益心通络胶囊对大鼠实验性血栓及血清血脂、IL-8、CRP、TXA2、6-keto-PGF1α的影响

张新元

益心通络胶囊对大鼠实验性血栓及血清血脂、IL-8、CRP、TXA2、6-keto-PGF1α的影响

张新元

目的 观察益心通络胶囊对大鼠血栓及血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、白细胞介素-8(IL-8)、C反应蛋白(CRP)、血栓素A2(TXA2)和6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)的影响。方法 将Wistar大鼠随机分为空白对照组、阳性对照组及益心通络胶囊高、中、低剂量组，每组20只；空白对照组以生理盐水灌胃，阳性对照组以复方丹参片灌胃，益心通络胶囊高、中、低剂量组以益心通络胶囊灌胃，剂量分别为6 g/kg、3 g/kg和0.6 g/kg，连续灌胃7 d；然后观察每组大鼠实验性血栓情况及血清TG、TC、IL-8、CRP、TXA2、6-keto-PGF1α的变化。结果 益心通络高剂量组、阳性对照组大鼠血栓湿重、TC、IL-8、CRP、TXA2与空白对照组相比显著降低(P<0.05或P<0.01)，6-keto-PGF1α较空白对照组升高(P<0.05)，益心通络胶囊低剂量组大鼠血栓湿重与空白对照组相比显著降低(P<0.05)， 益心通络胶囊中剂量组大鼠血栓湿重、TXA2与空白对照组相比显著降低(P<0.05)，6-keto-PGF1α较空白对照组升高(P<0.05)。结论 益心通络胶囊对实验性大鼠血栓形成具有良好的抑制作用，以中、高剂量为著。益心通络胶囊高剂量可降低大鼠血脂中TC水平，中、低剂量无作用。 益心通络胶囊高剂量可降低血清IL-8和CRP含量，以降低CRP为显著。益心通络胶囊中、高剂量对TXA2和6-keto-PGF1α具有调节作用，以高剂量为著。

实验性血栓形成；益气通络胶囊；血脂；白细胞介素-8；C反应蛋白；血栓素A2

益心通络胶囊是我院多年潜心研制的中成药，以益气活血化痰为组方大法，不仅能改善冠脉支架术后患者胸闷、胸痛等不适症状，有效提高患者生活质量，而且对防治支架内再狭窄(ISA)具有确切的疗效。本研究拟观察益心通络胶囊对大鼠血栓及血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、白细胞介素-8(IL-8)、C反应蛋白(CRP)、血栓素A2(TXA2)和6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)的影响，为临床使用益心通络胶囊治疗ISR提供依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 动物 Wistar种大鼠，体重150 g～200 g，雄性，购自山东大学医学院实验动物中心，动物合格证号：SCXK(鲁)20090001。

1.1.2 药品、试剂和仪器 益心通络胶囊和复方丹参片(阳性对照药物)由泰安市中医院提供。三酰甘油、胆固醇试剂盒购自北京北化康泰临床试剂有限公司；前列环素(PGI2)检测ELISA试剂盒为南京森贝伽生物科技有限公司产品；TXA2检测ELISA试剂盒上海博耀生物科技有限公司；CRP检测ELISA试剂盒为上海雅吉生物科技有限公司产品。美国Unico公司UN-2102C型紫外分光光度计，压力传感式全自动表观粘度型快测仪为重庆大学维多生物工程研究所生成，型号FASCO，美国BIO-RAD公司，model 680型酶标仪。

1.2 方法

1.2.1 分组和干预 选取Wistar大鼠，随机分为空白对照组、阳性对照组及益心通络胶囊高、中、低剂量组，每组20只大鼠，空白对照组以生理盐水灌胃，阳性对照组以复方丹参片灌胃，剂量为150 mg/kg，益心通络胶囊高、中、低剂量组以益心通络胶囊灌胃，剂量分别为6 g/kg、3 g/kg和0.6 g/kg，连续灌胃7 d。

1.2.2 对大鼠实验性血栓形成的影响 每组随机取大鼠10只进行实验性血栓形成检测。检测步骤：戊巴比妥30 mg/kg腹腔注射麻醉。背位固定，同时分离左颈外静脉和右颈总动脉，在内径为2 mm的聚乙烯管中放一根长7 cm的4号手术线，以肝素生理盐水50 U/mL充满三段相连接的聚乙烯管中，然后将该管的一端插入左颈外静脉，再经此管的另一端准确注入肝素50 U/kg抗凝，并将该管插入右颈总动脉中，立即放开动脉夹，准确记录血流15 min，终止血流，取出丝线称重，并按公式计算血栓生成抑制率。抑制率(%)=(对照组血栓湿重-给药组血栓湿重)/对照组血栓湿重×100%。

1.2.3 大鼠血清TG、TC、IL-8、CRP、TXA2、PGI2检测 各组随机取大鼠6只，取血清-20 ℃保存备用。大鼠血脂TG、TC检测：取血清，严格按照说明书检测，紫外分光光度计检测。ELISA方法检测IL-8、CRP、TXA2、6-keto-PGF1α步骤：取血清，严格按照说明书进行，采用酶标仪检测。

