ICP-MS法测定某中药胶囊中铬含量的方法验证

宋艳刚，李 波，王国祥

丽珠集团利民制药厂，广东 韶关 512028

胶囊是由药用明胶加辅料精制而成的帽、体两节胶囊壳，主要用于盛装固体药物。2012年4月“铬超标药用胶囊事件”后，国家食品药品监督管理局对2012年5月1日后新上市的胶囊剂药品实行铬限量检验，确保公众用药安全［1］。

《中国药典》2010年版已对胶囊中的有害元素铬进行了限量要求，采用原子吸收光谱法检测。近年来，随着质谱技术的快速发展，电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)的应用也越来越普遍，其具有极低的检出限，使方法更加准确可靠，灵敏便捷，逐渐成为食品药品中元素分析的首选方法［2-6］。本研究拟对ICP-MS法测定某中药胶囊中铬含量的方法进行验证，为下一步取代药典方法提供依据。

1 材料与方法

1.1 仪器 Agi lent 7700x型电感耦合等离子体质谱仪［(美国安捷伦公司，包括第三代八级杆碰撞反应池系统(ORS3)；高精度、高灵敏度、耐高盐、高效Micromist同心雾化器，Pel tier半导体控温(-5～20℃)，高纯石英双通道雾室，石英矩管，镍采样锥和截取锥，数字式固态射频发生器，X型提取透镜组，OmegaⅢ离子透镜双曲面四级杆，9个数量级同时双通道模式检测器］；MARS5型微波消解仪(美国CEM公司)；PALL Cascada AN超纯水机(美国颇尔公司)；AE200电子天平(瑞士梅特勒公司)。

1.2 试药 硝酸(优级纯，德国默克公司)；铬(GSBG62017-90)单元素标准溶液（国家钢铁材料测试中心钢铁研究总院，浓度为100μg/mL）；锗(GSB04-1728-2004)单元素标准溶液（国家有色金属及电子材料分析测试中心，浓度均为1 000μg/mL）；复方五指柑胶囊(丽珠集团利民制药厂，批号：130504、130605、131108)；水为超纯水。

2 方法与结果

2.1 标准储备液的制备 取铬单元素标准溶液(1 000μg/mL)，用5%硝酸稀释制成每1mL含铬10.0μg、20.0μg的铬标准储备液。

2.2 标准溶液的制备 精密量取铬标准储备液(10μg/mL)适量，用5%硝酸溶液稀释成每1mL含铬 0、1、5、10、50、100 ng的对照品溶液，临用新配。

2.3 内标溶液的制备 取锗标准溶液适量，用5%硝酸溶液稀释成适宜浓度。

2.4 供试品溶液的制备 取复方五指柑胶囊，倾出内容物，称取空胶囊约0.2 g，精密称定，置聚四氟乙烯消解罐内，加硝酸8mL，混匀，盖上内盖，旋紧外套，置微波消解仪中按设定程序进行消解。消解完成后，取出，放冷，用超纯水转移并用重量法定容至50 g，摇匀，用0.22μm滤膜滤过，弃去初滤液，收集续滤液作为供试品溶液；同法制备试剂空白溶液，作为空白校正，见表1。

表1 微波消解程序

2.5 ICP-MS工作条件参数 射频功率：1 412W；采样深度：8.0mm；载气流速：0.65 L/min；辅助气流速：13.0 L/min；冷却气流速：0.80 L/min；蠕动泵转速：50 r/min；重复次数：3。

2.6 测定法 按照电感耦合等离子体质谱法(《中国药典》2010年版(一部)附录 D)测定，以72Ge为内标，仪器的内标进样管在仪器分析工作过程中始终插入内标溶液中，依次将仪器的样品管插入各个浓度的标准溶液中进行测定(浓度依次递增)，以每一浓度测得的3次读数与内标读数比值的平均值为纵坐标，相应浓度为横坐标，做标准曲线。另将仪器的样品管插入供试品溶液中，测定，取3次读数的平均值。从标准曲线上计算得相应浓度，扣除相应样品空白，计算各元素的含量，即得。

2.7 线性关系 取系列标准溶液，按上述方法进行检测，用其检测值对浓度进行线性回归，得标准曲线y=9160.5932x+568.9267，结果在0～100ng/g浓度范围内与检测值线性关系良好，r=0.999 9，见图1。

图1 标准曲线图

2.8 检出限与定量限 测定11份空白样品溶液，以其响应值的3倍所对应的浓度进样检测，作为检测限，以其响应值的10倍所对应的浓度进样检测，作为定量限，经计算，方法的检测限为0.02 ng/g，定量限为 0.07 ng/g。

2.9 精密度实验 取供试品溶液1份，连续进样6次，测定，结果测定值的RSD值为0.78%，表明仪器精密度良好，见表2。

表2 精密度实验结果

2.10 重复性实验 取样品6份，按照供试品溶液制备方法制备，依法测定，结果测定值的RSD值为3.5%，表明方法重复性良好，见表3。

表3 重复性实验结果

2.11 加样回收率实验 取样品9份，分别各取3份加入铬标准储备液 (20μg/mL)4、8、12μL，按照供试品溶液制备方法制备，依法测定，结果回收率平均值为90.65%，RSD值为2.83%，表明方法回收率良好，见表4。

表4 加样回收率实验结果

2.12 与药典测定方法比较 使用本方法与原子吸收分光光度法对同批次样品进行检测，结果见表5。

表5 与药典方法比较结果

3 讨论

电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)是近年来逐步被认同和快速发展的用于检测重金属元素含量的方法，与传统的原子吸收光谱法测重金属等相比，具有检测灵敏度高，可以同时测定多种元素等优势，操作简便、快捷，在2010版《中国药典》中已被广泛应用［2］。通过验证，该方法的铬元素标准曲线在0～100 ng/g浓度范围内，线性良好，相关系数r=0.999 9，检测限为0.02 ng/g，定量限为0.07 ng/g，仪器精密度、样品重复性和回收率良好，表明该方法准确可靠。从验证结果看，胶囊剂药品中铬含量小于百万分之二，符合中国药典标准，该方法实测值较药典方法(原子吸收光谱法)高，说明该方法灵敏度更高，可在实际工作中运用此方法检测胶囊剂药品中的铬元素含量。

［1］ 向靖宇，万建平，杨小军，等.从“铬超标药用胶囊事件”分析我国药品安全监管［J］.中国药房，2013，24(25)：2308-2310.

［2］ 朱琳娇，陈运动，吴永江.电感耦合等离子体质谱法检测明胶空心胶囊中10种元素的含量［J］.中国现代应用药学，2013，30(11)：1228-1232.

［3］ 郭素平.胶囊中铬元素的测定方法验证分析［J］.山西中医，2013，29(7)：50-51.

［4］ 刘永成，张丽英.石墨炉原子吸收光谱法测定胶囊中总铬的不确定度分析［J］.黑龙江医药，2013，26(4)：584-586.

［5］ 李坤，胥艳，姜童祥.微波消解+石墨炉原子吸收光谱法快速测定硬质空心胶囊中铬［J］.中国卫生检验杂志，2013，23(16)：3313-3315.

［6］ 张大成，马新文，赵冬梅，等.药用胶囊中铬元素的LIBS快速检测［J］.药物分析杂志，2013，33(12)：2070-2073.