不同PCR扩增试剂盒检验血样DNA的检验结果对比研究

魏万昆

【摘要】 目的：讨论研究Profiler PlusTM、IdentifilerTM以及Powerplex16扩增试剂盒用于检验血样DNA检验结果的差异，并研究其扩张不平衡和基因丢失现象的发生几率。方法：选取150例完全无血缘关系的个体作为研究对象并采集其血样，分别使用两种扩增试剂盒进行检验。对所得不同结果的同一对象再使用3种扩增试剂盒进行检验。将检验所得结果进行比较。结果：3种试剂盒检测的等位基因缺失率比较差异无统计学意义（P>0.05）。Profiler PlusTM检测扩张不平衡率显著高于其余两种试剂盒（P<0.05）。结论：使用PCR扩增试剂盒对血样DNA进行检测时，会出现不同位置的异常基因，可表现为基因缺失及扩增不平衡。但Profiler PlusTM检验扩增不平衡发生率显著高于其余两种试剂盒。在实际生活对血样DNA进行检测时，除需准备主要检测扩增试剂盒外，还需准备其他不同类备用试剂盒用于互相验证及对比，尽量降低基因等位缺失及扩张不平衡发生率。

【关键词】 不同PCR扩增试剂盒； 无血缘关系个体； 血样DNA检验结果； 差异对比

【Abstract】 Objective：To discuss and study the difference between testing results of Profiler PlusTM， IdentifilerTM and Powerplex16 amplification kits in testing blood sample DNA， and study the occurrence rate of amplification imbalance and gene deletion phenomenon.Method：150 individuals who had no genetic connection with each other were chosen as research objects， and their blood samples were collected and tested by 2 different amplification kits. Objects with 2 different results were tested again by the third kit. All testing results were compared.Result：There were no significant differences between the 3 kits on allelic gene deletion （P<0.05）. Amplification imbalance rate of Profiler PlusTM was obviously higher than the other 2 kits （P<0.05）. Conclusion：When testing blood sample DNA with different PCR amplification kits， there might be abnormal genes of different positions which might manifested as gene deletion and amplification imbalance. But occurrence rate of amplification imbalance of testing result of Profiler PlusTM was obviously higher than the other 2 kits. In practical life， when testing blood sample DNA， besides major amplification kits， other different sorts of spare kits should be prepared for verification and comparison to reduce occurrence rates of allelic gene deletion and amplification imbalance.

【Key words】 Different PCR amplification kits； Individuals without genetic connection with each other； Blood sample DNA testing result； Difference comparison

First-authors address：The Second People's Hospital of Nanyang City，Nanyang 473000，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2014.22.007

目前聚合酶链式反应技术已广泛应用到基因分离、克隆，核酸序列分析，疾病诊断、DNA检验等多个领域。该技术主要是指一种体外酶促合成特异DNA的方法。近年来DNA检验技术在法医学领域中被广泛使用，主要遗传系统包括Profiler PlusTM、IdentifilerTM以及Powerplex16，可在各类犯罪案件、数据库管理重建等项目中得到广泛应用[1-2]。大部分研究证明，使用这三种PCR扩增试剂盒渐渐结果科学性及可靠性高，具有较高的实用价值。但是该检验仍然会出现基因缺失或扩增不平衡现象。本实验为研究不同扩增试剂盒用于检验血样DNA结果的差异与临床价值，特选取150例无血缘关系个体临床资料进行分析。现将报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 随机选取150例完全无血缘关系个体，所有个体均为汉族，其中男64例，女36例；年龄26～42岁，平均（34.3±8.2）岁。100例个体均来源于本次实验的实验室数据库积累。设备仪器使用ABI公司提供ABI3100型基因分析仪以及9700型PPCR扩增仪器。endprint

