HPLC法测定祛风湿中成药中的糖皮质激素

吴立蓉+高卫东

【摘 要】 目的：建立高效液相色谱法测定祛风湿中成药中曲安西龙、氢化可的松和地塞米松的分析方法。方法：样品以甲醇进行超声提取，以ODS色谱柱分离，流动相为乙腈：水（40∶60）;流速为1.0ml/min;检测波长为241nm;柱温为40℃。结果：各糖皮质激素成分在2.75～44.00μg/ml范围内呈线性关系，r=0.9999，平均回收率为98.34%～98.41%。结论：本方法简便准确，重现性好，可用于祛风湿中成药中曲安西龙、氢化可的松和地塞米松3种糖皮质激素的检测。

【关键词】 高效液相色谱法;糖皮质激素

【中图分类号】R284.1 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517（2014）13-0015-01

在中成药中擅自添加西药成分，并随意夸大疗效，高价牟取暴利，为了打击这种非法行为，本文建立了同时快速测定祛风湿中成药中3种糖皮质激素的高效液相法色谱法，方法准确、简便，可应用于祛风湿中成药的实际检验工作。

1 仪器与试药

1.1 仪器 Shimadzu LC-20AT 型高效液相色谱仪（日本），包括SIL自动进样器、CTO柱温箱、SPD二极管阵列检测器;AE-240电子分析天平（瑞士Mettler）。

1.2 试药 曲安西龙（批号100333-200201）、氢化可的松（批号100152-200206）地塞米松（批号100129-200804）均购于中国药品生物制品检定所。甲醇、乙腈为色谱纯（德国Merck）;水为超纯水（韩国 Power Iplus 超纯水系统）;其余试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件[1、2] 色谱柱：LUBEX Kromasil C18（250mm×4.6mm，5μm）;流动相为乙腈∶水=40∶60，检测波长：241nm;流速：1.0ml/min;柱温：40℃;进样量：10μl。

2.2 标准溶液的配制 精密称取曲安西龙、地塞米松和氢化可的松适量，用甲醇溶解并稀释成浓度约为55μg/ml的标准母液。将此母液稀释成标准系列浓度分别为2.75、5.50、11.00、22.00、44.00μg/ml的使用溶液。

2.3 样品溶液的制备 取样品细粉约1g，精密称定，置具塞三角瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，称定重量，超声处理30min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减少的重量，摇匀，滤过。取续滤液入离心管中，于10000r/min转速下离心10min，取离心后的上清液，经0.45μm微孔滤膜过滤，滤液作为供试品溶液待测。

2.4 线性关系及检测限 使用“2.2项”中配制好的标准溶液进行上机分析，以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标，得到各个组分的标准曲线及相关系数。具体见表1。

2.5 检出限和定量限 以信噪比为3∶1时成分的量确定检出限，以信噪比10∶1时成分的量确定定量限，各种糖皮质激素的最低检测限2.7～5.8ng，最低定量限为5.4～17.3ng。具体见表1。

2.6 精密度试验 精密吸取浓度约为11.0μg/ml的混合标准溶液10μl重复进样6次，计算各激素峰面积的RSD为0.11%～0.57%，表明精密度良好。

2.7 稳定性试验 取同一浓度的混合标准溶液，分别于0、1、2，4、8h进样，测定三种成分的峰面积，RSD分别为0.74%、1.05%和0.89%，结果表明溶液在8h内稳定。

2.8 回收率试验 称取试样1g至50ml容量瓶中，平行6份，分别加入5ml 8.0μg/ml的混合标准溶液，按照样品处理方法制备待测溶液。回收率分别为曲安西龙98.41%，RSD=0.69%;氢化可的松98.41%，RSD=0.67%;地塞米松98.34%，RSD=0.72%。

2.9 样品分析 按本方法对祛风湿类中成药样品共15件进行了分析测定。结果表明，样品中有3件样品都含有部分上述成分，阳性检出率为20%。

3 结论

本文所建立方法简便准确，重现性好，可在15min内快速检出，可很好的应用于祛风湿中成药中曲安西龙、氢化可的松和地塞米松3中糖皮质种激素的检测。实验中阳性样品检出率为20%，应引起相关监管部门的重视，加大查处力度。

参考文献

[1]陈秋虹.抗风湿类药酒中糖皮质激素的测定[J].时珍国医国药，2008，19 （5）：1153-1154.

[2]刘金燕，赵春杰，王超众.抗风湿类中成药中添加糖皮质激素的检测[J].中国药品标准，2008，9（6）：424-427.

