人巨细胞病毒感染母婴传播与母乳喂养

牛银萍

人巨细胞病毒感染母婴传播与母乳喂养

牛银萍

目的分析人巨细胞病毒感染（HCMV）母婴传播与母乳喂养的关系。方法100例疑似为人巨细胞病毒感染患儿， 采用应该荧光定量PCR（FQ-PCR）方法检测患儿及母亲的HCMV-DNA含量。结果母乳HCMV-DNA阳性率为72%， 阴性率为28%。母乳HCMV-DNA阳性与患儿血HCMV-PP65抗原数据差异有统计学意义（P＜0.05）， 但母乳HCMV-DNA阳性、阴性与患儿血HCMV-DNA配对差异无统计学意义（P＞0.05）。结论HCMV传播可通过母乳喂养导致婴儿HCMV感染， 是其主要获得性途径。

人巨细胞病毒感染；母婴传播；母乳喂养

人巨细胞病毒（HCMV）是导致婴幼儿发生多系统疾病的最为常见且主要的病原体［1］， 婴幼儿在HCMV感染后，轻者腹泻， 重者肝功能异常、血液系统疾病， 甚至死亡。通常HCMV感染婴幼儿会发生消化、血液、呼吸等系统疾病，积极预防HCMV感染， 认识HCMV感染传播知识是十分重要的。因此， 本文采用FQ-PCR检测母乳中HCMV， 探讨HCMV母婴传播与母乳喂养的关系， 分析如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 本组100例研究对象均选自本院2012年3月～2013年10月收治的疑似为HCMV感染患儿， 同时收纳患儿母亲；患儿年龄1 d～6个月， 母亲年龄20～34岁。

1.2 检测方法 母亲均于产后第2 d或就诊第2 d采集乳汁标本， 母亲先清洁乳头， 后自我挤压乳头， 分数次挤出乳汁3～5 ml， 置入无菌管管中， 立即送检。同时分别抽取1 ml和3 ml患儿静脉血， 注入EDTA抗凝剂的无菌管中， 摇晃均匀，立即送检。

利用FQ-PCR法对标本DNA含量进行检测。乳汁检测时，对其进行5 min 12000 r/min离心， 沉淀， 取内含不溶于水物质的50 μl提取液进行打匀， 在吸取标本时， 若吸头嘴太细无法吸取， 或取样后吸头堵塞， 可剪掉吸头嘴一截再进行吸取。在100℃环境中静置10 min， 必要时可再次在4℃环境中静置8～12 h， 使病毒颗粒裂解充分， 然后对其行5 min 12000 r/min离心， 取5 μl上清液进行PCR扩增。

在血标本检测时， 在1 ml静脉血的离心管中添加1 ml生理盐水， 并轻微混匀， 顺着试管壁将2 ml混合血液缓慢倒入2 ml淋巴细胞分离液试管中， 静置行15 min 2500 r/min离心， 吸取中间细胞层置入离心管中， 行5 min 10000 r/min离心， 沉淀后取DNA50 μl提取液后打匀。在100℃环境中静置10 min， 后行5 min 12000 r/min离心， 取5 ml含病毒DNA上清液行PCR扩增。

在扩增时， 取若干反应管， 分别加入上清液各5 μl， 行1 min 6000 r/min离心。按照对应顺序， 设置阴性质控品及阳性定理孔参考平梯度。

1.3 评判标准［2］使用荧光显微镜， 对标本进行400X 倍数分析， 阳性：细胞荧光呈苹果绿， 阳性细胞数超过1个。

1.4 统计学方法 应用SPSS19.0统计学软件进行数据统计分析。计数资料以率（%）表示， 采用χ2检验。P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 母乳标本检测分析 100份母乳标本通过检测， HCMVDNA阳性率为72%（72/100）， 阴性率为28%（28/100）。72例HCMV-DNA阳性标本中， HCMV-DNA拷贝数在1.0×103～6.4×106 ml， 平均为2.0×105 ml。

