两种胆红素测定方法在生化分析仪上的比较

李伟 林鹏277400山东省枣庄市台儿庄区人民医院

两种胆红素测定方法在生化分析仪上的比较

李伟 林鹏
277400山东省枣庄市台儿庄区人民医院

目的：探讨改良J-G法和钒酸盐氧化法测定血清总胆红素和直接胆红素的效果。方法：收集患者的血液标本，采用改良J-G法和钒酸盐氧化法测定血清总胆红素和直接胆红素，比较测定结果。结果：两种测定方法的测定结果无显著性差异。结论：钒酸盐氧化法与改良J-G法相比，测定直接胆红素和总胆红素具有检测范围大，抗干扰能力强等特点，更适合临床常规检测。

血清总胆红素；血清直接胆红素；测定

胆红素是我们在临床工作中最常测定的指标之一，其能够较好地反映被检测者的肝功能，对疾病的诊治具有重要的意义。目前，多数检验科室都使用改良J-G法测定胆红素，但是，该种检测方法容易受到其他一些因素的影响，从而使得检测结果具有较大的误差，对临床的诊治产生一定的影响。随着科学技术的不断发展，医疗设备也正在快速的进步和发展，临床中测定血清胆红素方法也越来越多，选择一种更为合适的检测方法变得越来越重要。为此，本研究用改良J-G法和钒酸盐氧化法分别对血清总胆红素（TBI）和血清直接胆红素（DBI）进行测定，现报告如下。

资料与方法

材料：①仪器：日立-7600全自动生化分析仪。②试剂：改良J-G法试剂，潍坊3V生产。钒酸盐氧化法试剂，上海科华生产。③标准：朗道校准液，朗道质控液，各试剂盒配套标准液。④对象：我院门诊患者以钒酸盐法测定结果为标准，分为5组：总胆红素（2.5～366.2mmol/L）50例；总胆红素正常、直接胆红素＜7.0mmol/L 50例；总胆红素正常、直接胆红素＞7.0mmol/L 50例；其中脂血标本在50例，总胆固醇（TC）＞7.76 mmol/L，甘油三酯（TG）正常者20例，TC正常，TG＞4.5 mmol/L 10例，TC＞7.76 mmol/L，TG＞4.5 mmol/L 10例，溶血标本20例，轻度溶血标本10例。

方法：在日立-7600全自动生化分析仪上根据各试剂要示设置通道和参数。用钒酸盐法和改良J-G法进行测定。并进行统计学分析。

结果

对结果进行统计学处理，回归方程Y=0.993χ-0.363，相关系数γ=0.9989，配对t检验，t=0.602，P＞0.05，两法结果差异无统计学意义，见表1。

讨论

当Hb＜4.5 g/L时，对改良TG法测定结果无明显干扰，但是当Hb＞6 g/L时，则会对测定结果形成较为严重的影响。当TC 6mmol/L时，则几乎不会影响到检测结果，改良TG法胆红素与重氮试剂反应后，加入碱性酒石酸钠，使反应液碱化到pH 13左右，测定产物吸光度，显色十分稳定，灵敏度增高，尽管Hb与重氮试剂反应产物可破坏偶氮胆红素或被亚硝酸氧化成高铁血红蛋白可能对测定产生负向干扰，但其干扰程度较轻，一般溶血对测定结果影响不大。

钒酸盐氧化法对总胆红素测定的准确性，在684mmol/L范围内线性较好，对直接胆红素测定准确度在＞205mmol/L时，线性较差，当血红蛋白40 g/L时，对钒酸氧化法测定无干扰。钒酸盐氧化法测定总胆红素和直接胆红素不仅能有效抵抗溶血和脂血标本的干扰，其统计数据均位于各种方法的前列，符合统计学以及临床要求，而且稳定时间长开启保存15d，适合大批量标本的自动化检测，综合性能较好。其重复性、稳定性、准确性、线性范围都能满足临床要求，试剂成本低廉，容易被患者接受。据此我们推荐钒酸盐氧化法测定血清总胆红素和血清直接胆红素，它将为临床提供更准确，更稳定的测定结果。

研究结果显示，两种检测手段在临床中都可被使用，但是两种方法相比较后可发现，其各有优劣势，重氮法的检测虽然更加简便，但干扰因素多。在本研究中，我们通过使用双试剂法消除了血清色泽和脂血混浊度对检测结果的影响，此外，也在很大程度上降低了直接胆红素的假性升高。但是，一些其他的因素，如严重溶血、黄疸标本等还是会对检测结果产生较大的影响，从而影响其检测的精确度。而采用胆红素氧化酶法检测，虽然可能受到的干扰因素较少，但是检测时线性范围狭窄，并且在检测的过程中其所使用的酶对检测结果有着重要的影响，其保存时间较短，一般在开启后只能保存7d，价格也相对较高，会大大增加患者的看病负担，使得其在临床使用中受到一定的限制。钒酸盐法测定总胆红素和直接胆红素，除了可以在很大程度上降低标本对检测结果的影响外，并且其统计数据均位于各种方法的前列，试剂的保存时间也相对较长，一般可以在开启后保存15d，从而使其在临床使用中具有明显的优势，适合大量标本的检测，并且检测结果更为准确，稳定性良好，此外，其价格也相对较低，不会增加患者的看病负担，容易被多数患者所接受。所以，我们更加倾向于在临床工作中使用钒酸盐氧化法测定血清总胆红素和直接胆红素。但是，怎样有效地降低其检测结果的影响值得我们在今后的研究中进一步探讨和解决。

Com parison of tw o m ethods form easuring bilirubin in biochem ical analyzer

LiWei,Lin Peng
The People's HospitalofTaierzhuang District,Zaozhuang City,Shandong Province 277400

Objective：To investigate the effect of themodified J-G method and the vanadium oxide oxidation method for the determination of total bilirubin and direct bilirubin.Methods：Blood samples of patients were collected.Serum total bilirubin and directbilirubin were determined by using themodified J-Gmethod and the vanadium oxidemethod.We compared the results of the assay.Results：There was no significant difference between the two methods.Conclusion：Compared with the modified J-G method,the vanadium oxide oxidation method for the determination of total bilirubin and direct bilirubin had many advantages, such as large detection range,stronganti-interferenceability and so on,itwasmore suitable for routine clinicaldetection.

Serum totalbilirubin；Serum directbilirubin；Determination

10.3969/j.issn.1007-614x.2015.28.65