HPLC法测定儿宝咀嚼片中橙皮苷的含量

王小青 张后富 张瑾楠 邓罗英 彭旦明 赵诗云 吴东风

（江西省中医药研究院 南昌330046）

儿宝咀嚼片由太子参、北沙参、茯苓、山药、麦芽（炒）、陈皮、白芍（炒）、山楂（炒）、白扁豆（炒）、麦冬、葛根（煨）组成，具有健脾益气、生津开胃的效果[1]。用于小儿面黄体弱，纳呆厌食，脾虚久泻，精神不振，口干燥渴，盗汗。陈皮具有理气健脾、燥湿化痰的功效[2]，与该制剂的功能主治有密切关系，因此建立了陈皮中橙皮苷的含量测定方法，以便更好地控制该制剂质量。

1 仪器与试药

实验仪器：岛津LC-10AT；SPD-M10AP型；安捷伦HP1100；二极管阵列检测器。橙皮苷对照品（批号：110721-201211，含量测定用）由中国生物制品药品检定所提供。

2 实验方法和结果

2.1 色谱条件 色谱柱为 Hypersil，ODS2-C18（5 μm，250mm×4.6mm），流动相为乙腈-0.1%磷酸（19:81）；室温；流速：1.0mL/min；检测波长为 283nm。

2.2 对照品溶液的制备 取橙皮苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成浓度为每1 mL含橙皮苷0.03 mg。

2.3 供试品溶液的制备 取本品20片，精密称定，研细，取约2 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50 mL，密塞，称定重量，加热回流1 h，放冷，称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液[3]。

2.4 阴性供试品溶液的制备 取处方中缺陈皮药材的阴性样品，照供试品溶液制备项下操作，即得缺陈皮阴性对照供试液。

2.5 检测波长的选择 利用高效液相色谱中二极管阵列监测器的波长扫描功能，进行波长扫描，得到橙皮苷最大吸收峰的紫外吸收光谱，最大吸收波长为283 nm。

2.6 结果 供试品溶液和对照品溶液在17.9 min均有橙皮苷的特征峰出现，而阴性供试品溶液在17.9 min左右没有峰，故其他药材不干扰橙皮苷的含量测定。

3 方法学研究

3.1 线性试验 精密称取橙皮苷对照品12.00 mg，至50 mL量瓶中，加甲醇溶解并至刻度。得橙皮苷对照品溶液（x=240 μg/mL）。分别吸取 0.5、1.25、2.5、3.75、5.0 mL至10 mL量瓶中，加甲醇至刻度。橙 皮 苷 对 照 品 浓 度 分 别 为 12、30、60、90、120 μg/mL，分别进样 10 μL，记录峰面积，结果橙皮苷对照品在12～240 μg/mL范围内进样量与峰面积线性关系良好，回归方程y=18 903x+66 031，相关系数为0.999 4。

3.2 精密度试验 取一份样品连续进样六次，进样量10 μL，所得结果为0.65%。结果证明本方法精密度良好。

3.3 重现性试验 取本品，按质量标准草案中所述的方法进行操作，共制备6份供试品溶液，分别进样10 μL，测定峰面积，计算含量，平均含量为0.71 mg/片，RSD为0.98%。结果证明本方法重现性良好。

3.4 加样回收试验 取已测得含量的儿宝咀嚼片粉末，约1 g，精密称定，按已知橙皮苷含量的80%、100%和120%分别加入一定量橙皮苷对照品，同供试品溶液的制备项下操作，制备橙皮苷加样回收率供试品溶液并测定。结果平均回收率为98.23%，RSD为0.67%。

4 样品测定

取儿宝咀嚼片产品，按供试品溶液的制备项下操作，制备供试品溶液。照上述色谱条件，进样10 μL，计算橙皮苷含量。结果见表1。

表1 橙皮苷样品测定试验 mg/片

5 讨论

儿宝咀嚼片中太子参为本制剂君药，但太子参暂时还没有特征对照品，考虑到陈皮具有理气健脾、燥湿化痰的功效，与该制剂的功能主治有密切关系，因此建立了陈皮中橙皮苷的含量测定方法[4]。本方法曾经采用加热回流20、40、60、90 min，但回流提取 40 min 以上才可将橙皮苷提取完全，因此将提取时间定为60 min。儿宝咀嚼片采用HPLC测定条件，取得了较为满意的结果，该方法灵敏度、重复性均较好，样品预处理简单，确定该方法有效。

[1]国家药典委员会编.中华人民共和国药典.第一部[S].北京:中国医药科技出版社,2010.176

[2]戴敬,郝培培,杨晓婧,等.HPLC测定女金丸中橙皮苷的含量[J].中国实验方剂学杂志,2011,17(16):78-81

[3]梁远园,冯彪,祝晨蔯,等.HPLC法测定枳实药材中橙皮苷与柚皮苷的含量[J].中药新药与临床药理,2006,17(5):359-361

[4]孙冬梅,毕晓黎,胥爱丽,等.HPLC法测定不同产地陈皮药材中橙皮苷的含量[J].中国实验方剂学杂志,2009,15(11):1-3