姬松茸多糖对辐射损伤大鼠的抗氧化作用研究

王俊婷刘剑英蓝蕾胡晓文

(1.青岛大学医学院中西医结合中心，266011；2.济南军区青岛第一疗养院，266071)

随着工业技术的发展，人们接触辐射的机会越来越多，如电视、电脑的广泛应用，从事辐照相关职业者，癌症放射患者，医学B超、CT等相关检查都会受到辐射损害[1]，长期接触会对人们的身体产生一定的损害作用。因此，关于辐射损伤的防护日益受到人们的重视，这就使得辐射危害以及辐射防护成为了近年来研究的一个热点问题。

姬松茸又名巴西蘑菇，是一种珍贵的食药用菌。其子实体深层发酵菌丝体及发酵液中含有多种生物活性物质，如多糖。国外报道姬松茸多糖具有很强的清除自由基、抗肿瘤、抗氧化、增强自身免疫力等多种生物学效应[2]。但迄今为止，尚缺乏对其抗辐射损伤的氧化损伤保护作用疗效及研究报告。

1 材料与方法

1.1 原料及试剂

1.1.1 姬松茸多糖 西安森冉生物工程有限公司提供，多糖浓度为50%(批号：SR20140416)。

1.1.2 主要试剂 谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)测定试剂盒，丙二醛(MDA)测定试剂盒，肿瘤坏死因子-α(TNF-α)测定试剂盒，白细胞介素-2(IL-2)测定试剂盒，购买自青岛渝邑祥科贸有限公司。

1.1.3 实验动物 清洁级SD健康雄性大鼠40只，周龄6周，体质量(140±20)g，于实验室适应性喂养一周。

1.1.4 主要仪器 紫外线分光光度仪、电子天平、TDL-40B高速离心机等。

1.2 辐射损伤大鼠模型的建立

1.2.1 实验动物与分组 采用完全随机分组的方法随机分为正常对照组、模型对照组、姬松茸多糖高剂量组[200 mg/(kg·d)]、姬松茸多糖低剂量组[100 mg/(kg·d)]共4组，每组10只，分笼饲养，自然昼夜，节律光照，温度(20±5)℃，相对湿度为40%～60%。

1.2.2 建立动物模型 所有大鼠适应性喂养一周后开始造模，给予直线加速器(美国瓦里安Warian-21EX)X射线辐射损伤，皮源距100 cm，剂量率100 cGy/min，全身辐射剂量为5.0 Gy(表1)。

表1 动物模型具体分组

1.3 样品采集 辐射后灌胃饲养14 d后，末次给药后24 h称重，给予10%水合氯醛麻醉(0.3 mL/100 g)，待麻醉完全后腹主动脉取血2 mL，静置20 min后离心血清(20 min 2 000～3 000 r/min)，仔细收集上清液，－20℃保存待测，测定指标为谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-2(IL-2)，具体操作方法见试剂盒说明书。

1.4 实验数据处理 用SPSS 17.0软件处理数据，对结果进行检验。

2 结果

2.1 姬松茸多糖对辐射损伤后大鼠GSH-PX和MDA的影响 与正常对照组相比，模型对照组GSH-PX含量下降，MDA含量升高，差异有统计学意义(P＜0.05)，而多糖对照组GSH-PX含量升高，MDA含量降低，差异有统计学意义(P＜0.05)；与模型对照组相比，多糖对照组GSH-PX含量升高，MDA含量降低，差异有统计学意义(P＜0.05)；当多糖剂量达到200 mg/(kg·d)时，血清中GSH-PX含量升高，MDA含量降低，差异有统计学意义(P＜0.05，表2)。

2.2 姬松茸多糖对辐射损伤模型TNF-α和IL-2的影响与正常对照组相比，模型对照组TNF-α、IL-2含量下降，差异有统计学意义(P＜0.05)，而多糖对照组TNF-α、IL-2含量升高，差异有统计学意义(P＜0.05)；与模型对照组相比，多糖对照组TNF-α、IL-2含量升高，差异有统计学意义(P＜0.05)；当多糖剂量达到200 mg/(kg·d)时，血清中TNF-α、IL-2含量升高，差异有统计学意义(P＜0.05，表3)。

表2 姬松茸多糖对辐射损伤后大鼠GSH-PX和MDA的影响

表3 姬松茸多糖对辐射损伤后大鼠TNF-α和IL-2的影响

3 讨论

辐射作用于机体会产生大量的自由基，这些自由基成为传递辐射能的主要媒介，从而引发一系列的放射生物效应[3]。辐射不仅可以引起各种组织器官的氧化损伤，甚至诱发细胞癌变、突变的严重后果，还会对机体免疫系统造成损伤以及产生过量的自由基，使体内防御系统造成严重的破坏[4]。因此，研究利用天然植物中具有的天然活性成分，以提高机体抗辐射能力，预防和减轻辐射对人体的损害，具有重要而实用的价值。

正常组织受到射线照射后，由于射线与组织的相互作用，产生大量自由基，后者作用于生物膜引起膜的脂质过氧化，造成生物膜功能和代谢的改变，从而使辐射损伤进一步加重[5]。GSH-PX作为机体组织主要清除自由基的抗氧化酶，其活力的高低可间接反映机体清除自由基的能力。MDA是脂质过氧化的主要产物，是反映机体自由基水平和氧化应激水平的一项指标。两组指标反映机体的抗氧化状态，观察这两项指标，可反映机体脂质过氧化的程度及清除自由基而防御过氧化毒性的能力[6]。

肿瘤坏死因子(TNF-α)是细胞因子网络中一个重要的多功能成员，其对多种组织器官产生生物学效应，使机体维持内部自稳，抵御各种致病因子必不可少的免疫调节因子，是由巨噬细胞产生的参与免疫和炎症反应的主要调节因子[7]。IL-2又名T细胞生长因子，是由活化的CD4＋T细胞和CD8+T细胞产生的具有广泛生物活性的细胞因子。IL-2是T细胞亚群的生长因子，其主要功能是促进T细胞的增殖，可以诱导细胞毒性T淋巴细胞产生和增殖，促进免疫球蛋白的产生和B细胞的生长，增强巨噬细胞抗原提呈、杀菌能力和细胞毒性等[8]。所以TNF-α和IL-2是调控免疫应答的重要因子，参与抗体反应、造血和肿瘤监视，在氧化损伤和抗肿瘤功能上有重要作用。

本实验中给予大鼠辐射损伤后，与正常对照组相比，模型对照组GSH-PX含量降低，MDA含量增加，TNF-α、IL-2含量降低(P＜0.05)；与模型对照组相比，服用姬松茸多糖的大鼠GSH-PX含量升高，MDA含量降低，，TNF-α、IL-2含量升高(P＜0.05)；当多糖剂量达到200 mg/(kg·d)时，GSH-PX含量升高，MDA含量降低，TNF-α、IL-2含量升高，差异有统计学意义(P＜0.05)，表明姬松茸多糖对辐射损伤后大鼠的抗氧化能力具有明显的保护作用。

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