卵黄抗体在毛皮动物疾病防治中的应用

（山东省滨州畜牧兽医研究院山东滨州256600）

卵黄抗体在毛皮动物疾病防治中的应用

庄金秋，梅建国，王玉茂

（山东省滨州畜牧兽医研究院山东滨州256600）

本文综述了卵黄抗体IgY在毛皮动物（包括兔、水貂、狐狸、貉）疾病防治中的研究和应用，以期为广大毛皮动物养殖业主及兽医临床科技工作者更好地防治动物疾病提供参考。

卵黄抗体；毛皮动物；疾病防治

1 卵黄抗体

卵黄抗体（Immunoglobulinof yolk，IgY）是家禽卵黄中存在的主要免疫球蛋白，一般从被抗原免疫的母鸡卵黄中提取。当母鸡机体受到抗原刺激后，诱导体内浆细胞分泌抗体，IgG随血液循环到达卵巢并选择性地转移到成熟卵泡中形成IgY。与IgG相比，IgY具有抗原用量少、制备周期短、对动物损伤小、产量大、特异性强、灵敏度高，可进行定量检测等优点，已被广泛用于人及动物多种疾病的诊断与防治，并显示出了良好的应用前景。

2 在疾病防治中的应用

2.1 兔瘟

兔瘟又叫兔病毒性出血症，是由兔瘟病毒引起的一种急性、热性、败血性和毁灭性的传染病。该病常呈暴发性流行，发病率及死亡率极高，给养兔业带来了巨大的经济损失。目前该病尚无有效治疗药物，疫苗接种7～10 d后才能产生足够抗体，不能及时有效保护。因此，研究在疫苗免疫建立之前对兔瘟易感兔群有保护作用的方法，对控制该病具有非常重要的意义。王孝友等（2004）用兔瘟抗原免疫产蛋鸡精制的IgY，采用血凝抑制试验（HI）测定的最高滴度为15 log2。临床应用效果表明，IgY（HI为13log2）对发病兔进行紧急防治，治愈率为84.38%～92.86%，能迅速控制疫情。张宏伟（2007）制备的兔瘟IgY的HI效价达14 log2，并能维持7周以上。使用试验结果测出的有效治疗剂量对3个兔群在兔瘟高发季节前，间隔15 d进行2次预防接种，与历年相比，有效降低了发病率。随后王治方等（2007）、汤少伟（2010）制备的兔瘟IgY也显示出了较好的治疗效果，对兔瘟早期治愈率为80%，对兔瘟紧急预防有效率为100%，并认为其研制的IgY安全性良好，作用迅速，非常值得推广。核衣壳蛋白VP60是兔瘟的主要免疫原性蛋白，Li等（2014）重组表达VP60蛋白N端的250个氨基酸并制备IgY，结果表明，特异性IgY可显著保护兔感染病毒，持续治疗5 d后可显著提高其存活率。

2.2 兔大肠杆菌病

又称黏液性肠炎，是由致病性大肠杆菌及其产生的毒素所引起的一种暴发性肠道性疾病，以断奶后不久的幼兔多发，且病程长，反复发作，死亡率高。范作良等（2006）制备了鸡抗兔大肠杆菌高免IgY，并通过微量凝集试验方法，研究了高免IgY的消长规律及临床应用。结果表明，超强化免疫5周后，抗体效价达到高峰，9周后抗体效价逐渐下降。同一剂量IgY效价达26时，肌注2 mL/（kg·bw）体重，连用3 d对兔大肠杆菌感染的治愈率达90%。与头孢噻肟进行的对比田间治疗试验，IgY的治愈率显著高于头孢噻肟。

