1,25二羟基维生素D3与冠状动脉钙化积分的相关性及临床诊断价值研究*

冯勤颖，左 丽，许 健，黄 山，曾庆娜，张春阳，陈 洁，田 禾，刘志琴,王荣品

(1.贵州省人民医院贵州省临床检验中心 550002；2.贵阳医学院基础医学院,贵阳 550002)

·经验交流·

1,25二羟基维生素D3与冠状动脉钙化积分的相关性及临床诊断价值研究*

冯勤颖1,2，左 丽2△，许 健1，黄 山1，曾庆娜2，张春阳2，陈 洁1，田 禾1，刘志琴1,王荣品1

(1.贵州省人民医院贵州省临床检验中心 550002；2.贵阳医学院基础医学院,贵阳 550002)

目的探讨1,25二羟基维生素D3[1,25(OH)2D3]与冠状动脉钙化积分的关系及其临床诊断价值。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测健康人和冠状动脉不同钙化积分冠心病患者血清中1,25(OH)2D3水平，并进行统计分析，绘制ROC曲线分析其诊断性能。结果1,25(OH)2D3在对照组与不同钙化积分疾病组之间、以及对照组与疾病组之间其血清水平浓度差异显著，疾病组血清中1,25(OH)2D3含量明显下降；钙化积分与1,25(OH)2D3呈负相关(P<0.05)；ROC曲线显示1,25(OH)2D3曲线下面积为0.616，诊断阈值为70.77 pg/mL，诊断灵敏度为48.50%，特异性为95.80%，约登指数为0.43。结论1,25(OH)2D3在对照组和疾病组中表达不同，与钙化积分呈负相关，对冠心病诊断价值明显，可以为动脉粥样硬化的预防和治疗提供一种新的策略。

1,25二羟基维生素D3;冠心病;冠状动脉钙化

冠心病是一种严重威胁人类的健康的常见病和多发病。冠心病的早期诊断和治疗，对预防急性心脏事件，提高生活质量有着重要的意义。现阶段，随着CT技术的发展，越来越多的人开始接受无创的CT冠状动脉造影检查，而同时进行的钙化积分的评价对于冠心病的诊断十分有意义，冠状动脉钙化积分可作为临床评价冠心病的有效指标之一，已经应用于临床，成为诊断冠心病的一项重要指标[1]。1,25二羟维生素D3[1,25-(OH)2-vitamin D3，1,25(OH)2D3]是维生素D3在肝脏和肾脏羟化酶作用下转化的活性形式[2]，属于第二甾体类，是调节机体钙磷代谢的重要激素，在心血管系统中具有重要作用，临床研究发现1,25(OH)2D3缺乏可使罹患高血压、冠心病及心功能不全危险性增加。本文通过对健康人群和冠心病患者血清中1,25(OH)2D3进行检测，探讨其与冠状动脉钙化积分的关系，以便进一步研究其预测动脉钙化的价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料 疾病组70例，均来自2013年10月至2014年4月在贵州省人民医院心内科住院的冠心病患者，其中男39例，女31例，年龄40～85岁，平均(63.4±8.7)岁。健康对照组50例，均来自同期本院体检科体检正常的健康人群，年龄48～80岁，平均(62.2±7.5)岁，其中男22例，女28例。疾病组诊断符合《内科学》(第7版)关于冠心病的诊断标准；近期(<2周)接受双源CT冠状动脉成像检查，同时排除肾功能不全(血肌酐大于180 μmol/L和肾小球滤过率小于90 mL/min)、肝功能不全(丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶分别高于正常参考值上限2倍)、血液透析患者、心肌病、瓣膜疾病、感染性疾病、血液系统疾病、恶性肿瘤、结核、甲状腺疾病、糖尿病等疾病。收集两组基线临床资料，空腹采集静脉血4 mL，放入分离试管内，分离血清待检。