1.2 实验方法 对所有血样采集检验个体均使用硅珠法进行提取DNA[3]。应用10 μL扩增反应体系应用于PCR扩增。使用ABI-9700扩增仪进行扩增。反应体系中成分以及热循环参数设置、检测方法等根据仪器说明书进行设置及操作。Profiler PlusTM扩增试剂盒使用Rox-500内标；IdentifilerTM扩增试剂盒使用Liz-599内标；Powerplex16使用ILS-600内标。分析师分别使用Matrix顺序为set F、set G5、set Z。分析软件应用GeneMapper ID v3.2分析软件。使用相对应标准阶梯等位基因为标准进行基因型分型。对于IdentifilerTM以及Powerplex16扩增试剂盒加入0.05 ng、0.075 ng、1 ng至8 ng的9947A模版DNA进行扩增与检测[4]。

1.3 统计学处理 采用SPSS 13.5统计学软件对数据进行处理，计数资料采用 字2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 3种扩增试剂盒等位基因确实及扩增不平衡比较 150例血液样本中，2种不同种类扩增试剂盒不同检验结果分型为8例。检验差异率为8.0%。使用3种扩增试剂盒对上述8例血液样本再次进行DNA血样检测后，Profiler PlusTM有1例于D8S1179基因座上出现等位基因缺失，IdentifilerTM在D13S317基因座上出现等位基因缺失，发生率均为2.0%。Powerplex16在D8S1179基因座上为7例扩增不平衡。其余两种分别于D13S317以及FGA基因座上出现1例不平衡现象。不平衡概率为14.0%，2.0%以及2%。3种试剂盒检测的等位基因缺失率比较差异无统计学意义（P>0.05）。Profiler PlusTM检测扩张不平衡率显著高于其余两种试剂盒（P<0.05），见表1。

2.2 3种扩增试剂盒不同等位基因丢失现象的比较 实验个体当中Profiler PlusTM以及Powerplex16实际和检验存在7个样本存在差异。在Profiler PlusTM试剂盒的D8S1179基因座位上发生扩增不平衡现象的5个样本，经IdentifilerTM以及Powerplex16试剂盒的扩增均表现为正常的杂合子分型，两个等位基因的峰值比例相当。由于3种反应试剂盒对于同一个基因座在引物设计时选择的侧翼位置不一致，相应的序列也有差异；且又由于点突变的缘故，部分个体的样本在扩增时因与引物序列不匹配，相应的等位基因不易扩增成功，或产量低，从而发生扩增不平衡，甚至等位基因缺失的现象，导致经不同试剂盒扩增检测后DNA分型不一致的现象。在本次试验中，这种现象在Profiler PlusTM试剂盒中D8S1179基因座位上表现尤为明显，5例扩增严重不平衡，杂合子的两个等位基因峰值高度或峰面积差异在1：-1：5以上。IdentifilerTM以及Powerplex16两种试剂盒在D8S1179基因座位上的引物设计选择的侧翼位置以及相应的序列均有明显改善，不容易发生与引物序列不匹配的情况。上述3种试剂盒各发生1例等位基因丢失的现象，等位基因丢失几率均为0.1961%，但基因座不一样，IdentifilerTM以及Profiler PlusTM均有同一例样本在同一个基因座（D13S317）上丢失等位基因，应为（8，12）的分型仅检出（8）一个等位基因，相应的Powerplex16有1例FGA基因座上发生缺失，应为（22，24）的分型仅检出（22）一个等位基因，而IdentifilerTM以及Profiler PlusTM均正常（图1～2）。等位基因丢失或扩增不平衡现象的发生多数是由于引物序列不匹配造成，但还可能与退货温度偏高有关、或者由于其中一个等位基因片段太大没能收集到数据，超出检测范围而造成的假象，如FGA基因座45.2等位基因。此外分析所有发生基因丢失或扩增不平衡现象基因座的STR分型，发现该现象均发生在大片段等位基因，而小片段等位基因不受影响（图1～2）。这可能是由于大片段等位基因扩增效率角度，而小片段等位基因易与先扩增的缘故。

