血培养病原菌构成及耐药性分析

刘 倩，董 凤，李桂秋，陈淑兰，宋熙瑶，刘文博，路 娟

(哈尔滨医科大学附属第一医院检验科，黑龙江 哈尔滨 150001)

血培养可为临床诊断菌血症、败血症提供可靠的依据。对血培养阳性病原菌的监测，是监测医院感染、指导临床早期合理用药、控制细菌耐药性产生的重要手段［1-2］。为了解血培养病原菌构成及耐药性，对哈尔滨医科大学附属第一医院2008年1月至2012年12月血培养情况及药敏结果进行分析。

1 材料与方法

1.1 材料

菌株来源 收集哈尔滨医科大学附属第一医院2008年1月至2012年12月血培养阳性患者的非重复菌株4245株。

1.2 方法

1.2.1 培养与鉴定、药敏 血培养采用法国生物梅里埃公司的BacT/Alert 3D全自动血培养仪、美国碧迪公司的BACTEC FX全自动血培养仪及其各自配套的血培养瓶。病原菌鉴定及药敏用法国生物梅里埃公司的VITEK 2 Compact全自动微生物分析仪及配套的鉴定、药敏卡，补充药敏试验采用纸片(K-B)法，培养基和药敏纸片由英国Oxoid公司生产。

1.2.2 判读标准 判定标准按美国临床实验室标准化研究所(CLSI)2012年制定的标准［3］。质控菌株:金黄色葡萄球菌ATCC29213、金黄色葡萄球菌ATCC25923、大肠埃希菌ATCC25922、铜绿假单胞菌ATCC27853、粪肠球菌ATCC29212等。

1.2.3 统计方法 病原菌分布及耐药性采用WHONET 5.6统计软件进行分析。

2 结果与分析

2.1 病原菌分布

2008年1月至2012年12月共检出病原菌4245株。病原菌分布及构成比见表1。

2.2 主要革兰阳性及阴性菌的耐药性

耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)检出率为81.1%，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)检出率为38.8%。主要革兰阳性球菌对抗菌药物的耐药性见表2。产ESBLs大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌检出率分别为55.2%和53.8%。主要革兰阴性杆菌对抗菌药物的耐药性见表3。

表1 血培养病原菌分布及构成比(%)Table 1 Distribution of the blood culture positive pathogens(%)

表2 葡萄球菌属对抗菌药物的耐药率(%)Table 2 Drug resistance rates of Staphylococcus SPP(%)

表3 主要革兰阴性菌对抗菌药物的耐药率(%)Table 3 Drug resistance rates of the main gram-negative bacteria(%)

3 讨论

本研究收集了哈尔滨医科大学附属第一医院2008年1月至2012年12月五年间临床送检血培养标本中分离出的病原菌共4245株。病原菌居前5位的依次为凝固酶阴性葡萄球菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、金黄色葡萄球菌，与中国医科大学附属第一医院报道一致［4］。

葡萄球菌属在血培养分离出的病原菌中占主要地位，尤其是凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)分离量达22.3%，可能与侵入性治疗、假肢替换、标本污染等因素有关。凝固酶阴性葡萄球菌和金黄色葡萄球菌对万古霉素、利奈唑胺及替考拉宁高度敏感，未发现耐药株;对奎奴普丁/达福普汀耐药率较低，分别为3.4%、2.0%;对利福平耐药率也较低，可能与临床少用有关;对其余抗菌药物的耐药率普遍较高。MRCNS和MRSA检出率较高，分别为81.1%、38.8%，而耐甲氧西林的葡萄球菌对青霉素类、头孢类、β-内酰胺/β-内酰胺酶抑制剂复合物和碳青霉烯类均耐药［5］，故万古霉素、利奈唑胺及替考拉宁可作为MRCNS和MRSA感染的有效药物。

大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌是血培养最常见的革兰阴性菌，占分离菌的第2位和第3位。由表3可见，大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类药物较敏感，对头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、头孢替坦、头孢西丁、阿米卡星的耐药率较低，对其余抗菌药物的耐药率普遍较高。大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌产ESBLs菌株检出率较高，分别为55.2%和53.8%。一旦检出产ESBLs菌株，无论体外药敏结果如何，对一、二、三代头孢、氨曲南均应报告耐药［6］，应选用加酶抑制剂类、碳青霉烯类抗菌药物。而大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌对亚胺培南、美罗培南等碳青霉烯类抗菌药物也存在部分耐药现象，可能与产KPC-2酶肠杆菌科细菌在我国流行有关［7］。由于血培养中ESBLs的高检出率及产KPC酶肠杆菌科细菌的威胁，因此肠杆菌科细菌的耐药问题需要密切关注。血培养分离出的非发酵菌中，以鲍曼不动杆菌为主。由于广谱头孢菌素和碳青霉烯类抗菌药物的广泛应用，鲍曼不动杆菌出现多药耐药、泛耐药，甚至是全耐药。鲍曼不动杆菌对抗菌药物的耐药率普遍较高;对妥布霉素、左旋氧氟沙星的耐药率为50%～60%;对其他抗菌药物的耐药率均大于60.0%;对氨曲南的耐药率达100.0%。哈尔滨医科大学附属第一医院血培养分离出的病原菌分布广泛，耐药差异较大，为提高患者菌血症、败血症的诊断及治愈率，控制细菌耐药性的产生，应及时、准确地对血培养分离出的病原菌进行监测，指导临床早期合理使用抗菌药物。

［1］覃凌，王慕云.血培养阳性标本的目标性监测与假阳性的控制［J］.中华医院感染学杂志，2012，22(19):4374-4375.

［2］Bhattacharya S，Mondal AS.Clinical microbiology in the intensive care unit:strategic and operational characteristics［J］.Indian J Mde Microbiol，2010，28(1):5-10.

［3］Clinical and Laboratory Standards Institute.Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing;Twenty-Second Informational Supplement［S］.CLSI，2012.

［4］孙国全，王倩，褚云卓，等.28179例血培养病原菌分布及耐药性分析［J］.微生物学杂志，2013，33(5):102-105.

［5］刘行超，曾桂芬，费燕楠，等.3年医院感染主要病原菌的耐药性及应对措施［J］.中华医院感染学杂志，2012，22(9):1903-1905.

［6］洪亚明，范国萍，朱月霞.血培养病原菌分布及耐药性分析［J］.中华医院感染学杂志，2012，22(24):5645-5647.

［7］Shen P，Wei ZQ，Jiang Y，et al.Novel Genetic Environment of the Carbapenem-Hydrolyzingβ-Lactamase KPC-2 among Enterobacteriaceae in China［J］.Antimicrob Agents Chemother，2009，54(10):4333-4338.