高效液相色谱在药物分析中的应用

2014-11-03陈蓝刘冠男

环球市场信息导报 2014年4期

陈蓝刘冠男

高效液相色谱法是一种非常重要的化学分离分析手段，广泛运用于鉴别、杂质检查、含量测定、体内分析等药物分析测试与药物质量分析方法的建立。

高效液相色谱（HPLC）是20世纪60年代末70年代初出现并发展起来的一项分离分析技术，随着科学技术的不断发展，色谱也不断的被改进与完善。由于其具有高分离速率，高分离效率，高检测灵敏度等特点，高效液相成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术。尤其是药物，直接关系到人的生命健康，只有对药品的研制、生产、经营和使用各个环节进行全面的动态的药物分析研究和监测控制，才能确保药品使用的安全、有效与合理。因此，高效液相色谱广泛运用于药物分析的各个方面。

1高效液相色谱在药物鉴别中的应用

在H P L C法中，保留时间与组分的结构和性质有关，是定性的参数，可用于药物的鉴别，中国药典采用此法进行药物鉴别。由于西红花价格昂贵，经常出现假品伪品，常见伪品有红花、菊花、玉米须、莲须、纸浆等；其掺伪现象比较复杂，给真伪鉴别和优劣评价带来难度。安慧景采用高效液相色谱法对西红花及其伪品的特征成分进行鉴别，确定正品西红花中没有绿原酸和羟基红花黄素A，并建立了HPLC-DAD含量测定方法，通过测定样品中的绿原酸、HSYA，一次性鉴别西红花、常见伪品菊花、红花，并测定掺伪量。此方法不仅能鉴别药材及提取物是否掺伪，而且能确定所掺伪品的种类并估测掺伪量，是对西红花掺伪鉴别方法的有益探讨和尝试[1]。随着高效液相色谱技术的发展和在药典中的重要性不断提高，出现了一些采用高效液相色谱法鉴别药物的新方法。例如，克拉霉素、利福平滴眼液、岗梅等七种冬青属中草药以及南北五味子的鉴别等[2-5]。这些新方法的发展无疑为进一步完善、开发药物鉴别的方法提供了一种新的思路。

2高效液相色谱在药物杂质检查中的应用

随着H P L C 技术的不断发展，有不少药物分析工作者研究和探讨了H P L C法在药物的有关物质检查方面的应用，并建立了一些新方法。例如，盐酸噻吩诺啡、奥沙西泮原料药及其片剂、盐酸喹那普利原料药、氟他胺中有关物质的检查等[6-9]。这些方法简便、可行且专属性较强，是药物杂质检测的新发展。程磊等通过合成胸腺法新杂质对照品后确证其结构，并进行杂质测定的方法学研究测得各杂质相对于胸腺法新的校正因子，从而建立一种高效液相色谱测定胸腺法新及其制剂中杂质的方法，并可对含量超过0.1%的杂质进行结构鉴定[10]。胡政华等建立苯磺酸左旋氨氯地平片中右旋杂质的HPLC检查方法，该方法专属性强，重复性好，结果准确，是手性药物中杂质分析方法的进步[11]。

3高效液相色谱在药物含量测定中的应用

用高效液相色谱法测定合成药及其制剂的含量，可以消除药物中的杂质、制剂中的附加剂及共存药物的干扰。张美娟采用高效液相色谱法测定舒心糖浆中阿魏酸的含量，所建立的方法分离效果好、灵敏、准确、简便[12]。此外，高效液相色谱在复方制剂中药物含量测试中也有广泛应用，如月乃汤中甘草的鉴别和甘草酸含量测定[13]以及复方葛斛胶囊中葛根素含量的测定等[14]。

4高效液相色谱在体内药物分析中的应用

与气相色谱法相比，高效液相色谱法不受样品挥发性、热稳定性及相对分子质量的限制，只需把样品制成溶液即可测定，非常适用于高沸点、热稳定性差、相对分子量大的有机合成药物。张莉等建立了一种快速、准确测定大鼠血清中（E）-3-（3，5-二羟基-4-异丙基苯基）丙烯酸含量的反相HPLC分析方法，该方法准确可靠，重现性好，可用于临床前药代动力学研究中血药浓度的测定[15]。付洪瑜等建立大鼠血浆中卡瓦内酯麻醉椒苦素的液相色谱质谱联用（LC-MS）定量分析方法，并用于大鼠体内药物动力学研究，该分析方法特异性好、分析速度快、灵敏度高，可用于临床前药物动力学研究[16]。

综上所述，高效液相色谱法分析速度快、分离效率高、检测灵敏度高、检测自动化、适用范围广、组分易回收、样品处理简单。高效液相色谱法还可以在检查杂质的同时进行含量测定，为分析工作节约了时间，同时也降低了分析成本。因此在药物分析的各个方面都有优势。该文原载于中国社会科学院文献信息中心主办的《环球市场信息导报》杂志http：//www.ems86.com总第547期2014年第15期-----转载须注名来源近年来， HPLC 法在仪器、检测器、固定相等方面都有很大的发展，与其他分析技术的联用也越来越成熟。如高效液相色谱仪和电感耦合等离子体质谱仪联用、高效液相色谱与质谱联用以及高效液相色谱-傅立叶变换红外吸收光谱联用等多种技术。高效液相色谱与其他技术的联用是高效液相色谱今后的主要发展方向，也将是今后质量规范化、国际化的重要途径。

参考文献

[1]安慧景.西红花常见伪品的鉴别及掺伪量测定[J].世界科学技术（中医药现代化），[D]2012-06-01（4）：155-161.

[2]杨娜，张雷.用高效液相色谱法鉴别克拉霉素[J].山东医药工业，2002，21（4）：21-22.

[3]王梅娟.利福平滴眼液的高效液相色谱法鉴别[J].江苏药学与临床研究，2005，13（1）：70-71.

[4]罗集鹏，毕培曦.七种冬青属中草药的高效液相色谱法鉴别[N].广东药学院学报， 1997，13（4）： 211-214.

[5]周莹，程海燕.高效液相色谱法鉴别南北五味子[N].医药导报，2005，4（10）：951-952.

[6]阎平，谢剑炜.高效液相色谱法测定盐酸噻吩诺啡药物有关物质的方法研究[J].分析实验室，2006，12（25）：8-10.

[7]黄东.高效液相色谱法测定氟他胺中有关物质[J].药学与临床研究，2007，15（6）：453-455.

[8]程东升，陈蕾等.奥沙西泮原料及其片剂中有关物质的检查[J].药物分析杂志，2 0 0 8 ，2 8（4）：562-566.

[9]沈晓峰，高达敏.盐酸喹那普利有关物质的检查[J].中国医药工业杂志，2000，31（11）：497-499.

[10]程磊；唐洋明；殷果；毕开顺；陈晓辉；王铁杰.HPLC法对胸腺法新及其制剂中杂质检查[J].药物分析杂志，2013-11-30（11）：1942-1947.

[11]胡政华；陈静.苯磺酸左旋氨氯地平片中右旋杂质的检查[J].西北药学杂志，2011-04-01（2）：98-100.