脑血疏口服液对急性脑梗死大鼠的神经保护作用

艾 鑫 ，刘 翠

脑血疏口服液对急性脑梗死大鼠的神经保护作用

艾 鑫 ，刘 翠

目的 研究脑血疏口服液对急性脑梗死大鼠神经保护作用及其机制。方法 90只SD大鼠随机分为脑梗死对照组、脑梗死干预组、假手术组。灌服10 d后根据改良Longa等方法制作大鼠左侧大脑中动脉阻塞模型。依照Longa FZ法对大鼠进行神经功能评分，后于相应时间点断头取脑，HE染色观察大鼠脑组织病理变化，检测大鼠脑组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量。结果 动物模型建立后2 h，脑梗死对照组大鼠神经行为学评分与假手术组比较明显增高，脑梗死干预组较脑梗死对照组明显降低(P<0．05)。脑梗死对照组可见明显缺血性形态学改变，脑梗死干预组较同期脑梗死对照组大鼠脑组织病理变化有较明显改善。大鼠脑组织中SOD含量随时间推移而逐渐降低，而MDA含量随时间推移而逐渐增加。且各时间点脑梗死对照组与假手术组、脑梗死干预组比较差异均有统计学意义(P<0．05)。假手术组与脑梗死干预组比较差异无统计学意义(P>0．05)。结论 脑血疏口服液能够改善大鼠急性脑梗死后神经功能缺损和脑组织结构，提高SOD活性，降低MDA含量，发挥拮抗自由基损伤作用，具有神经保护作用。

脑梗死；脑血疏口服液； 超氧化物歧化酶；丙二醛；神经保护作用；大鼠

脑梗死是严重威胁人类健康和生命的常见病、多发病。脑血疏口服液(国药准字220070059，国家中药保护品种)是根据“气为血之帅，血为气之母”的中医气血理论及长期临床经验研制的中药(2 类)新药，具有益气、活血、化瘀之功效[1]。本实验观察脑血疏口服液对大鼠脑梗死后脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量及动物苏醒后神经行为学评分、脑组织病理变化的影响，探讨脑血疏口服液对脑梗死后脑损伤的保护作用，为脑血疏口服液防治中枢神经系统缺血性损伤提供理论依据。

1 材料与方法

1．1 动物分组与给药方法 清洁级Sprague-Dawley(SD)大鼠90只，雄性，体重200 g～250 g，由西安交通大学动物中心提供，动物合格证号：SCXK(陕)2007-001。随机分为脑梗死对照组、脑梗死干预组、假手术组，每组30只大鼠。各组按动物模型建立后不同时间点分为3个亚组：6 h、12 h和24 h，每亚组10只大鼠。动物模型建立前10 d开始，每8 h灌服脑血疏口服液1 mL/kg，脑梗死对照组及假手术组只灌服等体积生理盐水。

1．2 动物模型的建立 根据改良Longa等[2]方法制作大鼠左侧大脑中动脉阻塞(MCAO)模型。颈部正中切开，暴露左侧颈总动脉(CCA)、颈外动脉(ECA)、颈内动脉(ICA)。 脑梗死对照组和脑梗死干预组采用线栓阻塞大脑中动脉24 h，模拟急性脑梗死。假手术组大鼠切开颈正中皮肤，分理出颈内动脉、颈外动脉，但不进行动脉夹闭及结扎。

1．3 大鼠神经行为学评分 依照Longa FZ五级评分法，动物模型建立后2 h对大鼠进行神经功能评分。

2 结 果

2．1 大鼠神经行为学评分 动物模型建立后2 h，脑梗死对照组大鼠神经行为学评分与假手术组比较明显增高，脑梗死干预组较脑梗死对照组明显降低(P<0．05)。详见表1。

组别n神经行为学评分假手术组100脑梗死对照组102.35±0.84脑梗死干预组101.74±0.971) 与脑梗死对照组比较,1)P<0.05。

2．2 大鼠脑组织病理变化 采用HE染色，光镜下观察，假手术组大鼠脑神经元细胞层次较多，结构排列致密，神经细胞形态完整，结构清晰，数目多，细胞无肿胀，核深染，核仁明显。脑梗死对照组大鼠脑组织皮层组织结构疏松呈筛网状，神经细胞数目减少，排列无规则，细胞肿胀明显，神经元脱失严重。且随时间推移，损伤程度较前加重。脑梗死干预组各时间点与脑梗死对照组比较，皮层组织结构相对致密，神经元脱失减少，神经细胞肿胀现象减轻，损伤均有不同程度的减轻。

