液态保健品中总多糖含量测定方法研究

白少伟 徐媛 庞文生 胡娟

【摘要】目的：研究液态保健品中总多糖含量测定方法。方法：采用醇沉法，分离样品中的总多糖;以无水D-葡萄糖为标准品，采用苯酚-硫酸法检测总多糖含量。结果：回归方程y=00209x + 00199，r = 09991;线性范围10～50μg/ml，测得样品含量均值369mg/100ml。结论：醇沉提取方法和苯酚-硫酸显色的含量测定方法操作简便易行，可作为该配方质量的检测方法。

【关键词】保健品;总多糖;含量

【中图分类号】R286【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517（2014）07-0026-01

Abstract：

Keywords：

以药食两用、保健中药为原料研制保健食品，配方中原料药的主要成分包括皂苷和多糖等多种化合物，多糖不仅是一类非特异性免疫增强剂而且有降血糖、降血脂、降血清过氧化脂质和降低胆固醇浓度、抗血凝、抗癌等作用[1]。总多糖通常作为增强免疫力、抗疲劳的功能性指标成分[2]。本文利用多糖溶于水，不溶于醇的特点，将样品中多糖经乙醇沉淀分离后，以D-葡萄糖为标准，通过苯酚-硫酸法测定其含量[3]。

1仪器与试剂

UV-1800紫外可见分光光度计（上海美谱达仪器有限公司），数显恒温水浴锅，台式离心机。D-无水葡萄糖（中国药品生物制品鉴定所），浓硫酸、苯酚、无水乙醇等试剂均为分析纯;水为超纯水。

2方法与结果

21试样处理精密吸取50ml样品于50ml离心管中，加适量无水乙醇，混匀，使样品中乙醇的终浓度为90%，4℃静置1h，于4000r/min离心10min，弃去上清液。这样分多次收集沉淀。沉淀物用适量乙醇洗涤至无色。以4000r/min离心10min，弃去上清液，沉淀加热除去乙醇，用水溶解，定容于100ml容量瓶中，摇匀，作为供试溶液。

22标准曲线的制备精密称取干燥恒重的无水葡萄糖对照品10mg，加水溶解，定容到10ml，得10mg/ml的葡萄糖对照品贮备液。精密吸取对照品贮备液02、03、04、05、06、08ml，置10ml具塞试管中，分别向各管内加水使至体积为20ml，再依次向各试管加5%苯酚溶液10ml，摇匀，依次迅速加入浓硫酸50ml，摇匀;以水作为空白，于分光光度计490nm波长处测定吸光度，以葡萄糖浓度（mg/ml）为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线。回归方程y=00209x + 00199，r=09991。

23样品测定精密吸取供试溶液20ml，置于具塞试管中，按“22项”方法测定吸光度，计算供试溶液浓度。

24计算

X=C×V×100M×100

式中X-样品中总多糖含量以无水葡萄糖计，g/100ml;C-由回归方程计算得供试溶液浓度，mg/ml;V-供试溶液定容体积，ml;M-样品取样体积，ml。

表1多糖含量测定结果

序号吸光度浓度mg/ml多糖含量

mg/100ml平均值10627 0020 407 20590 0019 382 30575 0019 372 40619 0020 401 50538 0017 347 60473 0015 304 369

3討论

31文献表明蛋白质对多糖的测定影响并不大，而增加去蛋白步骤会造成多糖的进一步损失。因此，本方法建立中未考虑去蛋白步骤[4]。

32醇沉的提取方法和以苯酚-硫酸显色的含量测定方法，操作简便易行，检测数据真实、可靠，可作为该配方质量的检测方法。参考文献

[1] Wensheng Pang，Siding Lin，Juan Hu.Antitussive Activity of Pseudostellaria heterophylla Pax Extracts and Improvement in Lung Function via Adjustment of Multicytokine Levels[J].Molecules 2011，16（11）：3360-3370.

[2] 于村.保健食品中多糖测定的研究[J].中国卫生检验杂志，2000，10（3）：281-282.

[3] 邬卫东，张晓文.硫酸-苯酚法测定枸杞胶囊中多糖的含量[J].内蒙古中医药，2003，22（6）：39-39.

[4] 赵宁，问亚琴，潘秋红.苯酚-硫酸法测定干红葡萄酒中的多糖含量[J].中外葡萄与葡萄酒，2011，35（5）：9-12.

（收稿日期：20140121）