regulator in breast cancer cells[J].Breast Cncer Res,2006,8(6):R64.

[3]Steenbergen RD,Oude Engberink VE,Kramer D et al.Down regulation of GATA3 expression during human papillomavirus mediated immortalization and cervical carcinogenesis[J].Am J Pathol.2002.160(6):1945.

[4]Gulbinas A,Berberat PO,Dambrauskas Z et al.Aberrant gata-3 expression in human pancreatic cancer[J].J Histochem Cytochem,2006,54(2):161.

[5]Voduc D,Cheanq M,Nielsen T.GATA-3 expression in breast cancer has a strong association with estrogen receptor but lacks independent prognostic value[J].Cancer Epidemiol Biomarkers PreV,2008,17(2):365.

[6]Zheng W.Flavell RA,The transcription actor GATA-3 is necessary and sufficient for Th2 cytokine gene expression in CD4 T cells[J].Cell,1997,89(4):587.

[7]Yang Z,Gu L,Romeo PH et al.Human GATA3-trans-activation,DNA-binding and nuclear localization activities are organized into distinct structural domains[J].Mol Cell Biol,1994,14(3):2201.

收稿日期：(2013-11-17)

通讯作者*

文章编号：1007-4287(2015)03-0430-02