老年甲状腺癌超声影像与肿瘤血管内皮生长因子表达的相关性

赵 琴 王晓荣 (新疆医科大学第一附属医院超声诊断科，新疆 乌鲁木齐 830054)

甲状腺肿瘤是头颈部较常见的实体肿瘤，其种类较多，有良性和恶性之分。临床研究表明，甲状腺癌病理类型与患者预后密切相关，其中良性肿瘤切除后即可治愈，预后良好;而恶性肿瘤预后不如良性肿瘤，且恶性程度越高，预后越差〔1〕。因此，早期鉴别出良恶性甲状腺肿瘤对指导临床治疗和判断预后有一定的参考价值〔2〕。而血管内皮生长因子(VEGF)在甲状腺癌中呈高水平表达，且其表达水平与肿瘤的分化程度、转移及预后显著相关。本研究采用多普勒超声对甲状腺肿瘤的宏观血管变化进行观察及应用免疫组化法检测肿瘤组织VEGF的表达情况，以探讨超声影像和VEGF在甲状腺肿瘤良恶性鉴别方面的意义，并分析其相关性。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集我院2010年1月至2013年7月经手术及穿刺病理证实的84例甲状腺肿瘤患者，其中甲状腺腺瘤23例，乳头状癌47例，滤泡状癌14例;其中男20例，女64例;年龄55 ～76〔(平均64.3±8.9)〕岁。术前均未给予任何治疗，术后取肿瘤切除标本进行VEGF的免疫组化染色。

1.2 超声检查 术前7 d内行多普勒超声检查，采用西门子Acuson Sequoia型及美国GE Logic-7型多普勒超声诊断仪，探头频率为5～12 MHz，对颈部、甲状腺及其周围行灰阶超声检查，以了解甲状腺癌的一般情况，调整多普勒超声血流技术参数，然后观察并记录肿瘤内部及周围血流分布情况。Ⅰ级:结节内和周边血流信号分布范围小于结节面积或结节周长的1/3;Ⅱ级:结节内和周边血流信号分布范围大于结节面积或结节周长的1/3;Ⅲ级:结节内和周边血流信号分布几乎充满结节或占据整个周长。并观察结节内搏动性血流，以收缩期最高峰值流速对应的RI为记录值〔3〕。

1.3 免疫组化法 鼠抗人VEGF单克隆抗体、SP试剂盒和二氨基联苯胺(DAB)显色试剂盒均由武汉博士德公司提供。术后取肿瘤切除标本，常规石蜡包埋，连续厚切片(5 μm)，贴附于载玻片。采用SP法行VEGF的免疫组化染色，磷酸盐缓冲液(PBS)冲洗，复染、脱水、封片。VEGF阳性染色颗粒多位于胞质内，并以＞10%的肿瘤细胞的胞质内染成棕褐色或棕黄色颗粒判断为VEGF表达阳性。

1.4 统计学方法 采用SPSS16.0软件进行分析，计量资料以s表示，组间比较采用t检验;率的比较采用χ2检验;血流阻力指数(RI)与VEGF的相关性分析采用Spearman相关分析。

2 结果

2.1 不同血流信号分级的VEGF阳性表达比较 不同血流分级的甲状腺肿瘤彩色多普勒显像;Ⅰ级阳性率为28.00%(7例)，Ⅱ级为50.00%(16例)，Ⅲ级阳性率为77.78%(21例)，组间比较差异有统计学意义(χ2=5.472，P ＜0.05)。

2.2 不同类型甲状腺癌RI及VEGF阳性表达比较 滤泡状癌组织中 VEGF表达(92.86%)显著高于甲状腺腺瘤(21.74%)和乳头状癌(55.32%);甲状腺腺瘤、乳头状癌及滤泡状癌组织 RI值分别为(0.78 ± 0.07)、(0.70 ± 0.06)和(0.59 ±0.06)，见图1。

图1 VEGF在不同类型甲状腺癌中的表达

2.3 VEGF表达与RI的关系分析 甲状腺癌患者中VEGF阳性表达组RI值为0.72±0.07，显著高于阴性表达组的0.61±0.06，差异均有统计学意义(P＜0.05);经 Spearman相关分析发现，RI与 VEGF阳性表达呈显著正相关(r=0.732，P＜0.05)。

3 讨论

正常生理状况下，机体血管生成因子与抑制因子形成一种相对平衡的状态，但在特殊病理情况下，如细胞恶化转移过程中，癌细胞将释放大量VEGF等以启动癌细胞“血管生成开关”，从而形成肿瘤新生血管并进一步生长，导致不平衡状态的加剧，最终形成肿瘤无限制生长的恶性循环〔4，5〕。VEGF是目前参与肿瘤血管生成特异性最高且作用最强的血管生成因子〔6〕。有研究表明，VEGF在多种肿瘤中均呈高水平表达，且其表达水平与肿瘤的分化程度、转移及预后密切相关〔7〕。因此，检测甲状腺肿瘤组织VEGF的表达情况，对鉴别良恶性肿瘤具有重要的临床意义。

彩色多普勒超声是目前应用最广泛的超声波检查，不仅能清晰显示肿瘤内完整的血管结构，展现肿瘤内新生微血管，还可观察到肿瘤形态的大小、特征、血管网络及与周边血管结构的三维位置关系〔8，9〕。故多普勒彩超是一种能够直观、立体显示肿瘤血流情况的非创伤性技术。本研究提示甲状腺癌的多普勒超声表现与VEGF表达水平密切相关，肿瘤内血流越丰富，VEGF表达越高，能够在一定程度上反映肿瘤血管的生成情况〔10〕。RI是反映血流阻力的重要参数，其客观性较强，测量时不因角度的变化而受影响〔11〕。本文发现，甲状腺癌恶性程度越高，RI值越高，且RI值越高的部位VEGF呈阳性表达，提示肿瘤的分化程度与血管形成有一定的相关性〔12〕。Salajegheh等〔13〕报道，甲状腺癌组织通过分泌大量的VEGF以诱导产生功能结构异常的新生血管，呈不规则密集网络状分布，促成血流紊乱，使RI值增高。本研究结果与上述报道相吻合。

综上，多普勒彩超检测血流分级对老年甲状腺癌具有较高的诊断价值，而血流分级和RI能反映甲状腺癌VEGF的表达情况，多普勒超声影像和VEGF对甲状腺肿瘤良恶性的鉴别具有重要的临床意义。

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13 Salajegheh A，Pakneshan S，Rahman A，et al.Co-regulatory potential of vascular endothelial growth factor-A and vascular endothelial growth factor-C in thyroid carcinoma〔J〕.Hum Pathol，2013;44(10):2204-12.