家蚕全龄人工饲料育试验初报
2014-12-04贾仲伟张至庆
潘 澄 贾仲伟 张至庆
(江苏苏豪国际集团股份有限公司,南京 210012)
2013年春、秋及2014年春季,苏豪集团与苏州大学、江苏省蚕种公司合作,按照医用蚕丝的要求,在溧阳苏豪蚕种基地进行了家蚕全龄人工饲料育的探索,取得了较好的进展。
有关家蚕人工饲料,早在1930年日本人就有人进行了研究。我国从20 世纪70年代开展人工饲料研究,1974年用人工饲料养蚕获得成功。近年来,家蚕人工饲料育的研究有了较大进展,并开展农村规模化饲养探索,但对于家蚕人工饲料育蚕丝用于医用未见报道。
天然蚕丝丝素兼具良好的生物相容性、生物活性和生物可降解性,作为生物材料医疗器械具有巨大的开发潜力,而传统桑叶育受农药、环境污染因素影响,造成蚕丝污染物残留,而造成医用蚕丝材料的重金属、氟化物等化学污染物含量不可控的问题。人工饲料养蚕较传统的桑叶养蚕具有不受季节、气候、地域、土地限制等优势,无毒安全,这为生产家蚕生物制品提供保证。
按照《医用蚕丝蛋白材料产业链上游关键技术的研究和开发》项目要求,项目组技术人员尝试在非实验室无菌环境中进行家蚕全龄人工饲料育,旨在开发低/无污染、可溯源、生物安全、无细胞毒性的生物医用蚕丝。苏豪蚕种公司配备了专人、专用蚕室蚕具,配套相关项目资金开展家蚕全龄人工饲料的饲育工作。
1 饲育准备
1.1 家蚕人工饲料加工与贮存
饲料均用粉体B 类饲料(不含琼脂),采用铝箔复合袋包装,便于贮存和运输,由山东省蚕业研究所提供。
粉体饲料的加工方法:根据不同龄期,饲料与水的比例为1~2 龄1 ∶1.8,3~4 龄1 ∶1.9,5 龄1 ∶2.0,加入的水之前已煮沸消毒冷却,混合后的湿体人工饲料用市售塑料薄膜保鲜袋作为包装材料,装袋后擀平,用封口机封口。稚蚕用饲料180g/袋左右,厚度在0.3cm 左右,壮蚕用饲料400g/袋左右,厚度在0.5cm 左右,采用蒸锅灭菌50min,冷却至室温前,擀压一遍,防止饲料松散,便于切条喂蚕。饲料冷却过程中,用于放置饲料的地方最好是聚乙烯塑料板材、石材、铝板材或不锈钢板材制作,木制桌(台)面油漆中有毒成分会污染饲料,造成蚕中毒现象,饲料放入冰箱冷藏结成较硬的块装,根据蚕不同龄期,将饲料切成粗细不同条状喂蚕,稚蚕期宽度约1cm 左右,壮蚕期在1.5cm 左右。
饲料的贮存方法:粉体饲料按说明贮藏在黑暗、干燥、无污染的室内,保质期可达200d 以上,也可贮存在冰箱内。用保鲜袋包装的湿体人工饲料,冰箱4℃左右保存,保质期30d 以内。
1.2 春季全龄人工饲料育蚕品种
试验用蚕品种为“苏豪×钟晔”。
1.3 全龄人工饲料养蚕设施
使用55.5cm×36cm ×10cm 规格的聚乙烯塑料周转箱,电热加温设备、空调、补湿器,其他附属设备如冰箱、浸泡消毒塑料蚕具用大型塑料箱、饲料蒸煮锅、饲料制作操作间,蚕室专用拖鞋、工作服、一次性手套、消毒药物、蚕网蚕筷、刀片菜板等物品。
2 饲育方法
2.1 收蚁
采用平板状给饵法,即将人工饲料切成所需蚕座面积放入饲育箱,将有蚁蚕的棉纸覆盖在饲料上,4~5h 后将尚未爬到饲料上的蚁蚕扫落到饲料上即可。
2.2 给料次数
稚蚕饲育期间采用切条育,每龄给饵一次,即收蚁、2 龄饷食、3 龄饷食各喂一次,期间视食饵情况及饲料干湿程度,龄中可少量补给1 次,4 龄给饵次数2~3 回,5 龄1 回/日,饲料面积占蚕座面积的50%~75%。
2.3 温湿度调节
饲育温度1 龄83~85F,2 龄82~84F,3 龄81~82F,湿度1~3 龄-1~-2,密闭饲育,并补湿。由于稚蚕期饲育密度偏大,每天通风透气1~2 次。4 龄蚕的适宜饲育温度为79F,5 龄蚕的适宜饲育温度为75~77F,湿度4~5 龄-3~-4。
2.4 眠起处理