1.2 仪器与试剂 DNM-9602G 型酶标仪和DNX-9620型洗板机，均为北京普朗公司产品；奥林巴斯AU2700全自动生化分析仪及配套试剂；1,25(OH)2D3酶联免疫吸附试剂盒，上海瓦兰生物技术有限公司产品；双源Somatom Definition CT，德国西门子公司产品。

1.3 方法 严格按照试剂盒说明书要求操作，进行1,25-(OH)2D3和相关基线临床项目检测。

1.4 冠状动脉钙化积分(CACS)计算 钙化积分由钙化面积、体积和血管分布等因素决定，采用Agatston等[3]及其修正方法进行计算，钙化灶条件为：CT值大于130 Hu、钙化面积大于1 mm2，钙化积分=钙化灶CT峰值×钙化面积，130～199 Hu记为1分，200～299 Hu记为2分，300～399 Hu记为3分，≥400 Hu记为4分。一支血管的钙化总积分为该支血管各钙化灶积分的总和，冠状动脉主要分支包括左主干、左前降支、左回旋支、右冠状动脉等，该过程由Smartscore(智能积分)软件参与完成。同时，参考美国心脏病学会基金会(ACCF)与美国心脏协会(AHA)关于CT检测冠状动脉钙化积分在心血管整体危险性评估以及胸痛患者的评估中应用的专家共识[4]，又考虑到本次试验对象不多的特点，将疾病组按积分多少分为3组，0～10分为轻度组，11～400分为中度组，>400分为重度组。

2 结 果

2.1 对照组和疾病组一般临床资料比较 对照组及疾病组患者在钙磷代谢方面差异具有统计学意义(P<0.05)，其余基本资料如人口学特征、肝肾功能及血脂等情况未见明显差异(表1)。

表1 对照组和疾病组基线临床资料

2.2 对照组和不同钙化积分疾病组之间血清1,25(OH)2D3水平比较 对照组与不同钙化积分组之间，以及不同积分疾病组间1,25(OH)2D3 检测结果比较见表2。经统计分析，对照组与重度组比较，1,25(OH)2D3水平差异有统计学意义。

表2 对照组与不同钙化积分疾病组之间血清1,25(OH)2D3水平比较(pg/mL)

2.3 对照组与疾病组血清1,25(OH)2D3水平比较 为了评价1,25(OH)2D3对冠心病的诊断价值，本研究将70例疾病组患者血清1,25(OH)2D3水平合并计算，并与对照组相比较，经统计分析，疾病组血清1,25(OH)2D3水平与对照组比较，差异有统计学意义(t=2.87,P<0.05)，对照组血清中1,25(OH)2D3含量较高。

2.4 1,25(OH)2D3对冠心病的诊断价值评价 根据对照组和疾病组的检查结果对1,25(OH)2D3绘制ROC曲线(图1)，计算ROC曲线下面积(AUC)，1,25(OH)2D对冠状动脉钙化的诊断价值为曲线下面积0.616，阈值70.77 pg/mL；检测冠脉钙化积分的敏感度为48.50%，特异度为95.80%，约登指数为0.430。由此可见，1,25(OH)2D3对心病患者诊断价值明显，特别是在特异性判断方面。

2.5 钙化积分(CACS)与1,25(OH)2D3血清水平的相关性分析 经Spearman相关分析显示，钙化积分与1,25(OH)2D3呈负相关(r=-0.362，P=0.03)。

图1 1,25(OH)2D3诊断冠脉钙化的ROC曲线

3 讨 论

冠状动脉粥样硬化亚临床的重要标志就是动脉钙化的存在[5]。用CT技术测定钙化积分是一种无创、安全、有效的预测心血管事件的方法。但是，CT技术存在成本高、动态观测较难等问题。冠状动脉粥样硬化与钙化有着密不可分的内在联系，动脉粥样硬化病变主要在动脉内膜,早期病理表现为脂质沉着，随着平滑肌细胞逐渐增生、纤维组织沉积，动脉内膜发生局灶性增厚，并形成向管腔内突出的纤维斑块。纤维斑块伴随血栓、出血和钙化称为复合斑块[6]。在这个过程中，一个与骨发育相似的主动的、高度可调控的多病因、多途径、多种机制参与的复杂生物学过程，可使钙复合颗粒的形成，并主要沉积在粥样瘤深部，使斑块变硬、变脆，容易碎裂，从而导致局部出血及血栓形成，并使斑块扩大。在CAC的形成过程中，既与冠状动脉粥样硬化斑块的形成相关，也与斑块与新骨形成极为相似的受调控的主动性代谢过程相关。

