白介素-18在慢性丙型肝炎患者中的表达及意义研究＊

和文博，付 囡，赵 蕊，陈茂伟（广西医科大学第一附属医院感染性疾病科，南宁 530021）

全球携带丙型肝炎病毒（HCV）者约有1.7亿人，慢性丙型肝炎（CHC）是肝硬化及肝细胞癌的常见病因［1］。由于乙型肝炎疫苗在婴幼儿中广泛接种，近年来乙型肝炎病毒的流行急剧下降［2］。这就使得HCV感染发展形成的慢性肝病显得突出，但HCV感染慢性化的机制目前尚未明确。白介素-18（IL-18）主要由巨噬细胞、树突细胞等抗原提呈细胞分泌，能够诱导Th1细胞分化成熟并促进Th1细胞主导的细胞免疫，与Th1／Th2细胞共同作用于病毒的清除、疾病的慢性化等过程。有研究表明IL-18在抗病毒方面具有潜在价值［3］。本研究通过检测CHC患者IL-18的表达情况及其与病毒复制、肝功能损害的关系，以探讨IL-18在CHC病程中的临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料选择2012年12月至2013年4月本院门诊及住院CHC患者47例为研究对象，其中男24例，女23例，年龄11月至50岁，平均年龄（29.19±11.74）岁，所有患者均符合2004年中华医学会肝病学分会、传染病与寄生虫病学分会联合发布的《丙型肝炎防治指南》中CHC诊断标准［4］。选择同期高校体检学生20例为健康对照组，其中男10例，女10例，年龄20～29岁，平均年龄（26.55±2.41）岁。以上纳入研究对象均排除甲、乙、丁、戊型肝炎及心脑疾病、肾病、糖尿病等重大疾病。两组一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2试剂与仪器采用湖北武汉华美生物工程有限公司定量检测人血清IL-18的酶联免疫吸附法（ELISA）试剂盒（检测范围：7.8～500pg／mL；产品编号：CSB-E07450h），严格按照说明书步骤操作；采用中山大学达安基因股份有限公司的HCV核酸检测试剂盒（聚合酶链反应-荧光探针法）检测HCV-RNA，检测下限1.0×103copy／mL；全自动免疫分析仪（机器型号：ARCHITECT i2600sr，正常参考值：0.00～1.00S／CO）检测HCV抗体（HCV-Ab）；全自动生化仪检测丙氨酸氨基转移酶（ALT）（机器型号：HITACHI 7600-020，正常参考范围9～60 U／L）。

1.3 统计学处理采用SPSS16.0统计学软件对数据进行统计分析，服从偏态分布的计量资料采用中位数（四分位间距）表示，两组均数比较采用秩和检验，P＜0.05为差异有统计学意义；采用Spearman相关分析，r=1表示两变量呈完全正相关，r=-1表示两变量呈完全负相关，r接近0表示两变量顺序关联性很小。

2 结 果

2.1 IL-18在CHC患者组与健康对照组中的表达情况CHC患者组血清IL-18的浓度为118.52pg／mL高于对照组的11.09pg／mL，差异有统计学意义（P＜0.05）。

2.2 CHC患者IL-18表达情况与HCV-RNA的相关性47例CHC患者中HCV-Ab阳性20例，HCV-Ab阴性27例。HCV-Ab阳性患者IL-18水平为123.61pg／mL（P25、P75为60.31、160.45pg／mL）；HCV-Ab阴 性 患 者IL-18水 平 为118.52pg／mL（P25、P75为59.24、237.18pg／mL）。两者间比较差异无统计学意义（Z=-0.320，P＞0.05）。HCV-RNA阳性患者定量检测结果与IL-18水平进行相关性分析，结果显示两者间无显著相关性（r=0.085），见图1。