蚕儿将眠期停止补湿,眠蚕达到10%~20%以后将饲育箱错开通风排湿,眠蚕达50%以上时开门窗加温排湿,眠蚕达到85%~90%时,撒焦糠,以便使饲料迅速变性和干燥,以免早起蚕食饵造成发育不齐。待起蚕95%以上,且起蚕向四周爬散时饷食,饷食时先在起蚕上撒一层石灰消毒后,再撒一次焦糠隔离石灰,加两层塑料蚕网,将条状饲料摆放在蚕网上,第2 天抬网除沙,并扩座或分箱,网下眠蚕及弱小蚕淘汰,1~2 龄中间不除沙,3 龄视情况扩座除沙。4、5 龄蚕可移至蚕匾中饲育,每次给饵前加网,4~5h 后除沙,以后即可给足饲料正常饲育。
3 全龄人工饲料防霉及防病措施
3.1 防止人工饲料长霉
饲料中丰富的营养及饲养中适宜的温湿度为霉菌的增殖提供了良好的条件,使饲料腐坏,因此人工饲料中已添加了适量防腐剂和抗生素,并调节ph 值为偏酸性,在适温适湿情况下不会长霉,但蚕座密闭,湿度长时间处于饱和状态,水分局部稀释了防腐剂浓度并改变了饲料ph 值,无法抑制饲料上的霉菌生长造成的,另外饲育操作中滴在饲料上的水也是造成长霉的原因。操作和补湿时应避免汗水和冷凝水滴在饲料上,壮蚕饲育不可过密,要经常通风,如发现长霉点要用消毒蚕筷及时去除或更换饲料,污染严重的或整箱放弃饲养。
3.2 防病工作
人工饲料育蚕病毒病主要是血液型脓病发生较多,不易发现、传染快、防治难度大,2013年春秋季全龄人工饲育蚕均发生了细菌性疾病和血液型脓病,均在5 龄饷食后2~3d 发生大面积脓病,并伴随细菌病发生。桑叶育常用新鲜石灰粉消毒预防血液型脓病的发生,由于人工饲料呈偏酸性,在人工饲料上用石灰,会中和酸性,使饲料腐坏,并且在饷食后发现病蚕再用石灰进行消毒,只会短暂抑制发病,经过2~3d 后蚕会继续大面积发病,导致减产甚至养蚕失败。
在饲育操作过程中均使用一次性塑料薄膜手套或乳胶手套,不直接接触蚕和饲料,饲喂之前将手套、砧板、刀片均用漂白粉液浸泡消毒,制作好的人工饲料从冰箱拿出后,保鲜膜表面用漂粉液擦拭消毒,饲料切条饲喂前保鲜膜全部去掉,以免蚕儿啃食,所用用具皆为专室专用,并经常更换。每次给饵结束后,将蚕室地面清理干净,房间和地面均用1%有效氯漂白粉液消毒一遍。发现病蚕后,立即加网除沙更换蚕匾,死蚕、蚕沙单独处理,石灰浆覆盖掩埋,防止交叉感染。
4 饲育结果
4.1 发育经过
1~2 龄发育经过约312h,3~4 龄288h,5 龄经过240h,全龄经过840h(表1)。
4.2 产质量情况
4.2.1 产量
人工饲料育张种产量平均在27kg 左右,产量偏低,一方面是稚蚕淘汰率偏高,淘汰迟小蚕,保证群体发育整齐度;另一方面是全龄人工饲料育茧型小,茧层薄。
4.2.2 茧丝质量
4.2.3 细胞毒性检测结果
受试材料组细胞形态良好,细胞折光性强,与空白对照组相似,为长梭形和多角形,并可见圆形分裂细胞,表明细胞生长旺盛。阳性对照组细胞数量明显少,细胞缩小。受试材料和空白对照组MTT 结晶物密度均比阳性对照组高。实验结果表明蚕丝样品体外细胞毒性分级为0 级,属无细胞毒性。
表1 家蚕全龄人工饲料育发育进度调查
表2 生丝检验结果
5 小 结
家蚕全龄人工饲料育的试养结果表明,饲料育比普通桑叶育龄期经过延长近5 天左右,并且可能受品种、饲料配方、饲养环境技术等多种因素影响,蚕体之间生长发育整齐度方面开差较大,淘汰迟小蚕较多。
其次,家蚕全龄人工饲料育过程中,在无法保证环境绝对无菌的情况下,需要对接触蚕体及饲料的饲养人员进行严格的消毒防病措施。起蚕饷食时可以先撒石灰,再撒焦糠隔离石灰,既可以消毒又可以防止新鲜饲料因接触石灰而发生腐败霉变;在高温高湿的情况下勤除沙、更换饲料可以防止蚕座霉变对蚕儿生长产生不良影响。
第三,家蚕全龄人工饲料育蚕茧茧形小、纤度细,经检测无细胞毒性和致敏性,符合医用级蚕丝蛋白原材料无毒标准。
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