浅谈生活饮用水中微生物检验

王静

摘要]：在我们的生活饮用水当中，人们越来越关注饮用水的健康。因此，在饮用水检测中做好生活饮用水微生物的实验室检验工作十分重要。 从目前的现状来看，微生物实验室检验虽属于生活饮用水水质检测中的一项重要内容，但在实际的微生物实验室检验过程中还是存在一些的质量问题，这对生活饮用水微生物实验室检验结果也造成了严重的影响。 基于以上的因素考虑，于生活饮用水微生物实验室检验中，采取有效的措施加强对微生物实验质量的控制，便也就显得尤为重要。

[关键词] 生活饮用水;微生物检验

中图分类号：C35文献标识码： A

前言：生活饮用水微生物实验室检验对人们的饮水安全有着极为重要的作用，通过科学、有效的微生物实验室检验方法，可保证水源的水质合格、水处理达标。但是，在生活饮用水微生物实验室检验过程中，若存在不合理之处，则会一定程度地影响微生物实验质量，进而也容易造成实验结果误差，无法给生活饮用水的安全提供有力的保障。 因此，本文就主要对我国的生活饮用水微生物实验室检验的概述进行阐述，并具体分析在生活饮用水微生物实验室检验中，对检验质量控制的重要性，再详细论述对生活饮用水微生物实验质量控制的几点有效、可行性措施，以供相关的生活饮用水微生物实验室检测人员参考所用。

1 、生活饮用水微生物检验的阐述

生活饮用水微生物实验室检验主要是指为了保证人们的饮水安全，对经过沉淀、过滤、加氯消毒等一系列处理后的饮用水进行的 一 项 微 生物 检 验 方法 。 根据我国生活饮用水水质标准（GB5749-85）中的规定 ，其饮用水中的微生物含量不得超过如下数字：总大肠菌群≤3 个/L，细菌总数≤100 个/mL，粪大肠菌群于100mL 水样中不得检出等等。 目前常见的生活饮用水微生物实验室检验方法包括有：滤膜法、酶底物法、多管发酵法、平皿计数法等，在实际的生活饮用水微生物检验中，检验人员根据微生物类型的不同，所选择的实验室检验方法也会有所不同。 而生活饮用水微生物的实验室检验步骤大多如下。

①样本采集。 具有代表性的采集需要检验的生活饮用水水样，采集过程中必需注意无菌操作，保证水样在采集、运送、储存等全过程中不会受到任何的污染，且要保证采集的水样能够在采集后的 4 h 之内进行检验，以免其因置放时间过长而发生变化或污染。②实验室检验。根据所要检验的水中微生物类型的不同，选择最适宜、最准确、最科学的实验室检验方法。 例如，在检验总大肠菌群指数时，可选择多管发酵法；在检验细菌总数时，可选择平皿计数法。 实验室检验人员还需根据所采集水样的实际情况、检验环境、检验要求与标准等灵活地进行变通，以保证生活饮用水微生物实验室检验结果的准确性与实用性。 ③结果分析。 通过对生活饮用水中各种微生物及时、有效的实验室检验结果分析，便可得知饮用水中微生物的实际情况，这对早期处理或控制微生物超标或含有致病性微生物的生活饮用水带来的十分积极的作用。

2 、生活饮用水微生物实验质量控制的重要性

从实际的情况来看，由于处理过后的生活饮用水未能达到处理标准，或是由于其供水管道破损、二次供水污染等原因导致水质不洁时，容易造成水中微生物超标，甚至出现致病性微生物，这也显得对生活饮用水微生物进行实验室检验很有必要。由于近年来水质的不断污染，为保证人们的用水安全，我国越来越重视对生活饮用水微生物的实验室检验工作，因此，也特别强调对微生物实验室检验的质量控制，以保证检验分析数据的有效性与精确性，进而为生活饮用水的处理提供有力的依据。

生活饮用水微生物实验质量控制主要是指对实验室内外部的质量控制，从最初的生活饮用水水样采集，仪器设备应用，材料的供应与选择、微生检验检测步骤、结果分析等各个环节中，对容易出现的质量问题进行分析，并采取科学、合理、有效的措施加强对微生物实验质量的控制，以保证质量的稳定性与可靠性。

3 、生活饮用水微生物实验的质量控制措施

3.1微生物检测的质控措施

3.1. 1 实验药品

新购的培养基每批次均需进行符合性验证。按照《生活饮用水标准检验方法》(GB/T 5750—2006)要求，配制培养基并经 121 ℃灭菌 15 min。培基制成平板以后，置于培养箱 37 ℃培养 24 h，若无菌落生长，证明培养基无菌，符合实验要求;将含有大肠埃希氏标准菌株的菌液接种在培养基上，若大肠埃希氏菌能够正常生长，证明培养基的成分能够满足细菌生长的条件，符合实验要求。

