免疫胶体金快速诊断技术在兽医诊断上的应用

刘俊国

摘 要 免疫胶体金标记技术是近年来随着医疗技术水平的发展提高而研究的一项新型免疫标记技术，该技术主要以胶体金作为示踪标志物，在抗原抗体反应中具有良好应用效果。鉴于此，就免疫胶体金快速诊断技术在兽医诊断上的应用进行了简单的分析。

关键词 免疫胶体金快速诊断技术；兽医；诊断；应用

中图分类号：S854.43 文献标志码：B 文章编号：1673-890X（2014）21--02

免疫胶体金快速诊断技术最早主要用于尿液和血清的检验，检测方法与ELISA比较类似，而这种检测技术整个过程只需要5 min。在20世纪90年代初期，国外著名医学研究者Chun等提出用胶体金代替酶作为标记物用于渗滤试验，并成功的制备了检测抗人类免疫缺陷病毒（ HIV） 抗体的试剂盒，而得到广泛应用[1-2]。随着医疗技术水平的发展提高及医学研究的深入，该项技术已在人医临床检验中得到了广泛应用，如蛋白质检测、传染病原抗体检测、妊娠试验等，而目前临床上关于该项技术在兽医诊断的报道却较少见。

1 概述

1.1 基本原理

免疫胶体金快速诊断技术主要是以微孔滤膜为固相载体，包被已知抗原或抗体，将待测样本加入之后，通过微孔膜的渗滤作用促进标本中的抗体或抗原与膜上包被的抗原结合，再发生一系列化学反应产生红色，并以此判定结果。目前，临床上应用的主要包括免疫渗滤试验和免疫层析试验[3]。

1.2 优势

免疫胶体金快速诊断技术整个试验过程只需要试剂盒或试纸条，而不需要任何实验仪器，大大提高操作的方便性，反应结果非常明显，可通过肉眼直接判别，反应时间也非常短，一般情况下，5～10 min便可获得检测结果；同时，免疫胶体金快速诊断技术具有很高的灵敏度和特异性。

2 应用

免疫胶体金快速诊断试剂主要应用于兽医诊断基层单位，尤其是对于专业人员和专业设备比较缺乏的基层单位。目前，市面上已出现了很多已经免疫胶体金快速诊断家禽家畜及宠物用金标诊断试剂，用于检测猪口蹄疫、猪繁殖与呼吸综合症、猪瘟、猪旋毛虫、鸡传染性法氏囊病、鸡新城疫、禽流感、犬瘟热、犬细小病毒及宠物用旋毛虫病等疾病的快速诊断试剂。归纳起来，其应用主要包括2个方面。

2.1 抗体的检测

这种方法主要是应用于检测NC膜上包，具体方法为：用胶体金标记相应抗原，也可以标记SPA，如果检测样品为阳性，则可以在标记物中看到红色斑点。我国著名农学研究者张书永[4]等应用该方法对猪瘟抗体进行了检测，选择100份猪血清进行猪瘟抗体检测比较，研究结果显示仅有一例出现不符，符合率达99.0%。另外，一名研究者陈剑阁[5]等建立的猪瘟金标免疫层析试纸测试60份标准阳性血清和36份标准阴性血清，试验结果显示器符合率达百分之百。曹三杰等建立了斑点免疫金染色法能有效对PPV抗体进行检测，并通过对猪细小病毒病抗体进行了检出试验，试验结果显示器检出量为1.008×10-10 g/mL，不同的试验标本混合可出现交叉反应，比如猪布鲁氏菌病、猪衣原体病、猪伪狂犬病等等。方莹等通过试验提出了的RRRS抗体免疫金标试纸，并对60份猪血清及血液样品进行抗体水平检测，检测结果显示其符合率达百分之百。王春仁等研究出的斑点免疫金渗滤试验能有效对绵羊脑多头蚴病进行检测及诊断，具有很高的符合率；另外一些临床研究者还建立了EDS-76病毒抗体的斑点免疫金测定法、猪伪狂犬病抗体水平免疫胶体金快速检测试纸法、特异性地检测猪流行性乙型脑炎病毒抗体的斑点金免疫渗滤测定法等方法，并提出共同的结论，采用免疫胶体金快速诊断在多种动物疾病抗体的检测中具有很高的符合率、灵敏度和特异性。

2.2 病原的检测

病原检测方法有很多，常见的比如双抗体夹心法，该方法主要是以2种抗该病原的抗体分别用来包被NC 膜和标记胶体金，阳性样品的病原会与金标抗体和NC 膜上的抗体相结合，从而对病原进行检测。我国著名医学研究者等建立了检测犬细小病毒的胶体金免疫层析法。并用该方法对60份犬粪便样品进行了检测，检测结果显示与HA结果相比可获得40倍以上的效价，还有一些研究者也纷纷建立了检测PRRSV的斑点免疫金渗滤法、快速诊断鸡新城疫的免疫层析测试条等多种方法和试剂，并得出共同的结论，免疫胶体金快速诊断在多种病原的检测中具有较高效价，可获得较高检出率，值得在临床上推广应用。

3 结语

免疫胶体金快速诊断技术是随着医疗技术水平的发展提高而研究的一项新型的独特的诊断技术，该技术与免疫酶标技术、放射免疫技术、免疫荧光技术并列为四大免疫标记技术，具有非常重要的临床价值，在未来也具有广阔的发展空间。目前，该技术在兽医诊断上得到了逐步推广，但还需进一步研究。

参考文献

[1]艾嘉亮，邓国华，王君伟.胶体金免疫层析技术及其在兽医诊断上的应用[J].黑龙江畜牧兽医，2009，5：88-89.

[2]杨雪林，张福官，杨卫华，等.胶体金快速诊断技术在兽医临床诊断中的应用[J].安徽农学通报，2010，2：36-37.

[3]庄金秋，梅建国，沈志强.胶体金免疫层析技术在兽医临床诊断中的应用进展[J].中国动物检疫，2012，9：70-75.

[4]张书永.免疫胶体金快速诊断技术的临床应用与质量控制[J].中国医学装备，2013，5：37-39.

[5]陈剑阁.胶体金免疫技术在猪瘟诊断上的应用进展[J].中国动物保健，2011，6：14-17.

（责任编辑：赵中正）endprint