3 讨论

由于Profiler PlusTM、IdentifilerTM以及Powerplex16在同一基因座上的引物侧翼位置有所差异，因此易造成相应的序列存在差异[5-7]。同时基因序列发生点突变可能导致样本扩增时部分个体的序列以及引物序列不想匹配。导致相应的等位基因扩增失败或产物量较少，导致扩增不平衡及等位基因缺失现象。最终结果造成不同扩增试剂盒对血样DNA检验分型不相一致。导致这两种现象发生的原因也有可能是由于退火温度较高或其中一个等位基因片段过大造成未对数据进行收集，导致超过检验范围二出现的假象[8-10]。此外，对所有基因缺失及扩增不平衡现象基因座的STR分型后发现，此类表现均体现在较大片段等位基因中，对小片段不造成较大影响。这一现象原因是小片段等位基因其扩增率相对较低且易于优先扩增[11-12]。

本次实验对Profiler PlusTM及Powerplex16分别加入不同剂量9947A模版DNA进行扩增及监测。检验结果显示两种不同扩增试剂盒扩增所需的模版DNA量为1～3 ng。最低灵敏度为0.075 ng。但模版上限IdentifilerTM为5 ng，Powerplex16则高达8 ng。实验结果分析得出IdentifilerTM及Powerplex16对模版DNA量大小无明显差异，因此在实际应用中可类同把握。对于DNA降解程度的适应性尚未明确显示。

综上所述，使用3种不同扩增试剂盒均会出现等位基因丢失及扩张不平衡现象。但Profiler PlusTM其发生率显著高于其余两种试剂盒。因此，在实际检验操作过程中可选择主要一类扩增试剂盒，其异常百分比可相对较低。另外需再准备一至两种试剂盒作为对比分析时可进行检测，尽量减少两种差异所造成判断类型错误发生。

参考文献

[1]吴微微，郝宏蕾，林锦锋，等.3种国产化试剂盒与Identifiler-（TM）试剂盒检验结果比较[J].中国法医学杂志，2011，11（1）：45-47.

[2]柳天天.几种常用PCR扩增试剂盒检验血样DNA的结果比较[J].中外医疗，2012，13（3）：177.

[3]周翼，吴林军.不同PCR扩增试剂盒检验血样DNA的结果对比分析[J].中国医药科学，2012，12（7）：106.

[4]吴微微，刘振平，傅汀，等.3种常用PCR扩增试剂盒检验血样DNA的结果比较[J].中国法医学杂志，2006，12（4）：203-207.

[5]申琴，倪斌，欧阳曙明，等.湖南地区1013例亲子鉴定中的STR突变位点研究[J].生命科学研究，2009，11（6）：517-520

[6]王林生，苏勇，顾林岗.硅珠法提取PCR模板DNA[J].中国法医学杂志，2000，12（1）：89-90.

[7]吴微微，徐林苗，朱虹辉.浙江汉族人群9个STR基因座的遗传多态性调查[J].中国法医学杂志，2001，13（1）：37-38.

[8]刘超，李越，王穗保.广州地区汉族人群Penta D及Penta E STR基因座频率[J].中国法医学杂志，2001，13（3）：101-102.

[9]刘翠兰，胡家伟，朱传红.Profiler Plus试剂盒扩增Amelogenin基因座变异一例[J].刑事技术，2005，13（4）：25-27.

[10]王军，邢锦山.连云港地区汉族人群15个STR基因座的遗传多态性[J].苏州大学学报（医学版），2010，30（2）：106-108.

[11]胡玉弘，陈玲玲，冯军.标本存放时间对荧光定量PCR检测HBV-DNA结果的影响[J].中国医学创新，2010，7（2）：7-8.

[12]吴泽建，王惠斌，袁锡裕.RT-PCR检测CK19 mRNA青年结直肠癌患者淋巴结微转移[J].中国医学创新，2012，11（07）：6-8.

