缺血缺氧性脑病新生儿免疫功能的变化及临床意义分析

杜立树，平龙玉，张曼俐

(绵阳市中医医院， 四川 绵阳621000)

缺血缺氧性脑病新生儿免疫功能的变化及临床意义分析

杜立树，平龙玉*，张曼俐

(绵阳市中医医院， 四川 绵阳621000)

(ChinJLabDiagn,2015,19:0395)

新生儿缺血缺氧性脑病(Hypoxic ischemic encephalopathy，HIE)发病机制复杂，病因主要为宫内窘迫、新生儿窒息，为造成新生儿死亡及神经系统后遗症的重要病种，近年研究发现：免疫损伤在HIE的病理生理过程中作用较为关键[1]，免疫因素导致的脑缺血再灌注损伤在临床的治疗中逐渐被人们所重视，本研究回顾性分析98例HIE患儿细胞免疫及体液免疫功能状态，旨在研究新生儿HIE免疫功能的变化情况及其影响因素，探讨HIE免疫损伤机制，为HIE的治疗提供新的研究资料。

1对象与方法

1.1研究对象

98例HIE患儿均来源于我院2011年1月-2014年1月儿科住院患儿，均符合HIE诊断标准，新生儿HIE的诊断及分级标准参考《新生儿缺氧缺血性脑病诊断标准》[2]，其中男59例，女39例，足月产，胎龄37-42周，平均38.69±1.67周，体重2.51-4.62 kg，平均3.36±0.46 kg，轻度26例、中度39例、重度33例；另选择同期正常新生儿54例设为对照组，其中男31例，女23例，胎龄37-42周，平均38.34±1.62周，体重2.53-4.33 kg，平均3.46±0.55 kg，两组在性别构成、胎龄、体重上均无统计学差异(P>0.05)，具有可比性。研究对象的选择注意排除早产儿、母亲分娩时无严重感染，无免疫抑制剂及增强剂使用史。

1.2方法

所有研究对象在出生时取脐血3 ml，分别装入2支真空采血管，1管采用EDTA-K2抗凝，1管采用肝素抗凝，混匀备用。用流式细胞仪检测EDTA-k2抗凝血T细胞亚群(CD3细胞、CD4细胞、CD8细胞以及CD4/CD8比值)，流式细胞仪为FACS Calibur，试剂购自Becton Dickinson公司(美国)，肝素抗凝血检侧免疫球蛋白(IgG、IgM、IgA)，采用免疫比浊法，用美国贝克曼公司DXC-800全自动生化分析仪进行检测，试剂为浙江伊利康生物有限公司提供。细胞因子白介素-2(IL-2)、白介素-6(IL-6)、白介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子(TNF-a)采用肝素抗凝血酶联免疫吸附法(ELISA法)检测，试剂由深圳晶美生物有限公司提供，酶标仪为ST-360 (上海科华)。比较对照组、轻度、中度及重度HIE各组新生儿细胞免疫及体液免疫的差异。

1.3统计学分析

研究数据采用SPSS19.0统计学软件进行分析处理，多组均值比较采用方差分析，组间两两比较采用SNK法，以P<0.05有统计学意义。

2结果

2.1各组T淋巴细胞亚群检测情况比较

四组T淋巴细胞亚群经方差分析，CD8细胞无统计学差异(P>0.05)，CD3、CD4细胞及CD4/CD8均存在统计学差异(P<0.05)，组间两两比较经SNK法分析，CD4/CD8任意两组均存在统计学差异(P<0.05)，随HIE严重程度加深而降低；CD3、CD4细胞HIE轻度组与对照组无统计学差异(P>0.05)，HIE中、重度组与其他各组比较存在统计学差异(P<0.05)，在HIE组CD3、CD4细胞均随HIE严重程度加深而降低。

表1　各组T细胞亚群检测情况比较

注：与对照组比较*P<0.05，与轻度组比较#P<0.05，与中度组比较▲P<0.05

2.2各组免疫球蛋白检测情况比较

四组免疫球蛋白经方差分析，IgG、IgA无统计学差异(P>0.05)，IgM均存在统计学差异(P<0.05)，组间两两比较经SNK法分析，IgM任意两组均存在统计学差异(P<0.05)，IgM均随HIE严重程度加深而降低。

表2　各组免疫球蛋白检测情况比较

注：与对照组比较*P<0.05，与轻度组比较#P<0.05，与中度组比较▲P<0.05

2.3各组细胞因子检测情况比较

四组细胞因子IL-2、IL-6、IL-8、TNF-a经方差分析均存在统计学差异(P<0.05)，组间两两比较经SNK法分析，IL-2、IL-8任意两组均存在统计学差异(P<0.05)；IL-6、HIE重度组与其他各组均存在统计学差异(P<0.05)，HIE中度组与对照组存在统计学差异(P<0.05)；TNF-α、HIE轻度组与对照组无统计学差异(P>0.05)，HIE中、重度组与其他各组比较存在统计学差异(P<0.05)。

表3　各组细胞因子检测情况比较

注：与对照组比较*P<0.05，与轻度组比较#P<0.05，与中度组比较▲P<0.05

3讨论

HIE在我国发病率将近0.2%-0.4%[3]，为围生期常见疾病，患儿因缺血缺氧引起神经细胞水肿、坏死导致脑损伤，在中重度患儿中多发生永久性神经系统后遗症，致死致残率一直居高不下，严重危害了患儿的生命健康。HIE脑损伤与免疫系统的关系近年逐渐引起临床研究人员的关注，神经系统与免疫系统均为机体的调节体系，HIE在应激状态下，两系统交互作用进一步加重脑损伤病情，有学者认为HIE脑损伤为多重因素，多种机制交互作用而发生的“瀑布式”病理变化，包括神经细胞能量代谢障碍、微血管损伤、再灌注损伤等，其中免疫系统发挥较为关键的作用[4]，多种免疫细胞因子在HIE早期为神经-内分泌-免疫系统的关键介质，而激活的免疫细胞释放的细胞毒性物质诸如：一氧化氮、兴奋性氨基酸、氧自由基等则与神经细胞的损伤有关[5]。

