电镜技术在病理诊断中的应用
2015-02-20李诗恒
李诗恒
(吉林大学临床医学院,长春130021)
临床病理诊断往往被称为诊断的金标准,目前电镜诊断技术以其可以观察到亚细胞结构的变化,广泛应用于现代临床病理诊断中,成为病理诊断中一项重要依据[1]。在对一些疑难杂症的诊断中,电镜技术在病理诊断中所发挥的作用更加明显,许多病理改变发生在亚细胞水平上,可以使许多疾病早期即被发现,控制病情恶化。
1 电镜技术在病理诊断中的应用
1.1 心肌活检 心内膜心肌活检(EMB)是诊断心脏移植术后排斥反应的金标准,现在已成为诊断心脏移植术后排斥反应的标准检查方法[2]。而对于心肌淀粉样变的患者心肌活检也是确诊的最直接且高度敏感的诊断方法。由于心肌活检取材的局限性,常会被误诊为肥厚型心肌病、冠心病等。此时,应用电镜技术可以避免因淀粉纤维在组织上沉积不均且较少时,刚果红染色为阴性。对心肌淀粉样变患者心肌超微结构观察发现,沉积严重区域心肌细胞完全被淀粉样纤维包绕,心肌细胞膜中断不连续,心肌肌原纤维肌丝减少,排列紊乱,严重病变的心肌细胞心肌肌丝断裂、崩解,肌节分离,结构模糊、消失,心肌细胞损伤严重。线粒体除出现形态改变、肿胀、形成空泡外,分布则出现两种情况:部分患者线粒体积聚成堆,灶状分布,心肌细胞结构往往较完整且周围淀粉样纤维少或无沉积;部分患者线粒体数量减少,患者往往心肌细胞结构不完整,损伤较严重,细胞周围往往存在大量淀粉样纤维沉积,提示可能病变较重、疾病晚期的表现,早期则可能出现积聚成堆[3]。在心肌活检中,应用电镜技术可以检测出微小的病变,提高了病理诊断的准确性。
1.2 肾活检 近年来,随着科学技术的发展,影像学设备的更新及操作技能的提高,经皮肾活检技术开展的较为广泛,可以直接观察肾脏病的肾脏形态学的改变,并能进行系列的观察。经皮肾脏穿刺活检技术是目前诊断肾脏疾病的重要手段之一,由于检测的成功率高、病理结果分析确切,能够为临床采用准确的治疗方案提供重要依据。因此,经皮肾脏穿刺活检在临床诊断和治疗肾脏疾病中发挥了极其重要的作用[4]。肾脏疾病种类众多,变化复杂,所以单一的检查方法无法对其进行确诊,必须是光学显微镜技术、免疫化学技术及电子显微镜技术联合检测。其中,电镜技术在肾病病理诊断上起着决定性作用[5]。近年来电镜技术不断发展,推陈出新,在肾活检的领域,加入了新的动力——冷冻超薄切片免疫电镜技术。该技术可以较好的保持抗原活性,而且在观察肾组织超微结构的同时可以进行免疫组织染色,检测出是何种免疫复合物沉积所导致的肾脏疾病。朱小东等[6]发现该技术不但可以提高免疫反应的敏感性,还能较好地保存超微结构。活检病理诊断不光应用于心脏、肾脏方面的疾病诊断,对于某些罕见遗传性疾病的诊断亦有帮助[7]。
1.3 肺癌的诊断 在分化程度较低的肺癌中,利用常规方法进行病理诊断往往很困难,故需要利用免疫组织化学和电镜技术联合诊断,才能更准确地确定肺癌的组织分型。有关研究表明,鳞癌超微结构中可见张力原纤维;腺癌的超微病理学结构中100%可见紧密连接,却没有看到张力原纤维;腺鳞癌中既有张力原纤维又有紧密连接;肺小细胞癌中没有张力原纤维和紧密连接,但存在神经内分泌颗粒[8-10]。电镜下的超微结构不仅可以进行肿瘤来源的分析,还可以对同一种肺癌在亚细胞水平上进行分型,据此了解其肺癌的发展。如肺腺癌中电镜下可以观察到3种分泌颗粒:黏液颗粒、板层小体和管状髓鞘脂以及Clara颗粒。根据3种分泌颗粒的种类及存在的不同,可以将肺腺癌进一步分为4个超微类型:Ⅰ型黏液细胞型、Ⅱ型肺泡细胞型、Ⅲ型Clara细胞型和混合型[11]。除此之外,肺黏膜相关淋巴组织型淋巴瘤也是一种需要通过超微结构诊断的罕见疾病。其在肺泡上皮和支气管黏膜上皮周围及肺泡腔内有大量的淋巴源性瘤细胞的浸润,这种瘤细胞显示淋巴细胞的形态特征。此外,还可见到个别细胞的细胞核不规则、扭曲、分叶或脑回样,具有T淋巴细胞的形态特点[12]。
2 结语
电镜技术丰富了对生物大分子、细胞、组织等形态学上的认识,同时在病理学的发展上,利用电子显微镜技术观察到微小的病变,有利于临床的早期诊断和疾病的分期分型,极大拓展了临床视野。电镜技术作为一种诊断上的辅助手段,还可以做到观其形态知其功能,推测其基因改变、代谢紊乱等。单一的电镜技术在病理学上的应用存在着较大的局限性,对于疑难病症的诊断还要多种诊断技术的支持,以缩小诊断误差。
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