沉默CIAPIN1基因对K562细胞增殖能力的影响*
2015-01-26李庆华庞天翔中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室北京100032
中国病理生理杂志 2015年10期
王 齐,王 建,李庆华,庞天翔(中国医学科学院北京协和医学院,血液学研究所血液病医院,实验血液学国家重点实验室,北京100032)
沉默CIAPIN1基因对K562细胞增殖能力的影响*
王齐,王建,李庆华△,庞天翔△
(中国医学科学院北京协和医学院,血液学研究所血液病医院,实验血液学国家重点实验室,北京100032)
目的:探讨靶向干扰CIAPIN1基因表达对慢性粒细胞白血病(CML)细胞系K562细胞增殖能力的影响。方法:针对CIAPIN1基因构建shRNA真核表达载体并稳定转染K562细胞系。Real-time PCR及Western blotting技术鉴定干扰效率; CIAP-IN1基因沉默之后,改良MTT法检测细胞活力的变化;甲基纤维素集落形成实验观察细胞集落形成大小和数量的变化;流式细胞术检测细胞周期的改变;将K562细胞接种到裸鼠体内皮下,观察细胞在裸鼠体内成瘤能力的变化。结果: CIAPIN1基因表达下调后,K562细胞的活力下降;集落形成数量减少和集落减小; G1期细胞数量增加;小鼠体内成瘤能力明显降低。结论:下调CIAPIN1基因表达能够抑制K562细胞在体外及体内的增殖能力。
国家自然科学基金资助项目(No.81170510; No.81402432; No.81090412) ;天津市自然科学基金资助项目(No.14JCZDJC34900)
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