图1 HCV-RNA阳性患者定量检测结果与IL-18相关性分析

2.3 CHC患者IL-18表达情况与HCV-Ab的相关性47例CHC患者中HCV-RNA阳性15例、HCV-RNA阴性32例。HCV-RNA阳性患者IL-18水平为138.44pg／mL（P25、P75为92.20、162.06pg／mL）；HCV-RNA阴性患者IL-18水平为111.02pg／mL（P25、P75为56.11、211.07pg／mL）。两者间比较差异无统计学意义（P＞0.05）。

2.4 CHC患者IL-18表达情况与ALT的相关性47例CHC患者ALT与IL-18采用Spearman秩相关分析，结果显示两者无显著相关性（r=0.291），见图2。

图2 CHC患者IL-18表达情况与ALT的相关性

3 讨 论

HCV感染导致的慢性肝病是严重威胁人类健康的全球性问题。免疫机制被认为在CHC发病中占有重要位置，其中HCV可通过抑制宿主免疫细胞如细胞毒性T淋巴细胞（CTL）等导致HCV持续感染［5］。CTL是机体感染HCV后的主要效应细胞，需在Th细胞分泌的相关细胞因子调节下发挥作用。Gigi等［6］研究结果显示，在CHC患者血清中Th1分泌的干扰素-γ（IFN-γ）降低，Th2分泌的IL-10呈现高表达。Th细胞除自身分泌的细胞因子外还与抗原提呈细胞分泌的细胞因子共同作用于机体感染病毒后的免疫反应，在病毒清除及疾病发展中共同发挥作用。IL-18是抗原提呈细胞分泌的细胞因子之一，可诱导Th1细胞的分化成熟并促进Th1细胞主导的细胞免疫。另外，IL-18可以增强CTL细胞毒性活性，又作为IFN-γ的诱导因子，由此有学者提出IL-18可能与抗病毒有一定关系［3］。

目前国内外对IL-18在CHC患者中的表达及意义少有研究，且结论也不统一。本研究结果显示，IL-18在CHC患者血清中表达高于健康人（P＜0.05），表明血清IL-18表达水平的升高与CHC感染密切相关。IL-18的升高可能通过促进Th1细胞主导的细胞免疫、诱导机体IFN-γ的产生，从而促进HCV的清除。本研究的结果与Yue等［7］、张琳等［8］学者的研究结果一致。但Schvoerer等［9］研究结果表明，CHC患者与健康组对照组IL-18水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。

国外研究结果显示，HCV-RNA阳性患者IL-18的表达水平较HCV-RNA阴性患者显著升高，提出IL-18水平升高可对病毒在肝脏中的持续表达及复制产生抑制作用［10］。本研究中为了解HCV病毒复制情况与IL-18的关系，比较了HCVRNA阳性患者与阴性患者间IL-18的浓度差异，结果显示两组间无明显差异（P＞0.05），通过HCV-RNA定量检测结果与IL-18含量的相关性分析，结果显示两者间无显著相关性（r=0.085，P＞0.05），提示IL-18与病毒复制情况无明显关系。

IL-18是机体促炎因子之一，国内外的研究结果提示HCV会刺激机体巨噬细胞分泌IL-1β和IL-18，从而导致肝脏炎症、肝功能损伤，而且IL-18升高水平与ALT升高呈正相关［10-12］。本研究对ALT正常与异常组的CHC患者IL-18水平进行Spearman相关分析，结果显示ALT与IL-18无明显相关性（r=0.291，P＞0.05）。结论与之前研究报道有所不同，可能与本次研究纳入的ALT正常和轻度异常病例数占总病例数的比例偏高，导致数据偏倚有关。因此，关于ALT和IL-18的关系有待扩大ALT中重度异常病例比例，进一步分析研究。

综上所述，本研究中CHC患者血清IL-18呈现高表达，提示IL-18可能在丙型肝炎慢性感染过程中发挥一定作用。另外，IL-18与HCV复制及其所致的肝损伤无明显关系。

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