作为脂溶性甾体激素的前体物质，维生素D的主要作用是维持体内血清钙磷浓度的稳定。近年来研究[7-8]表明：维生素D缺乏会导致心血管疾病(如冠心病等)的发病率增加。维生素D缺乏导致冠心病发病率增加的原因尚不明确，但是促进冠状动脉钙化是其可能的原因之一。心血管疾病冠与状动脉钙化有着密切的关系，血管钙化是与心血管疾病密切相关的病理改变，可明显增加各种心血管事件的发生率[9]。通常冠状动脉钙化积分越高，冠状动脉动脉的狭窄程度也越严重。冠状动脉积分可以用来预测未来心血管事件的发生率，冠状动脉钙化积分也是全因死亡的独立预测因子。因此，1,25(OH)2D3作为维生素D3的活性形式，明确它与冠状动脉钙化的关系，对心血管疾病的防治具有非常重要的意义。

在本研究中，1,25(OH)2D3在对照组与重度组之间其血清水平差异显著，疾病组血清中1,25(OH)2D3含量明显低于对照组，而且钙化积分与1,25(OH)2D3呈负相关。这些研究结论，都提示了1,25(OH)2D3不足可能促进了冠状动脉钙化的发生，而且呈进行性改变。低水平1,25(OH)2D3导致冠状动脉钙化的机制可能是：维生素D能够降低动脉血管壁炎症激活因子核因子κB的活性、抑制巨噬细胞对胆固醇的吞噬、减少泡沫细胞形成[10]。RASS系统活性和血管平滑肌细胞钙离子的流量可能受维生素D调控，在维生素D缺乏时，上述调控功能减低，导致动脉血管壁巨噬细胞增加对胆固醇的吞噬，泡沫细胞增加，肾素血管紧张素系统(RAS)活性增加，钙离子在平滑肌细胞中沉积，导致血管硬化和钙化[11]。另外，一些已知的导致动脉硬化的疾病，包括高血压、脂代谢紊乱、糖尿病等，可以直接或间接导致动脉硬化钙化发生，而维生素D缺乏会导致这些疾病的发病率增加，这也是维生素D缺乏的危险因素所在。

动脉粥样硬化及钙化是一种与多种因素相互关联的慢性炎症过程，包括脂质代谢紊乱、氧化应激、炎症因子、矿物质及激素失衡均可导致动脉壁上类成骨细胞形成，从而导致动脉钙化发生。同时，动脉钙化相关调节因子还有很多，部分因子的作用机制尚不清楚[12]，但是，关注并重视1,25(OH)2D3在动脉钙化斑块形成过程中的重要作用，加强相关的研究，有利于预测和缓解粥样硬化病变的发生发展;为新型抗动脉粥样硬化药物提供新的可能的作用靶点。同时，提醒广大医务工作者，除了关注传统意义上冠状动脉硬化危险因素外，还需要关注其他可能的危险因素，如维生素D的缺乏，从而更好地控制动脉硬化的发生，减少心血管疾病的发病率。

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10.3969/j.issn.1671-8348.2015.26.024

贵州省省长资金临床应用课题专项研究项目[黔省专合字(2012)117号];贵州省卫生厅科学技术基金项目(gzwkj2012-1-062)。

：冯勤颖(1984-)，硕士，主管检验师，主要从事医学检验方面的研究。△

，E-mail:zuoligymc@163.com。

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1671-8348(2015)26-3675-03

2015-04-08

2015-06-23)