（收稿日期：2014-03-12） （本文编辑：蔡元元）endprint

1.2 实验方法 对所有血样采集检验个体均使用硅珠法进行提取DNA[3]。应用10 μL扩增反应体系应用于PCR扩增。使用ABI-9700扩增仪进行扩增。反应体系中成分以及热循环参数设置、检测方法等根据仪器说明书进行设置及操作。Profiler PlusTM扩增试剂盒使用Rox-500内标；IdentifilerTM扩增试剂盒使用Liz-599内标；Powerplex16使用ILS-600内标。分析师分别使用Matrix顺序为set F、set G5、set Z。分析软件应用GeneMapper ID v3.2分析软件。使用相对应标准阶梯等位基因为标准进行基因型分型。对于IdentifilerTM以及Powerplex16扩增试剂盒加入0.05 ng、0.075 ng、1 ng至8 ng的9947A模版DNA进行扩增与检测[4]。

1.3 统计学处理 采用SPSS 13.5统计学软件对数据进行处理，计数资料采用 字2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 3种扩增试剂盒等位基因确实及扩增不平衡比较 150例血液样本中，2种不同种类扩增试剂盒不同检验结果分型为8例。检验差异率为8.0%。使用3种扩增试剂盒对上述8例血液样本再次进行DNA血样检测后，Profiler PlusTM有1例于D8S1179基因座上出现等位基因缺失，IdentifilerTM在D13S317基因座上出现等位基因缺失，发生率均为2.0%。Powerplex16在D8S1179基因座上为7例扩增不平衡。其余两种分别于D13S317以及FGA基因座上出现1例不平衡现象。不平衡概率为14.0%，2.0%以及2%。3种试剂盒检测的等位基因缺失率比较差异无统计学意义（P>0.05）。Profiler PlusTM检测扩张不平衡率显著高于其余两种试剂盒（P<0.05），见表1。

2.2 3种扩增试剂盒不同等位基因丢失现象的比较 实验个体当中Profiler PlusTM以及Powerplex16实际和检验存在7个样本存在差异。在Profiler PlusTM试剂盒的D8S1179基因座位上发生扩增不平衡现象的5个样本，经IdentifilerTM以及Powerplex16试剂盒的扩增均表现为正常的杂合子分型，两个等位基因的峰值比例相当。由于3种反应试剂盒对于同一个基因座在引物设计时选择的侧翼位置不一致，相应的序列也有差异；且又由于点突变的缘故，部分个体的样本在扩增时因与引物序列不匹配，相应的等位基因不易扩增成功，或产量低，从而发生扩增不平衡，甚至等位基因缺失的现象，导致经不同试剂盒扩增检测后DNA分型不一致的现象。在本次试验中，这种现象在Profiler PlusTM试剂盒中D8S1179基因座位上表现尤为明显，5例扩增严重不平衡，杂合子的两个等位基因峰值高度或峰面积差异在1：-1：5以上。IdentifilerTM以及Powerplex16两种试剂盒在D8S1179基因座位上的引物设计选择的侧翼位置以及相应的序列均有明显改善，不容易发生与引物序列不匹配的情况。上述3种试剂盒各发生1例等位基因丢失的现象，等位基因丢失几率均为0.1961%，但基因座不一样，IdentifilerTM以及Profiler PlusTM均有同一例样本在同一个基因座（D13S317）上丢失等位基因，应为（8，12）的分型仅检出（8）一个等位基因，相应的Powerplex16有1例FGA基因座上发生缺失，应为（22，24）的分型仅检出（22）一个等位基因，而IdentifilerTM以及Profiler PlusTM均正常（图1～2）。等位基因丢失或扩增不平衡现象的发生多数是由于引物序列不匹配造成，但还可能与退货温度偏高有关、或者由于其中一个等位基因片段太大没能收集到数据，超出检测范围而造成的假象，如FGA基因座45.2等位基因。此外分析所有发生基因丢失或扩增不平衡现象基因座的STR分型，发现该现象均发生在大片段等位基因，而小片段等位基因不受影响（图1～2）。这可能是由于大片段等位基因扩增效率角度，而小片段等位基因易与先扩增的缘故。