3.1. 2 检测环境

无菌室的环境会影响到检测的结果。为保证紫外灯的灭菌效果，用紫外线强度计测得的紫外线强度应不低于 70 μW/cm2。卫生部行业标准《医疗机构消毒技术规范》(WS/T 367—2012)要求紫外线强度较低时可以通过延长照射时间达到灭菌的效果，当紫外线强度低于 40 μW/cm2时必须更换灯管;无菌室灭菌后，可以通过测定空气浮菌数检测灭菌效果。无菌室应严格控制人员进出，尽量减少无菌室和外界空气的对流，以保证检测环境的质量。

3.1. 3 采样容器

微生物检测项目的采样容器多为 500 mL 磨口试剂瓶，容器灭菌通常采用干热灭菌法。由于磨口瓶的密封性不佳，样品经过长距离运输，会出现水样溢出的现象，极可能使样品受到污染，且该样品在检测时也无法充分混匀，成为影响检测结果的潜在因素。选择具有密封圈的耐高温螺纹瓶作为无菌瓶，能够从根本上解决上述问题。

3.2 检测过程

3.2.1 空白对照

微生物检测中，做培养基空白对照和全程空白对照，两种空白对照的结果均以“未检出”为最好。

3.2.2平行双样

每批次检测随机抽取 10% ～ 20% 的样品进行平行双样测定，当样品数量较少时，应增加平行双样测定比例。目前国内尚未形成微生物检测平行双样相对偏差允许值的统一标准，微生物检测质控的重点在于检测环境的质量控制以及操作过程的无菌控制。当平板菌落数的计数结果在 30 ～ 300 CFU/mL之间时，笔者所在实验室对菌落总数的平行双样相对偏差一般控制在 20%以内。

4、微生物检测结果影响因素分析

4.1 样品保存

4.1.1存放时间的影响

将样品置于室温，存放 3、7、20、24 h 后分别检测，结果表明:存放时间越长，菌落总数的检测结果越高，但不影响总大肠菌群的定性结果，该结论和程权等的研究结论一致。

4.1.2储存条件的影响

对水样当天以及 4 ℃ 冷藏 24 h 后分别进行检测，冷藏后菌落总数的检测结果比当天检测结果略小，相对偏差基本在 20% 以内，表明总大肠菌群有一定的波动。

4.2 其他指标对微生物指标的影响

微生物指标和消毒剂指标呈负相关，多数情况下当消毒剂余量的检测结果较高时微生物指标也是合格的。除消毒剂的消毒效果外，样品的水温、浑浊度、pH 值、氨氮等因素也会对微生物指标产生影响。水温影响水中的细菌活性，有研究表明在一定温度范围内，随着温度的升高细菌的繁殖速度加快;当水的浑浊度、pH 值、氨氮较高时，水中的细小颗粒物和氨氮物质要消耗一部分氯量，同时微生物又可以隐藏其间，导致微生物不能被彻底杀死，当条件适宜时，该部分微生物快速繁殖，很可能引起水中的菌落总数或总大肠菌群超标。

4. 3 取样的随机性对检测结果的影响

微生物各项指标理论上应遵循同一水样单位体积内菌落总数≥总大肠菌群≥耐热大肠菌群≥大肠埃希氏菌的规律，然而检测过程中由于取样体积、检测方法和标准限值的不同，可能会出现不符合该规律的现象。

5、结束语

综上所述，生活饮用水微生物实验室检验对保障人们的饮水安全，促进生态环境良好有着极为重要的意义，而为了能够保证生活饮用水微生物实验质量的稳定，促进微生物检测的有效性，加强对生活饮用水微生物实验质量控制也很有必要。相关的实验室检验人员，应该加强对我国当下生活饮用水微生物实验中容易出现的质量问题进行详细分析，并采取积极、科学、有效的措施控制微生物实验质量，以保证质量的稳定性与良好性，进而为我国生活饮用水的检测与正常、安全使用奠基坚实地基础。

[参 考文献 ]

[1]褚福敏,刘轲,石近淼,肖芙蓉,孙韶华,贾瑞宝. 生活饮用水中微生物检测质量控制措施[J]. 中国给水排水,2014,14.

[2]朱平,王瑜. 浅谈生活饮用水的水质检验[J]. 科技创新与应用,2014,12.

[3]肖红. 生活饮用水微生物实验质量控制研究[J]. 中国卫生产业,2014,20.