本组研究对HIE细胞免疫及体液免疫进行的研究，数据显示：相对于正常新生儿，HIE患儿脐血CD3、CD4细胞及CD4/CD8比值均出现下降，且随HIE严重程度的加深下降的程度更为显著，缺氧导致新生儿多种神经内分泌肽类激素分泌减少，HIE患儿机体细胞免疫呈现抑制状态[6]，同时再灌注损伤所诱发的淋巴细胞凋亡机制异常启动，加速淋巴细胞凋亡[7]，临床表现为CD3、CD4细胞均出现下降，其中尤以CD4下降更为显著。提示HIE患儿细胞免疫功能低下，与对照组比较 HIE患儿免疫球蛋白比IgM呈现低水平，IgG与IgA则无统计学差异，细胞因子IL2、IL-6出现降低，IL-8、TNF-a出现上升，与HIE的病情严重程度均有一定的关联性，T淋巴细胞既为免疫效应细胞，同时对体液免疫也有重要的调节作用[8]，IL-2主要由Th1辅助细胞分泌，IL-6主要由Th2细胞分泌，CD4细胞主要包括Th1及Th2细胞，CD4细胞的下降导致IL-2、IL-6细胞因子的分泌减少[9]，同时IgM的生成需要IL-2的参与[10]，IL-2的下降导致HIE患儿IgM出现降低，实验数据符合预期，IL-8为趋化因子，对中性粒细胞具有强烈的趋化及活化作用，参与机体的炎性反应，活化的中性粒细胞释放炎性介质，导致血脑屏障及血管内皮细胞通透性增加，TNF-a具有神经毒性作用[11]，同时也可刺激IL-8、自由基的合成释放，各种因子交互作用导致迟发性神经元细胞凋亡，临床研究显示[12]：在HIE早期患儿使用抗TNF-a抗体可减轻患儿脑损伤程度。我们的数据显示IL-8、THF-a升高与HIE严重程度关系密切。

综上所述，HIE患儿机体多存在免疫功能紊乱，其紊乱程度与疾病严重程度关系密切，HIE的免疫学发病机制尚处于研究当中，一些免疫学的治疗方法或许可成为HIE治疗的新的尝试。

参考文献：

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[9]张艳，赵玉环.黄芪注射液对缺血缺氧性脑损伤新生儿免疫功能的影响[J].中国妇幼保健，2013,28(33):5475.

[10]刘文彬，郑砾，邓琼仙，等.新生儿缺血缺氧性脑病免疫功能检测的临床意义[J].四川医学，2013,34(10):1496.

[11]许津莉,贾黎英,郭俊红,等.缺血缺氧性脑病新生儿免疫功能变化[J].临床荟萃,2012，27(16)：1459.

[12]章利敏，薛洁.HIE患儿治疗前后血清NPY、IL-2和S100B检测的临床价值[J].放射免疫学杂志,2013，26(03)：290.

摘要：目的研究新生儿缺血缺氧性脑病(HIE)免疫功能的变化情况，探讨HIE免疫损伤机制，为HIE的治疗提供新的研究资料。方法98例HIE患儿设为HIE组，其中轻度26例、中度39例、重度33例，选择同期54例正常新生儿为对照组，比较各组研究对象细胞免疫、体液免疫差异。结果HIE患儿CD3、CD4细胞及CD4/CD8出现下降，均随HIE严重程度加深而降低；IgM、IL-2、IL-6出现下降，均随HIE严重程度加深而降低，IL-8、TNF-a出现升高，均随HIE严重程度加深而降低。结论HIE患儿机体多存在免疫功能紊乱，其紊乱程度与疾病严重程度关系密切。

关键词：新生儿；缺血缺氧性脑病；细胞免疫；体液免疫

Analysis of the changes of immune function in neonates with hypoxic ischemic encephalopathy and its clinical significanceDULi-shu,PINGLong-yu,ZHANGMan-li.(ChineseMedicineHospitalinMianyangProvinceSichuan,Mianyang621000,China)

Abstract:ObjectiveTo study the neonatal hypoxic ischemic encephalopathy (HIE) the changes of immune function,to explore the mechanism of HIE immune injury,provide the new data for the treatment of HIE.Methods98 cases of HIE group HIE,including 26 mild cases,39 moderate cases,33 severe cases,select the same period in 54 cases of normal newborns as control group,compare each research object of cellular immunity,humoral immunity difference.ResultsHIE in children with CD3,CD4 cells and CD4/CD8 decreased with the severity of HIE,decreased IgM,deepen;IL-2,IL-6 decreased with the severity of HIE,decreased IL-8,deepen,TNF-a increased with the severity of HIE,deepen and reduce.ConclusionHIE patients many of the body's immune function disorder exists,the relationship between the degree of disorder and severity of disease are closely.

Key words:neonatal;hypoxic ischemic encephalopathy;cellular immunity;humoral immunity

收稿日期：(2014-03-27)

作者简介：杜立树(1960-)，男，汉族，四川射洪县人，副主任检验师，大学本科，主要从事糖尿病诊断及肾脏疾病的实验室诊断与研究。

文献标识码：A

中图分类号：R722.1

文章编号：1007-4287(2015)03-0395-04

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