高效液相色谱法测定胆舒排石颗粒中栀子苷的含量

王业 盈施明

【摘要】目的：测定胆舒排石颗粒中栀子苷的含量。方法：采用高效液相色谱法，以乙腈—水（15∶85）为流动相;流速为10ml/min;检测波长为238nm。结果：栀子苷线性范围为705μg～705μg，平均回收率为10061%，RSD=187%。結论：高效液相色谱法测定栀子苷含量，方法快速、结果准确，操作简便，可用于胆舒排石颗粒的质量研究。

【关键词】 胆舒排石颗粒; HPLC;栀子苷

【中图分类号】R286【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517（2014）07-0027-02

Determination of Geniposid in Danshupaishi GranuleWangyeying，Shiming

Nanjing Tongrentang Pharmaceutical CO. LTD，Nanjing Jiangsu  210012Abstract：Objective： To determine the content of Geniposid in Danshupaishi granule. Methods：A HPLC method was used. The mobile phase consisted of methgl alcohol-water（15∶85）.The flow rate was 1 ml/min. The detection wavelength was at 238 nm. Results： The linear range of Geniposid was 705μg～705μg The average recovery rate was 10061%（RSD=187%）. Conclusion： The HPLC method is accurate，simple and suitable for quality studies of the Danshupaishi granule.

Keywords：Danshupaishi granule; HPLC; Geniposid

胆舒排石颗粒是我公司自行研制的新药品种，由栀子、金钱草、茵陈等18 味中药组成，临床上主要用于胆石病合并慢性胆囊炎湿热兼气血瘀阻证。为保证该制剂的安全、有效、质量可控，采用高效液相色谱法测定该药品中栀子苷的含量。

1仪器与试药

Agilent 1100高效液相色谱仪，十万分之一电子天平（sartorius），KQ-300DE型数控超声仪。乙腈为色谱纯，水为重蒸馏水。栀子苷对照品（批号：110749-200309，中国药品生物制品检定所提供）。胆舒排石颗粒（南京同仁堂药业有限责任公司）。缺味阴性样品：按处方分别配成相应的缺味处方药，模拟制剂工艺，加相应辅料制成。

2方法与结果

21色谱条件色谱柱：依利特 SinoChrom ODS-BP柱（5um，46×250mm）;流动相：乙腈-水（15∶85）;流速：10ml/min;柱温：35℃;检测波长：238nm。

22溶液的制备

221对照品溶液的制备取栀子苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含40μg的栀子苷溶液，备用。

222供试品溶液的制备取本品装量差异项下的颗粒，粉碎成细粉，取1g，精密称定，置锥形瓶中，精密加甲醇50ml，称定重量，超声提取40分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液2ml，置10ml容量瓶中，加甲醇定容至刻度，备用[1-2]。

223阴性对照溶液的制备取缺栀子的样品，按222项下的方法制成阴性对照溶液。

23干扰试验分别吸取对照品、供试品溶液、阴性对照溶液各10μL，按照“21项”下的色谱条件测定，结果阴性无干扰[3]。色谱图见图1、图2、图3。

24线性考察分别精密量取1ml、2ml、4ml、6ml、8ml、10ml的栀子苷对照品溶液（705μg/ml），移入10ml量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀。分别吸取10μl注入高效液相色谱仪，测定，记录峰面积。以峰面积Y对进样浓度X（μg/ml）进行线性回归，得回归方程为：Y=1820043X+11313，r=09998（n=6），线性范围为705ug～705ug。

25精密度试验取同一批次的样品10g，精密称定，按“222项”下的方法制备成供试品溶液，连续进样6次，体积10μml，测定其峰面积[4]。计算RSD为102%，符合要求，表明该方法的精密度较好。

26重现性试验精密称取6份同一批号的样品，按照“222”项下的方法制成供试品溶液，进样体积5μl，注入高效液相中测定其峰面积[4]。计算得RSD为052%，符合要求。表明该方法的重现性较好。

27稳定性试验取同一供试品溶液，分别于0h、4h、8h、12h、16h、20h进样，进样体积10μl，注入高效液相中测定其峰面积，计算得RSD为113%，符合要求。表明供试品溶液在20h内比较稳定。

28加样回收率试验取已知含量的样品约05g，精密称定，加入一定量的橙皮苷对照品，按“222项”下的方法制成供试品溶液，测定其峰面积。计算得平均回收率为1006%，RSD为19%，均符合要求，说明该方法可以用于橙皮苷的含量测定。具体结果见表1所示。

表1加样回收率试验结果（n=2）

序号样品量

（g）橙皮苷含

量（mg）加入橙皮

苷量（mg）实测量

（mg）回收率

（%）平均回

收率（%）RSD

（%）1051012251209044321990220491221682090443361037130533723552090444561005140496321902090442941006550503622222090442959917100619

29含量测定分别取三个不同批次的胆舒排石颗粒样品1g，精密称定，按照222项下的方法制成供试品溶液，测定橙皮苷的含量，结果见表2所示。

表2样品含量测定结果 （n=2）

批号含量（mg/袋））     RSD（%）100601380191006023961310060337115

3讨论

胆舒排石颗粒是由金钱草、栀子等十八味中药精制而成，处方药味多，相互干扰大，最初标准是采用薄层扫描法测定栀子苷的含量，但操作复杂，精密度较差，回收率低，现经过研究改为采用高效液相色谱法测定成品中栀子苷的含量，方法快速，结果准确，操作简便，可用于胆舒排石颗粒的质量研究。

参考文献

[1] 中华人民共和国药典2010年版（一部）[S].北京：化学工业出版社，2010，202.

[2] 谭忠军，杨慈海，程丽军，等.HPLC测定清火栀麦片中栀子苷的含量[J].中成药， 2005， 27，（28）：

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[3] 奚永兰，徐富柱.高效液相色谱法测定乳宁颗粒中芍药苷的含量[J].中国民族民间医药，2012，21（6）：42-43.

[4] 蒋永海.高效液相色谱法测定金胆片中虎杖苷的含量[J].西北药学杂志，2006，21（4）：148-150.

（收稿日期：20140116）