荞麦黄酮复合物对小鼠皮肤毛细血管通透性的影响

2014-12-16姜妍金玲王妍高福佳韩淑英

生物技术世界 2014年8期

关键词：脱毛通透性荞麦

姜妍金玲王妍高福佳韩淑英

(1.河北联合大学冀唐学院河北唐山 063000;2.河北联合大学公共卫生学院河北唐山 063000;3.河北联合大学基础医学院河北唐山 063000)

试验目的:观察荞麦黄酮复合物对小鼠皮肤毛细血管通透性的影响,为临床用药提供依据,阐明其药理作用及特点。

试验场所:试验场所:河北联合大学试验动物中心屏蔽试验室(合格证号:SYXK(冀)2010-0038)。试验前饲养室、垫料等用品及环境均用紫外线消毒。饲料为60℃照射,饮水为无菌水。

1 试验材料

1.1 试验动物

SPF级昆明小鼠,18-22g,雌性,购自北京华阜康生物科技股份有限公司,合格证号:SCXK<津>2009—0008;小鼠饲料由北京华阜康生物科技股份有限公司,合格证号:SCXK<京>2009—0008。

1.2 试验药物与试剂

荞麦黄酮复合物及基质液(河北联合大学药理学系研制);阳性对照药物地塞米松磷酸钠注射液(济南利民制药有限责任公司,批号:11091114);伊文思兰(上海化学试剂采购供应站试剂厂生产);硫化钠(天津市北方天医化学试剂厂);二甲苯(天津市永大化学试剂有限公司);丙酮(北京化工厂)。

1.3 试验仪器

722可见分光光度仪(上海精密科学仪器有限公司);MP-2000A型电子天平(上海第二天平仪器厂生产);15mm直径打孔器、注射器等。

2 试验方法

小鼠120只,体重18－22g。给药前24h用8%硫化钠对小鼠腹部进行脱毛处理,脱毛面积为2×2cm。第2天将脱毛的小鼠按体重随机分成6组,每组20只。

(1)模型组,皮肤脱毛处局部涂抹生理盐水0.5ml,每天1次,共3天。

表1 荞麦黄酮复合物对二甲苯所致小鼠皮肤毛细血管通透性增高的影响(±s)

与基质对照组比较 **P<0.01(注:各组动物总数为20只,不足原因为静脉注射失败)

组别给药体积（ml）（浓度 g/ml） OD 值模型组 0.5 0.22±0.07基质组 0.5 0.23±0.05荞麦黄酮复合物低剂量组 0.5(0.027) 0.10±0.03**荞麦黄酮复合物中剂量组 0.5(0.052) 0.09±0.03**荞麦黄酮复合物高剂量组 0.5(0.27) 0.09±0.03**地塞米松组 0.5(0.005) 0.06±0.02**

(2)基质组,皮肤脱毛处局部涂抹基质液0.5ml,每天1次,共3天。

(3)荞麦黄酮复合物低剂量组,皮肤脱毛处局部涂抹1:10稀释的荞麦黄酮复合物0.5ml,每天1次,共3天。

(4)荞麦黄酮复合物中剂量组,皮肤脱毛处局部涂抹1:5稀释的荞麦黄酮复合物0.5ml,每天1次,共3天。

(5)荞麦黄酮复合物高剂量组,皮肤脱毛处局部涂抹荞麦黄酮复合物原液0.5ml,每天1次,共3天。

(6)阳性对照组,皮肤脱毛处局部涂抹地塞米松磷酸钠注射液0.5ml,每天1次,共3天。

上述各组小鼠连续给药3天,于第4天末次给药后30min,所有小鼠尾静脉注射0.5%伊文思兰生理盐水0.1ml/10g体重,随即在小鼠腹部去毛皮肤上滴加二甲苯0.05ml,20min后脱颈处死小鼠,剥下腹部脱毛处兰染皮肤,用直径1.5cm打孔器打下兰染皮肤圆片,投入装有5ml丙酮-生理盐水溶液(带赛)试管内,密封置暗处,每天轻轻摇动试管2-3次,3天后1000转离心5分钟,取上清于630nm处测光密度(OD)。