（收稿日期：2014.05.06）endprint

【摘 要】 目的：建立高效液相色谱法测定祛风湿中成药中曲安西龙、氢化可的松和地塞米松的分析方法。方法：样品以甲醇进行超声提取，以ODS色谱柱分离，流动相为乙腈：水（40∶60）;流速为1.0ml/min;检测波长为241nm;柱温为40℃。结果：各糖皮质激素成分在2.75～44.00μg/ml范围内呈线性关系，r=0.9999，平均回收率为98.34%～98.41%。结论：本方法简便准确，重现性好，可用于祛风湿中成药中曲安西龙、氢化可的松和地塞米松3种糖皮质激素的检测。

【关键词】 高效液相色谱法;糖皮质激素

【中图分类号】R284.1 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517（2014）13-0015-01

在中成药中擅自添加西药成分，并随意夸大疗效，高价牟取暴利，为了打击这种非法行为，本文建立了同时快速测定祛风湿中成药中3种糖皮质激素的高效液相法色谱法，方法准确、简便，可应用于祛风湿中成药的实际检验工作。

1 仪器与试药

1.1 仪器 Shimadzu LC-20AT 型高效液相色谱仪（日本），包括SIL自动进样器、CTO柱温箱、SPD二极管阵列检测器;AE-240电子分析天平（瑞士Mettler）。

1.2 试药 曲安西龙（批号100333-200201）、氢化可的松（批号100152-200206）地塞米松（批号100129-200804）均购于中国药品生物制品检定所。甲醇、乙腈为色谱纯（德国Merck）;水为超纯水（韩国 Power Iplus 超纯水系统）;其余试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件[1、2] 色谱柱：LUBEX Kromasil C18（250mm×4.6mm，5μm）;流动相为乙腈∶水=40∶60，检测波长：241nm;流速：1.0ml/min;柱温：40℃;进样量：10μl。

2.2 标准溶液的配制 精密称取曲安西龙、地塞米松和氢化可的松适量，用甲醇溶解并稀释成浓度约为55μg/ml的标准母液。将此母液稀释成标准系列浓度分别为2.75、5.50、11.00、22.00、44.00μg/ml的使用溶液。

2.3 样品溶液的制备 取样品细粉约1g，精密称定，置具塞三角瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，称定重量，超声处理30min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减少的重量，摇匀，滤过。取续滤液入离心管中，于10000r/min转速下离心10min，取离心后的上清液，经0.45μm微孔滤膜过滤，滤液作为供试品溶液待测。

2.4 线性关系及检测限 使用“2.2项”中配制好的标准溶液进行上机分析，以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标，得到各个组分的标准曲线及相关系数。具体见表1。

2.5 检出限和定量限 以信噪比为3∶1时成分的量确定检出限，以信噪比10∶1时成分的量确定定量限，各种糖皮质激素的最低检测限2.7～5.8ng，最低定量限为5.4～17.3ng。具体见表1。

2.6 精密度试验 精密吸取浓度约为11.0μg/ml的混合标准溶液10μl重复进样6次，计算各激素峰面积的RSD为0.11%～0.57%，表明精密度良好。

2.7 稳定性试验 取同一浓度的混合标准溶液，分别于0、1、2，4、8h进样，测定三种成分的峰面积，RSD分别为0.74%、1.05%和0.89%，结果表明溶液在8h内稳定。

2.8 回收率试验 称取试样1g至50ml容量瓶中，平行6份，分别加入5ml 8.0μg/ml的混合标准溶液，按照样品处理方法制备待测溶液。回收率分别为曲安西龙98.41%，RSD=0.69%;氢化可的松98.41%，RSD=0.67%;地塞米松98.34%，RSD=0.72%。

2.9 样品分析 按本方法对祛风湿类中成药样品共15件进行了分析测定。结果表明，样品中有3件样品都含有部分上述成分，阳性检出率为20%。

3 结论

本文所建立方法简便准确，重现性好，可在15min内快速检出，可很好的应用于祛风湿中成药中曲安西龙、氢化可的松和地塞米松3中糖皮质种激素的检测。实验中阳性样品检出率为20%，应引起相关监管部门的重视，加大查处力度。

参考文献

[1]陈秋虹.抗风湿类药酒中糖皮质激素的测定[J].时珍国医国药，2008，19 （5）：1153-1154.

[2]刘金燕，赵春杰，王超众.抗风湿类中成药中添加糖皮质激素的检测[J].中国药品标准，2008，9（6）：424-427.