3 讨论

由于Profiler PlusTM、IdentifilerTM以及Powerplex16在同一基因座上的引物侧翼位置有所差异，因此易造成相应的序列存在差异[5-7]。同时基因序列发生点突变可能导致样本扩增时部分个体的序列以及引物序列不想匹配。导致相应的等位基因扩增失败或产物量较少，导致扩增不平衡及等位基因缺失现象。最终结果造成不同扩增试剂盒对血样DNA检验分型不相一致。导致这两种现象发生的原因也有可能是由于退火温度较高或其中一个等位基因片段过大造成未对数据进行收集，导致超过检验范围二出现的假象[8-10]。此外，对所有基因缺失及扩增不平衡现象基因座的STR分型后发现，此类表现均体现在较大片段等位基因中，对小片段不造成较大影响。这一现象原因是小片段等位基因其扩增率相对较低且易于优先扩增[11-12]。

本次实验对Profiler PlusTM及Powerplex16分别加入不同剂量9947A模版DNA进行扩增及监测。检验结果显示两种不同扩增试剂盒扩增所需的模版DNA量为1～3 ng。最低灵敏度为0.075 ng。但模版上限IdentifilerTM为5 ng，Powerplex16则高达8 ng。实验结果分析得出IdentifilerTM及Powerplex16对模版DNA量大小无明显差异，因此在实际应用中可类同把握。对于DNA降解程度的适应性尚未明确显示。

综上所述，使用3种不同扩增试剂盒均会出现等位基因丢失及扩张不平衡现象。但Profiler PlusTM其发生率显著高于其余两种试剂盒。因此，在实际检验操作过程中可选择主要一类扩增试剂盒，其异常百分比可相对较低。另外需再准备一至两种试剂盒作为对比分析时可进行检测，尽量减少两种差异所造成判断类型错误发生。

参考文献

[1]吴微微，郝宏蕾，林锦锋，等.3种国产化试剂盒与Identifiler-（TM）试剂盒检验结果比较[J].中国法医学杂志，2011，11（1）：45-47.

[2]柳天天.几种常用PCR扩增试剂盒检验血样DNA的结果比较[J].中外医疗，2012，13（3）：177.

[3]周翼，吴林军.不同PCR扩增试剂盒检验血样DNA的结果对比分析[J].中国医药科学，2012，12（7）：106.

[4]吴微微，刘振平，傅汀，等.3种常用PCR扩增试剂盒检验血样DNA的结果比较[J].中国法医学杂志，2006，12（4）：203-207.

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[6]王林生，苏勇，顾林岗.硅珠法提取PCR模板DNA[J].中国法医学杂志，2000，12（1）：89-90.

[7]吴微微，徐林苗，朱虹辉.浙江汉族人群9个STR基因座的遗传多态性调查[J].中国法医学杂志，2001，13（1）：37-38.

[8]刘超，李越，王穗保.广州地区汉族人群Penta D及Penta E STR基因座频率[J].中国法医学杂志，2001，13（3）：101-102.

[9]刘翠兰，胡家伟，朱传红.Profiler Plus试剂盒扩增Amelogenin基因座变异一例[J].刑事技术，2005，13（4）：25-27.

[10]王军，邢锦山.连云港地区汉族人群15个STR基因座的遗传多态性[J].苏州大学学报（医学版），2010，30（2）：106-108.

[11]胡玉弘，陈玲玲，冯军.标本存放时间对荧光定量PCR检测HBV-DNA结果的影响[J].中国医学创新，2010，7（2）：7-8.

[12]吴泽建，王惠斌，袁锡裕.RT-PCR检测CK19 mRNA青年结直肠癌患者淋巴结微转移[J].中国医学创新，2012，11（07）：6-8.

