细菌培养技术在临床诊疗的应用

高 峥

（吉林省通化县疾病预防与控制中心，吉林通化134100）

细菌培养技术在临床诊疗的应用

高 峥

（吉林省通化县疾病预防与控制中心，吉林通化134100）

随着临床上广谱抗生素的广泛应用，尤其近年来在肿瘤治疗、器官移植和各种介入性治疗的深入开展与不断应用，还有皮质类固醇激素的应用比较也广泛，以及获得性免疫缺陷综合征（AIDS）患者的逐年不断增多，使得细菌性感染的发生率呈上升趋势，而细菌性感染的最科学有效治疗则有赖于细菌培养，即微生物检验医师对病原菌的分离、药物敏感试验 （简称药敏试验）和临床医师对抗菌药物的正确选择及制定合理有效的给药方案，因此临床上要提高重视细菌培养对诊疗工作的重要性。尽管细菌培养检查准确率达不到100%，但是还是为临床的救治工作提供了有价值的帮助，我们要提高对该项检查的认识，也为提高细菌培养的准确率，微生物检验技术人员与临床医生之间应建立互动交流，可以有效地开展该检查技术在临床上的广泛应用。

1 严格规范操作技术进行病原菌的分离及药敏试验，提高病原菌培养阳性率

随着细菌分离水平的提高和对细菌检测的重视，细菌培养阳性率上升，但不同级别医院间存在较大差距，尤其儿童专科医院的细菌培养阳性率要求很准确，这就需要医院的微生物室设备及专业技术人员配备达到标准。为提高细菌培养阳性率，应按照 《抗菌药物临床应用指导原则》在应用抗菌药物前，首先留取各类标本送检，及时接种，对于存在细菌感染可能的标本应同时接种特殊培养基及（或）同时在特殊培养条件下培养。其次要严格规范细菌药敏试验，因为正确的药物敏感试验结果对于临床选择合理的抗菌药物非常关键，至今为止仅次于金标准。目前我国规定抗菌药的药敏试验应当遵照临床实验室标准化研究所-美国临床标准化委员会（CLSI／NCCLS）文件进行。随着疾病谱的增加、细菌对抗菌药耐药性的增加、新药的出现以及对药代动力学和药效学的深入认识，药敏试验方法也在随之不断提高改进，NCCLS文件也在每年更新。如：1999年推出超广谱β内酰胺酶的表型筛选和确证试验，同时修改了多种口服抗菌药物对肺炎链球菌的判定折点；2004年采用头孢西丁纸片检测耐甲氧西林的葡萄球菌，同时增加了引起生物恐怖的细菌如炭疽杆菌、马勒博克菌、假马勒博克菌的最低抑菌浓度判定标准。但是近年来，药敏试验技术虽然取得长足进步，可仍有体内、体外药敏不一致的情况，这其中有方法学本身的问题，其判定折点比较难以预测临床治疗效果。因此细菌室工作技术人员应当认识和了解每种药敏试验的特点及局限性，了解耐药机制，多与临床医生沟通交流，逐步积累对于体内外药敏不一致现象的经验。在美国疾病控制和预防中心专门设计了药敏试验网页，即多层次抗微生物制剂药敏试验教材 （MASTER），它是细菌室进行药敏试验方面继续教育不可多得的好教材。该网页不仅介绍最新的药敏试验如NCCLS的更新版，而且有大量的临床病例报道，以问答的形式教授如何针对不同的病原菌选择试验方法及药物，同时指导临床用药。如从新生儿的血培养中分离出B群链球菌 （GBS），其母亲产前阴道拭子培养出同样的细菌，产前因青霉素过敏曾静脉用克林霉素预防婴儿感染。试问围生期筛查中培养出的GBS常规是否需要做药敏试验，有GBS定植菌的孕妇应推荐什么预防用药，若该孕妇青霉素过敏时，应选择何种抗生素，GBS对红霉素和克林霉素耐药比例是多少，这些问题对我们深入了解GBS感染和治疗有很大帮助。

2 检测结果的及时报告为临床快速采取药物治疗提供恰当时机

病原菌的培养及药敏试验的周期较长，如等到培养及药敏试验结果均出来后报告，对于一些危重患者可能会丧失宝贵的抢救时机。在某些发达国家，微生物检测通过网络进行动态报告，如血培养，微生物室在收到血标本后即在网上登录，如有报警提示细菌生长，马上涂片染色，将涂片结果通过网络报告，再将鉴定及药敏试验结果分别报告，临床医师可通过网络及时获取检验结果，作相应的抗菌药物调整［1］。目前国内许多医院的检验报告也通过电脑网络进行无纸化报告。有的微生物实验室发现血培养细菌生长并做涂片后及时电话通知临床医师，这也是很好的做法。

3 提高微生物室对疑难病例的诊断准确率

目前越来越多地使用半自动或自动微生物鉴定及药敏分析仪器，并且国内许多微生物室的仪器设备与国外基本相同。在此同时，仍应注重一些基本的检测手段，对于大多数病原微生物，传统涂片染色和培养仍然是最经典的方法。依靠介入技术获得的标本，如组织穿刺标本等，由于标本量少非常珍贵，而这样的病人往往诊断非常困难，因此实验室应当开展撒网式的检查，至少涂3张片子；分别进行革兰染色、抗酸染色、真菌直接压片，并且同时接种血培养基、巧克力培养基、麦康凯培养基、分枝杆菌培养基及真菌培养基，并适当延长培养的时间。同时根据病人的临床特点，考虑特殊的病原菌，如：奴卡菌、放线菌、厌氧菌、军团菌、白喉杆菌的检查时，还需要特殊营养培养基。许多研究表明，抗生素的经验应用会明显降低标本分离培养的阳性率，而涂片染色检查能提供及时有用的信息，尤其经直接涂片染色的脑脊液中的G-双球菌和真菌、痰中的真菌菌丝、深部感染的分泌物中的厌氧菌等，对培养阴性患者抗菌药物的选择具有重要参考意义［2］。

4 对细菌感染性疾病的治疗提供实验室技术检查的参考

临床医师应根据患者的临床表现及微生物报告等资料综合分析，做出判断，从而制订有效、合理的用药方案。临床医师对细菌培养及药敏试验的方法应有一定的了解，以更好地理解药敏试验报告中敏感 （S）、中介 （Ⅰ）、耐药 （R）的临床意义。应结合临床实际情况分析微生物检验报告，了解并非所有阳性培养都是真正的病原菌，有污染的可能，也可能为应用抗菌药后的菌群交替。使用抗菌药时间较长的感染，疗程中需要复查细菌培养。此外，影响临床疗效的因素很多，有人认为药敏试验结果与临床疗效的符合率约为70%，因此，还应根据病人用药后的治疗效果和临床病情调整用药。临床上通过沟通和交流，临床医师可及时获得患者的病原学检查资料，做出及时的诊断与治疗，提高疗效，同时可学习更新临床微生物知识，提高对感染病原菌的认识，而临床微生物检验医师可以进一步认识到正确的病原微生物检测与报告对感染病诊治的重要性，提高病原学诊断水平。

［1］岳桂莲，张丽霞，苏一辰，等.317例血、尿标本L型细菌培养结果分析［J］.中国医科大学学报，1996，22（1）：106 -107.

［2］周惠平，薛荣芳，王蕴萍，等.血培养细菌L型的观察［J］.中华医学检验杂志，1994，21（5）：36.

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