HPLC法测定注射用头孢唑林钠中头孢唑林的含量

郑风敏

河南省鹤壁市食品药品检验所，河南 鹤壁 458030

头孢唑林为第一代头孢菌素，抗菌谱广，适用于治疗敏感细菌所致的呼吸道感染，尿路感染，皮肤软组织感染，骨和关节感染，败血症、感染性心内膜炎等疾病［1］。本文采用HPLC法测定头孢唑林的含量，准确可靠，简便;同时，通过HPLC色谱图可以直观地判断注射用头孢唑林钠的质量控制水平，为临床用药提供依据。

1 仪器与试药

1.1 仪器 Waters高效液相色谱仪 (Waters 2695 HPLC PumP;Waters 2998二级管阵列检测器;Epower化学工作站);赛多利斯CPA225D电子分析天平。

1.2 试药 头孢唑啉对照品 (批号:0421-9603，中国食品药品检定研究院)。注射用头孢唑林钠 (批号:1211A001，中诺药业 (石家庄)有限公司;批号:02530303，悦康药业集团有限公司)。水为纯化水，乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件［2］色谱柱:Waters Sunfire C18柱 (4.6 ×150mm，5μm);流动相为乙腈-磷酸氢二钠、枸橼酸溶液(取无水磷酸氢二钠1.33g与枸橼酸1.12g，加水溶解并稀释制成1000ml)(13:87);流速为1.0 ml/min;检测波长254nm;柱温25℃;进样量10μl。

2.2 溶液的制备［2］

2.2.1 对照品溶液的制备 精密称取头孢唑啉对照品适量，加磷酸盐缓冲液 (pH 7.0)5ml，再用流动相溶解并定量稀释制成每1ml中含0.1mg的对照品溶液。

2.2.2 供试品溶液的制备 精密称取供试品适量，加流动相溶解并定量稀释制成每1ml中含0.1mg的供试品溶液。

2.3 线性关系考察 精密称取对照品21mg，置50ml容量瓶中，加磷酸盐缓冲液 (pH 7.0)10ml，再用流动相定量稀释至刻度，摇匀。分别精密吸取 1.0、2.0、5.0、3.0、5.0ml，分别置10、10、20、10、10ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀。在上述色谱条件下准确进样10μl测定，以各溶液的浓度为横坐标，峰面积为纵坐标进行回归，其回归方程为 Y=14902X+5104.1(r=0.9999)，头孢唑啉在40～200μg/ml浓度范围有良好的线性关系。

2.4 精密度试验 取“2.2.1”项下的对照品溶液，准确进样10μl，连续进样5次，记录色谱图，计算头孢唑啉峰面积的RSD为0.2%。结果表明:本实验进样精密度良好。

2.5 重复性试验 取“2.2.2”项下供试品溶液，照含量测定方法测定，依法平行测定6次，以峰面积计算，RSD为0.5%。表明该方法重现性好。

2.6 稳定性试验 精密量取同一供试品溶液，于0、1、3、5、7、9h分别准确进样10μl，在上述色谱条件下，记录色谱图，计算头孢唑林峰面积的RSD为0.7%。结果表明，注射用头孢唑林钠在9h内比较稳定。

2.7 回收率试验 精密称取供试品15mg，置200ml量瓶中，分别精密加入对照品溶液，用流动相稀释至刻度，摇匀，配成低、中、高三种不同浓度的溶液，按色谱条件测定，记录峰面积，测得供试品在三个不同浓度的回收率平均值分别为103.5%、99.7%、102.1%。

2.8 供试品的测定 分别取“2.2.1”项下的对照品溶液和“2.2.2”项下的供试品溶液，各准确进样10μl，在上述色谱条件下进行测定，按外标法以峰面积计算。结果见表1。

表1 供试品测定结果

3 讨论

磷酸氢二钠作为流动相有很好的缓冲能力，并且头孢唑林钠在磷酸氢二钠溶液中溶解性能很好，但是头孢唑林钠的酸度值为5.5左右，磷酸氢二钠作为主要的缓冲液其溶液显碱性，所以要加入一定量的枸橼酸来调节其pH值，这样使其缓冲能力更强，在测定过程中头孢唑林钠可以达到更好的分离纯化效果，使得测定结果更准确，故选择磷酸氢二钠、枸橼酸溶液同时作为头孢唑林钠的流动相。

本实验建立的HPLC法测定头孢唑林的含量，方法准确，快速，重现性良好。从供试品的含量测定结果可以看出，此方法可以准确的测定注射用头孢唑林钠中头孢唑林的含量，从而为实际工作中对药品质量的控制提供科学的依据。

［1］刘俊田.药理学［M］.郑州:郑州大学出版社，2004:382-383.

［2］国家药典委员会.中华人民共和国药典 (二部) ［M］.北京:中国医药科技出版社，2010:206-207.