2.3 特种毛皮动物疾病

（水貂、狐狸、貉）主要传染病包括犬瘟热、水貂细小病毒性肠炎、水貂阿留申病、狐狸脑炎、水貂出血性肺炎、狐加德纳氏菌病等。我国闫新华等（2000）率先应用水貂肠炎病毒免疫蛋鸡制备IgY，结果表明，经5次免疫制备的IgY，于最后一次免疫后第10 d其琼脂扩散试验（AGP）效价达1∶25；第30天效价为1∶23。该抗体较稳定，4℃保存120 d、-20℃保存180 d效价不变。用该抗体治疗细小病毒性肠炎病犬，治愈率高达93.9%，证实其制备的IgY是成功的，可用于犬细小病毒性肠炎的治疗。谭婷婷（2010）采用分离株水貂细小病毒MEV-ZYL-1免疫蛋鸡，并利用氯仿和饱和硫酸铵结合的方法提纯IgY，HI效价可维持在9 log2以上，这为水貂MEV防治奠定了基础。庄金秋（2013）试验应用水貂犬瘟热CDV分离毒作为抗原免疫蛋鸡制备IgY，并用AGP法和间接ELISA法测定其抗体水平。结果显示IgY的最高抗体滴度与IgG接近，蛋鸡3免后3～5 d可开始持续收集鸡蛋制备IgY。临床上应用其制备水貂CDV精制IgY和高免血清治疗制剂对水貂犬瘟热的综合治疗进行了探索。结果表明，精制IgY起到较好的治疗效果，可进行批量生产用于临床治疗。王玉燕（2002）分别用犬瘟热疫苗和犬腺病毒（CAV）疫苗免疫蛋鸡，制备了活性较高的抗狐CDV和CAV的IgY。该IgY具有较高的活性，可作为特异性的工具蛋白用于相应抗原抗体的检测。随着人们对IgY研究的不断深入，缓释技术逐渐应用于IgY研究中以增强其作用效果。Li等（2009）用海藻酸钠和壳聚糖为原料制备的微胶囊来包被IgY，既改变了IgY的抗胃酸能力，又减缓了IgY释放速度，增强了IgY的添加效果。张婧兰（2009）将制备的CDV和犬细小病毒（CPV）高免IgY，分别加入酸化0.25%壳聚糖溶液中，以硫酸钠为交联剂，在超声作用下利用形成的壳聚糖微球对IgY进行包封，包封效果优良。在pH值为1的模拟胃液内37℃摇床2 h，制备的载药壳聚糖微球能够很好的保护IgY。

3 IgY在国际的应用研究

德国、韩国、日本等也有大量关于IgY应用研究的报道。应用IgY防治特种毛皮动物疾病，不会出现应用动物高免血清治疗引起的副作用，又可避免同源或近源材料带毒而导致本动物发病的潜在危险，对于有效降低动物疾病爆发、减少经济损失将具有重要的意义。

自KIemperer（1983）首次报道鸡蛋中存在IgY抗体以来，学者对IgY的研究不断深入。欧洲替代方法验证中心（ECVAM）建议以IgY代替哺乳动物IgG作为试验和生产的抗体，不仅因为IgY的结构与IgG相似，而且IgY在许多功能方面优于IgG。在国内，鸡也是率先实现SPF化和产业化的试验动物，有利于IgY的规模化生产。因此，IgY在重大动物疫病防治与诊断方面拥有非常广阔的应用前景。但是，目前来说在利用IgY进行动物疾病治疗的过程中，仍需要注意一些问题，如通常IgY在动物发病的初期其治疗的效果显著，IgY与动物疫苗接种二者之间应间隔一定的时间，应用IgY注射效果比较好，而用作饮水效果不是十分显著。相信随着人们对于IgY研究的不断拓展，其生产制备技术的不断完善，IgY将在动物疾病防治中发挥出更大的作用。■（编辑：赵晓松）

《内治八法》讲解牛病例练习题

牛，精神倦怠，体瘦毛焦，食欲不振，久泻不止，脱肛，口色淡白，脉虚。治疗宜选用的方剂是（ ）（执业兽医师考试真题）

A、四物汤 B、曲蘖散 C、桂心散 D、六味地黄汤 E、补中益气汤

病例解析：本病例属于脾虚泄泻,其主要症状是患畜精神沉郁，倦怠无力，体瘦毛焦，食欲减退，鼻唇冰凉。大便溏泄或稀薄，常混有没有消化的饲料，大便一般无恶臭味。严重病例久泻不止，甚至出现脱肛，口色淡白，舌苔白腻，脉虚无力等症状。

治疗方法：患畜需补脾益气，燥湿利水，可以采用补法中的补气法进行治疗。治疗可选用补气法的代表方剂补中益气汤。

本病例中选项解析：四物汤是补血法的代表方剂，主要用于治疗血虚证。曲蘖散是消食导滞法的代表方剂，主要用于清除胃中积食或肠中结滞。桂心散是以桂心为主用药材的一种方剂，主要用于心脾虚损、气血不足所致的失眠、惊悸、眩晕等症。六味地黄汤是滋阴法的代表方剂，主要作用是滋阴补肾。补中益气汤是补气法的代表方剂，主要作用是补脾益气，燥湿利水。所以本病例中，治疗宜选用的方剂是补中益气汤。（作者：向金梅）■（编辑：狄慧）

山东省现代农业产业技术体系毛皮动物创新团队项目（SDAIT-18-011-15）

庄金秋（1978-），女，山东潍坊人，兽医硕士，副研究员，主要从事细胞培养和动物用病毒疫苗研制。