（收稿日期：2014.05.06）endprint

【摘 要】 目的：建立高效液相色谱法测定祛风湿中成药中曲安西龙、氢化可的松和地塞米松的分析方法。方法：样品以甲醇进行超声提取，以ODS色谱柱分离，流动相为乙腈：水（40∶60）;流速为1.0ml/min;检测波长为241nm;柱温为40℃。结果：各糖皮质激素成分在2.75～44.00μg/ml范围内呈线性关系，r=0.9999，平均回收率为98.34%～98.41%。结论：本方法简便准确，重现性好，可用于祛风湿中成药中曲安西龙、氢化可的松和地塞米松3种糖皮质激素的检测。

【关键词】 高效液相色谱法;糖皮质激素

【中图分类号】R284.1 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517（2014）13-0015-01

在中成药中擅自添加西药成分，并随意夸大疗效，高价牟取暴利，为了打击这种非法行为，本文建立了同时快速测定祛风湿中成药中3种糖皮质激素的高效液相法色谱法，方法准确、简便，可应用于祛风湿中成药的实际检验工作。

1 仪器与试药

1.1 仪器 Shimadzu LC-20AT 型高效液相色谱仪（日本），包括SIL自动进样器、CTO柱温箱、SPD二极管阵列检测器;AE-240电子分析天平（瑞士Mettler）。

1.2 试药 曲安西龙（批号100333-200201）、氢化可的松（批号100152-200206）地塞米松（批号100129-200804）均购于中国药品生物制品检定所。甲醇、乙腈为色谱纯（德国Merck）;水为超纯水（韩国 Power Iplus 超纯水系统）;其余试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件[1、2] 色谱柱：LUBEX Kromasil C18（250mm×4.6mm，5μm）;流动相为乙腈∶水=40∶60，检测波长：241nm;流速：1.0ml/min;柱温：40℃;进样量：10μl。

2.2 标准溶液的配制 精密称取曲安西龙、地塞米松和氢化可的松适量，用甲醇溶解并稀释成浓度约为55μg/ml的标准母液。将此母液稀释成标准系列浓度分别为2.75、5.50、11.00、22.00、44.00μg/ml的使用溶液。

2.3 样品溶液的制备 取样品细粉约1g，精密称定，置具塞三角瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，称定重量，超声处理30min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减少的重量，摇匀，滤过。取续滤液入离心管中，于10000r/min转速下离心10min，取离心后的上清液，经0.45μm微孔滤膜过滤，滤液作为供试品溶液待测。

2.4 线性关系及检测限 使用“2.2项”中配制好的标准溶液进行上机分析，以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标，得到各个组分的标准曲线及相关系数。具体见表1。

2.5 检出限和定量限 以信噪比为3∶1时成分的量确定检出限，以信噪比10∶1时成分的量确定定量限，各种糖皮质激素的最低检测限2.7～5.8ng，最低定量限为5.4～17.3ng。具体见表1。

2.6 精密度试验 精密吸取浓度约为11.0μg/ml的混合标准溶液10μl重复进样6次，计算各激素峰面积的RSD为0.11%～0.57%，表明精密度良好。

2.7 稳定性试验 取同一浓度的混合标准溶液，分别于0、1、2，4、8h进样，测定三种成分的峰面积，RSD分别为0.74%、1.05%和0.89%，结果表明溶液在8h内稳定。

2.8 回收率试验 称取试样1g至50ml容量瓶中，平行6份，分别加入5ml 8.0μg/ml的混合标准溶液，按照样品处理方法制备待测溶液。回收率分别为曲安西龙98.41%，RSD=0.69%;氢化可的松98.41%，RSD=0.67%;地塞米松98.34%，RSD=0.72%。

2.9 样品分析 按本方法对祛风湿类中成药样品共15件进行了分析测定。结果表明，样品中有3件样品都含有部分上述成分，阳性检出率为20%。

3 结论

本文所建立方法简便准确，重现性好，可在15min内快速检出，可很好的应用于祛风湿中成药中曲安西龙、氢化可的松和地塞米松3中糖皮质种激素的检测。实验中阳性样品检出率为20%，应引起相关监管部门的重视，加大查处力度。

参考文献

[1]陈秋虹.抗风湿类药酒中糖皮质激素的测定[J].时珍国医国药，2008，19 （5）：1153-1154.

[2]刘金燕，赵春杰，王超众.抗风湿类中成药中添加糖皮质激素的检测[J].中国药品标准，2008，9（6）：424-427.

（收稿日期：2014.05.06）endprint