2．3 大鼠脑组织SOD、MDA含量 动物模型建立后6 h，脑梗死对照组大鼠脑组织中SOD含量明显低于假手术组及脑梗死干预组。随时间推移，脑梗死对照组及脑梗死干预组大鼠脑组织中SOD含量进一步降低，且各时间点脑梗死对照组与假手术组、脑梗死干预组比较差异均有统计学意义(P<0．05)。假手术组与脑梗死干预组比较差异无统计学意义(P>0．05)。

各组大鼠脑组织中MDA含量变化趋势基本相同：随时间推移而逐渐增加。其中以脑梗死对照组增加最为明显。各时间点脑梗死对照组大鼠脑组织中MDA含量均高于假手术组及脑梗死干预组(P<0．05)，假手术组与脑梗死干预组比较差异无统计学意义(P>0．05)。详见表2。

组别 SOD(U/mg) 6h12h24h MDA(nmol/mg) 6h12h24h假手术组 311.61±23.171)320.84±19.241)299.55±26.821)11.98±4.031)12.59±1.571)12.03±3.981)脑梗死对照组223.79±21.56 201.34±18.52 178.13±14.37 15.25±2.92 18.13±3.86 21.45±3.50 脑梗死干预组289.52±31.731)279.12±25.791)265.49±20.451)12.86±3.201)13.89±2.271)14.85±3.411) 与脑梗死对照组比较,1)P<0.05。

3 讨 论

脑梗死患者多有动脉粥样硬化性基础病变，加之循环血液中纤维蛋白原、脂蛋白等含量增多，引起血液黏稠度增加，易导致血管内血栓形成。脑梗死是一个复杂的缺血性级联反应过程，严重缺血造成脑组织能量很快耗竭，细胞内钙超载，受钙离子调节的多种酶类被激活，引起磷脂分解和细胞骨架破坏，生成大量的自由基，导致细胞产生不可逆损伤，还包括转录因子的合成及炎性反应介质的产生等参与，脑梗死具体发病机制尚未完全阐明[3-5]。

目前国内外研究已证实，急性脑梗死与自由基的大量产生、自由基清除酶功能降低，以及脂质过氧化反应密切相关[6，7]。MDA是脂质过氧化反应的最终产物，SOD是体内重要的抗氧化酶，保护细胞免受损伤。乳酸含量和乳酸脱氢酶活力反映了细胞酸中毒水平，可间接反映细胞损伤程度。脑缺血时由于组织氧和能量代谢的物质供应不足，ATP生成减少，离子泵失效，Na+-K+-ATP酶活性的降低，使大量Na+内流、K+外流，Cl-和H2O被动进入细胞内，引起神经细胞急性渗透性肿胀死亡。

脑血疏口服液的成分主要包括黄芪、水蛭、石菖蒲、牛膝、牡丹皮、大黄、川芎等，近年针对脑血疏口服液方剂中主要成分黄芪、水蛭、川芎等有较多的研究。黄芪含有黄芪皂苷、黄酮、多种氨基酸和微量元素，具有益气活血，抗脂质过氧化和消除氧自由基，扩张冠状动脉血管，增加血流量，防止血栓形成，增强纤维蛋白溶解活性[8]，组方重用黄芪旨在补气升阳，达到气行则血行之功效。上述研究从药理学角度为脑血疏口服液治疗脑出血提供了理论依据。

水蛭主要含蛋白质、多种氨基酸、微量元素和水蛭素。其中水蛭素是目前最有效的凝血酶特异抑制剂，其含有的多种生物活性成分，具有抗凝、抗血栓、抗炎、抗肿瘤、抗纤维化、脑保护等多种药理药效作用[9]。抗凝是水蛭活性组分的主要作用，有研究通过体内外抗凝血指标测定，证实水蛭中的抗凝血活性组分及作用[10，11]。认为其提取物所含的游离氨基酸可能是其抗凝血作用的有效成分[12]。活性组分作用于凝血过程，抑制凝血酶及纤维蛋白溶酶，阻断凝血反应的进行，达到抗凝作用。川芎可以透过血脑屏障，解除肾上腺素引起的血管平滑肌痉挛，扩张血管，改善微循环，增加血流速度，降低血液黏度，改善血液微循环和供血不足[13]。

本研究结果表明，脑血疏口服液能明显降低MDA含量，提高SOD活性，发挥拮抗自由基损伤作用，这可能是脑血疏口服液抗脑缺血损伤的作用机制之一。

使用脑血疏口服液可以通过抗凝、溶栓和脑保护多个方面治疗脑梗死，具有良好效果，是治疗脑梗死较理想的药物。

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(本文编辑 王雅洁)

延安大学附属医院(陕西延安 716000)，E-mail：puxjtuns@126．com

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10．3969/j．issn．1672-1349．2015．11．011

1672-1349(2015)11-1278-03

2015-06-14)