2.2 母乳HCMV-DNA与配对患儿血HCMV-PP65抗原关系72例母乳HCMV-DNA阳性标本经与患儿血HCMV-PP64抗原进行配对， 阳性率为90.3%（65/72）， 阴性率为9.7%（7/72）；28例母乳HCMV-DNA阴性标本与患儿血HCMV-PP65抗原进行配对， 阳性率为67.9%（19/28）， 阴性率为32.1%（9/28）。数据间对比， 差异有统计学意义（P＜0.05）。

2.3 拷贝数对比 母乳HCMV-DNA阳性与患儿血HCMVDNA拷贝数值在2.3×103～6.4×106ml， 平均为4.1×105ml；母乳HCMV-DNA阴性标本与患儿拷贝数值是在1.0×103～4.3×106ml， 平均为2.4×105ml。差异数据无统计学意义（P＞0.05）。

3 讨论

HCMV广泛分布在人群中， 其感染多呈隐性特征， 但对于免疫功能低下， 或存在严重疾病患者来说， HCMV感染会诱发严重系统性并发症， 对患者生命安全造成威胁。通常大部分育龄期女性曾HCMV感染， 若孕妇为HCMV隐性感染，在妊娠期间受到激素和生理变化的刺激， 会激活HCMV， 并逐渐增加， 乳汁是存在HCMV感染重要地方， 属于重要传染源。HCMV感染患儿在吸允排毒母乳或接触感染母亲的体液等都会获得HCMV感染， 婴幼儿在HCMV感染后， 会对婴幼儿成长发育、视力听力等均带来严重损害［3］。因此加强分析母乳喂养对HCMV感染传播的关系， 对预防婴幼儿HCMV感染起到显著意义。母乳中含有促进婴幼儿生长发育的诸多重要营养物质， 并包含各种抗病物质， 但母乳是母亲体液重要组成部分， 会对病原体传播提供快捷条件， 通过母乳喂养可促进传染病的传播， 为此对母乳HCMV-DNA检测， 能够及时掌握产妇感染情况及对新生儿的预防及治疗情况。在本组研究中， 母乳HCMV-DNA阳性率为72%， 阴性率为28%。由此可见， HCMV感染患儿中， 母亲乳汁HCMV具有较高的阳性率。而部分患儿可通过接触母亲活动性体液， 如产道分泌物、体液、飞沫等， 造成HCMV感染。HCMV-DNA阳性与患儿血HCMV-PP65抗原数据差异有统计学意义（P＜0.05）。由结果可以看出， 婴幼儿可以通过母乳喂养而出现HCMV感染。但母乳HCMV-DNA阳性、阴性与患儿血HCMV-DNA配对无明显差异（P＞0.05）。说明HCMV感染与母乳喂养无较大关联性， HCMV本身致病强弱及婴幼儿个体差异等因素，均是造成HCMV感染的重要因素。

总之， HCMV传播可通过母乳喂养， 导致婴儿HCMV感染， 是其主要获得性途径［4］。对于母乳喂养， 对于足月成熟婴幼儿来说， 若HCMV感染母乳， 建议采用母乳喂养， 其中营养物质及免疫物质丰富， 且存在HCMV感染抗体， 使正常婴幼儿形成天然自动-被动联合免疫效应。对于早产儿或免疫缺陷患儿来说， 应停止HCMV感染母乳喂养， 或将其消毒后再进行食用。

［1］ 陈倩， 钟天鹰， 张其华.荧光定量PCR法检测母乳巨细胞病毒感染和母婴传播.中国优生与遗传杂志， 2005， 13（11）:42-43.

［2］ 夏秀兰， 张哑钦， 李辉.山西农村耍幼儿智能发育状况分析.中国妇幼保健， 2009， 24（20）:2795-2797.

［3］ 赖源， 朱纯华， 覃亚斌， 等.人巨细胞病毒感染母婴传播与母乳喂养.实用预防医学， 2012， 19（9）:1406-1408.

［4］ 余钟声， 郑季彦， 陈黎勤， 等.婴儿人巨细胞病毒感染病原学和临床分析.中华传染病杂志， 2006， 24（5）:333-337.

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.07.197

2014-11-03］

473000 河南省南阳市第二人民医院儿二科