注射用奥美拉唑钠有关物质的方法建立

宋捷

哈药集团生物工程有限公司

注射用奥美拉唑钠有关物质的方法建立

宋捷

哈药集团生物工程有限公司

目的：建立注射用奥美拉唑钠有关物质检查方法。方法：采用高效液相色谱法，色谱柱为C18，流动相为硫酸氢四丁基溶液（取硫酸氢四丁基铵6.78g与氢氧化钠0.8g，加磷酸盐缓冲液（PH 7.4）溶解并稀释至1000m l）-磷酸盐缓冲液（PH 7.4）（磷酸二氢钠与磷酸氢二钠，加水溶解并稀释至1000m l，调节PH值至7.4）-乙腈（5：69：26），流速为1.0m/m in，检测波长为280nm。结果：奥美拉唑钠主峰与包括降解产物奥美拉唑磺酰化物（5-甲氧基-2-｛［（4-甲氧基-3，5-二甲基-2-吡啶基）-甲基］-磺酰基｝1H-苯并咪唑）在内的其他杂质均可有效分离，峰纯度符合规定，物料平衡。结论：建立的方法准确可行，适用于注射用奥美拉唑钠的质量控制。

注射用奥美拉唑钠；有关物质；高效液相色谱法

奥美拉唑是一对活性旋光对映体的消旋混合物，籍由高目标性的作用机制来降低胃酸的分泌，是胃壁细胞中酸泵的特殊抑制剂。奥美拉唑钠为抗酸及治疗消化道溃疡类药物，作为第一代质子泵抑制剂，已经广泛应用于临床，并且取得公认的疗效。可用于反流性食管炎，消化性溃疡，消化性溃疡伴幽门螺杆菌感染，急性胃黏膜病变，Zollinger-Elison综合征的治疗。大量的临床数据表明，其治疗效果优于H2受体拮抗剂，且耐受性好，不良反应小，可以被广泛应用【1】。

1 试验材料

注射用奥美拉唑钠、奥美拉唑磺酰化物。溶剂：去乙腈200ml，加磷酸盐缓冲液（PH11.0）（取磷酸钠0.34g与磷酸氢二钠0.627g，加水溶解并稀释至1000m l调节PH值至11.0）稀释至1000ml。色谱柱：C18（5μm×4.6mm×250mm），Angilent1260型高效液相色谱仪（紫外检测器）

2 方法与结果

2.1 色谱条件

采用高效液相色谱法，色谱柱为C18（5μm×4.6mm×250mm），流动相为硫酸氢四丁基溶液（取硫酸氢四丁基铵与氢氧化钠，加磷酸盐缓冲液PH7溶解并稀释至1000m l）-磷酸盐缓冲液（PH7.4）（磷酸二氢钠与磷酸氢二钠，加水溶解并稀释至1000m l，调节PH值至7.4）-乙腈（5：69：26），流速为1.0m l/min，检测波长为280nm。

2.2 溶液制备

称取奥美拉唑磺酰化物约6mg，精密称定，至100ml容量瓶中，加乙腈5m l使溶解，加溶剂稀释至刻度，摇匀；精密量取上述溶液1ml,至另一个100ml容量瓶中，加溶剂使成0.6μg/ml的溶液，作为杂质对照品溶液。取注射用奥美拉唑钠适量，用溶剂稀释制成每1m l中约含奥美拉唑0.1mg的溶液，作为供试品溶液。取上述供试品溶液1m l，至100m l容量瓶中，加溶剂稀释至刻度，作为对照溶液;称取奥美拉唑对照品及奥美拉唑磺酰化物对照品适量，置于同一100ml容量瓶中，加溶剂稀释成浓度分别奥美拉唑0.1mg/ml、奥美拉唑磺酰化物0.6μg/ml的溶液，作为系统适用性溶液。

2.3 方法验证

相对保留时间的确定：分别取奥美拉唑对照品及杂质奥美拉唑磺酰化物对照品适量，用溶剂分别稀释制成加溶剂制成0.6μg/ ml的溶液，分别取20μl，注入液相色谱仪，相对保留时间分别为23.41、21.62.取系统适用性溶液20μl按照设定好的方法进样，连续进六针，杂质及主峰均得到良好的分离，分离度大于1.5，计算杂质封面积RSD为1.5%，保留时间的RSD为0.6%，塔板数大于5000，可继续对方法进行详细验证。

溶液稳定性试验：取同一份注射用奥美拉唑钠供试品溶液，分别于0、2、4、6、8小时进样，记录色谱图，结果主峰峰面积的RSD为1.5%，说明供试品溶液在8小时内稳定。

耐用性试验：更换三根不同的色谱柱（三根不同厂家的C18色谱柱），流动相比例（乙腈比例变化±2%），柱温及流速，考察各参数变化对有关物质测定结果的影响，同时考察奥美拉唑磺酰化物与奥美拉唑塔板数及二者分离度的影响，结果表明，各参数变化对有关物质结果无明显影响，奥美拉唑磺酰化物与奥美拉唑的塔板数及二者分离度均在规定范围内。耐用性试验符合规定。在各种色谱条件下，对称因子在0.8-1.2之间，塔板数均大于5000.

专属性：使用紫外检测器，对供试品进行酸、碱、氧化、高温及强光破坏实验，各破环条件下主峰均有下降，比较在波长260nm、270nm、280nm、290nm、300nm下测定的杂质情况，在280nm下测定的响应值最大，确定检测波长为280nm。在破环条件下，检测的各相邻杂质峰与主峰均可良好分离，分离度符合规定，方法专属性好。

2.4 样品检查

取注射用奥美拉唑钠，依据2.2中方法分别制备杂质对照品溶液、供试品溶液、对照溶液，按照既定检测方法进行有关物质检测，精密量取对照溶液20μl，注入液相色谱仪，调节仪器灵敏度，使主成份色谱峰的峰高约为满量程的20%-25%，准确量取对照溶液、供试品溶液、杂质对照品溶液各20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图至主成份峰保留时间的2.5倍，结果供试品溶液的色谱图中单个杂质峰面积均小于对照溶液色谱图中的主峰面积；奥美拉唑黄酰化物的峰面积小于对照溶液中主峰面积的0.3倍；各杂质峰面积的和小于对照溶液主峰面积的1.5倍。

3 结论

注射用奥美拉唑钠有关物质检测，需要将奥美拉唑主峰、已知杂质奥美拉唑黄酰化物及其它杂质峰有效分离，按照所确定的方法进行有关物质检测，方法学研究表明，所确立的方法可以达到准确检测、对注射用奥美拉唑钠产品质量进行正确评价的目地，方法准确可行，灵敏度高，耐用性好。

[1]遇苏宁，张三奇，杨春娥等。质子泵的研究进展［J］。中国新药与临床杂志，2002.21（11）：680-682.

宋捷（1988-），女，黑龙江省哈尔滨市，本科，哈药集团生物工程有限公司，化验员。