2 结 果

2.1 大鼠一般情况 在药物干预期间，各组大鼠饮食可，活动可，大小便可，没有出现不良反应，未出现饮食减少，无皮肤红肿，没有出现死亡现象。

2.2 益心通络胶囊对大鼠血栓形成的影响 益心通络胶囊对实验性血栓形成有很好的抑制作用，尤其是中、高剂量组，与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)，益心通络胶囊低、中、高剂量组血栓抑制率分别为15.09%、25.51%、47.41%，阳性对照组也具有良好的抑制作用，抑制率与益心通络胶囊中剂量组接近。详见表1。

表1 益心通络胶囊对大鼠血栓形成的影响

2.3 益心通络胶囊对大鼠血清血脂的影响 阳性对照组和益心通络胶囊高剂量组TC与空白对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)，显示益心通络胶囊有一定的降血脂作用。详见表2。

表2 益心通络胶囊对大鼠血脂的影响(±s) mmol/L

2.4 益心通络胶囊对大鼠血清IL-8、CRP含量的影响 干预后，益心通络胶囊低、中剂量组血清IL-8和CRP含量与空白对照组比较差异无统计学意义，仅阳性对照组和益心通络胶囊高剂量组与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)，详见表3。

表3 益心通络胶囊对大鼠血清IL-8、CRP含量的影响(x±s)

2.5 益心通络胶囊对大鼠血清TXA2和6-keto-PGF1α含量的影响 益心通络胶囊对TXA2和6-keto-PGF1α有很好的调节作用，尤其是高剂量组，与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)，但益心通络胶囊低剂量组与空白对照组比较差异无统计学意义。详见表4。

表4 益心通络胶囊对大鼠血清TXA2和6-keto-PGF1α含量的影响(x±s)

3 讨 论

冠心病是目前公认的全世界成人死亡的主要原因和致残的重要原因。经皮腔内冠状动脉支架植入术(PCI)作为冠心病的有效治疗手段，日益得到广泛应用。但是术后支架内再狭窄(in-stent restenosis，ISR)一直困扰着人们，据临床统计其发生率高达10%～50%，严重影响了远期疗效。目前普遍认为支架内再狭窄是血管对抗损伤的一种异常修复反应，表现为血栓的形成、内皮增生、血管重塑。支架内再狭窄的发生与血栓及血清TC、IL-8、CRP、TXA2和6-keto-PGF1α等因素有关。

益心通络胶囊由人参、丹参、瓜蒌、黄芪、川芎、半夏、茯苓、降香、枳壳、陈皮、薤白、麦冬组成，本方通补兼顾、辛散温通、行气血、通心脉、消痰瘀，补而不滞，通而不散，是益气通脉化痰的良方。本实验结果显示，益气通络胶囊中、高剂量组对实验性大鼠血栓形成具有良好的抑制作用；益气通络胶囊高剂量组能显著降低实验大鼠的血清IL-8和CRP含量，以降低CRP为显著；益气通络胶囊中、高剂量组对实验大鼠的TXA2和6-keto-PGF1α具有有效的调节作用。

现代药理研究认为，人参中的皂甙能扩张血管，使微循环得到改善，防止血液凝固，促进纤维蛋白溶解，对红细胞的聚集性有抑制性，改善血液的流动性；对心血管系统的作用：具有调节心脏机能，扩张血管，调整血压以及抗休克作用。现代医学发现丹参可阻止动脉粥样硬化形成过程中纤溶活性的降低，延缓和阻止动脉粥样硬化的形成。相关实验表明，适当剂量的瓜蒌能使豚鼠离体心脏收缩力有所加强，瓜蒌皮扩张冠脉的作用与其所含类生物碱有关，而其总氨基酸可能有祛痰作用而不是扩张冠脉作用[1]。黄芪不但有扩张冠状动脉、改善心肌血供、心肌代谢及缩小梗死面积的作用，还具有增强心肌收缩力和改善左心功能，影响血压、降低血液黏稠度及改善血液流变学指标的作用。现代药理学研究证实川芎具有抑制血管平滑肌细胞增殖，降低血小板黏附、聚集，防止血栓形成，保护血管内皮细胞等作用；还具有防治冠脉支架介入术后再狭窄的作用[2]。川芎水提液及其生物碱能扩张冠状动脉和血管，增加冠脉血流量，改善心肌缺氧状况。茯苓对心血管系统的作用主要表现在增强心肌收缩力，茯苓水浸膏还具有降血压作用。半夏有较明显的抗心律失常作用，其煎剂对犬室性心动过速及室性早搏有拮抗作用，另外，半夏还具有抑制心率和短暂的降压作用[3]。

本实验结果表明在抑制支架内狭窄形成过程中，益气通络胶囊不仅能抑制血栓形成，并且在一定程度上干预了内皮增生、血管重塑的过程。

[1] 上海市化工“七·二一”工人大学有机系中草药组.栝楼的研究Ⅳ，栝楼药理作用的初步研究[J].医药工业，1975(7)：17

[2] 杨雪梅．川芎嗪药理作用研究进展[J].中国生化药物，2010，31(3) ：215-216.

[3] 陈凌云，杨国祥.半夏药理研究概况[J].云南中医学院学报， 1997，20(4)：17-19.

(本文编辑 郭怀印)

山东省泰安市中医医院(山东泰安 271000)，E-mail：luzxy629@163.com

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10．3969/j．issn．1672-1349．2015．14．009

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