（收稿日期：2014-03-12） （本文编辑：蔡元元）endprint

1.2 实验方法 对所有血样采集检验个体均使用硅珠法进行提取DNA[3]。应用10 μL扩增反应体系应用于PCR扩增。使用ABI-9700扩增仪进行扩增。反应体系中成分以及热循环参数设置、检测方法等根据仪器说明书进行设置及操作。Profiler PlusTM扩增试剂盒使用Rox-500内标；IdentifilerTM扩增试剂盒使用Liz-599内标；Powerplex16使用ILS-600内标。分析师分别使用Matrix顺序为set F、set G5、set Z。分析软件应用GeneMapper ID v3.2分析软件。使用相对应标准阶梯等位基因为标准进行基因型分型。对于IdentifilerTM以及Powerplex16扩增试剂盒加入0.05 ng、0.075 ng、1 ng至8 ng的9947A模版DNA进行扩增与检测[4]。

1.3 统计学处理 采用SPSS 13.5统计学软件对数据进行处理，计数资料采用 字2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 3种扩增试剂盒等位基因确实及扩增不平衡比较 150例血液样本中，2种不同种类扩增试剂盒不同检验结果分型为8例。检验差异率为8.0%。使用3种扩增试剂盒对上述8例血液样本再次进行DNA血样检测后，Profiler PlusTM有1例于D8S1179基因座上出现等位基因缺失，IdentifilerTM在D13S317基因座上出现等位基因缺失，发生率均为2.0%。Powerplex16在D8S1179基因座上为7例扩增不平衡。其余两种分别于D13S317以及FGA基因座上出现1例不平衡现象。不平衡概率为14.0%，2.0%以及2%。3种试剂盒检测的等位基因缺失率比较差异无统计学意义（P>0.05）。Profiler PlusTM检测扩张不平衡率显著高于其余两种试剂盒（P<0.05），见表1。

2.2 3种扩增试剂盒不同等位基因丢失现象的比较 实验个体当中Profiler PlusTM以及Powerplex16实际和检验存在7个样本存在差异。在Profiler PlusTM试剂盒的D8S1179基因座位上发生扩增不平衡现象的5个样本，经IdentifilerTM以及Powerplex16试剂盒的扩增均表现为正常的杂合子分型，两个等位基因的峰值比例相当。由于3种反应试剂盒对于同一个基因座在引物设计时选择的侧翼位置不一致，相应的序列也有差异；且又由于点突变的缘故，部分个体的样本在扩增时因与引物序列不匹配，相应的等位基因不易扩增成功，或产量低，从而发生扩增不平衡，甚至等位基因缺失的现象，导致经不同试剂盒扩增检测后DNA分型不一致的现象。在本次试验中，这种现象在Profiler PlusTM试剂盒中D8S1179基因座位上表现尤为明显，5例扩增严重不平衡，杂合子的两个等位基因峰值高度或峰面积差异在1：-1：5以上。IdentifilerTM以及Powerplex16两种试剂盒在D8S1179基因座位上的引物设计选择的侧翼位置以及相应的序列均有明显改善，不容易发生与引物序列不匹配的情况。上述3种试剂盒各发生1例等位基因丢失的现象，等位基因丢失几率均为0.1961%，但基因座不一样，IdentifilerTM以及Profiler PlusTM均有同一例样本在同一个基因座（D13S317）上丢失等位基因，应为（8，12）的分型仅检出（8）一个等位基因，相应的Powerplex16有1例FGA基因座上发生缺失，应为（22，24）的分型仅检出（22）一个等位基因，而IdentifilerTM以及Profiler PlusTM均正常（图1～2）。等位基因丢失或扩增不平衡现象的发生多数是由于引物序列不匹配造成，但还可能与退货温度偏高有关、或者由于其中一个等位基因片段太大没能收集到数据，超出检测范围而造成的假象，如FGA基因座45.2等位基因。此外分析所有发生基因丢失或扩增不平衡现象基因座的STR分型，发现该现象均发生在大片段等位基因，而小片段等位基因不受影响（图1～2）。这可能是由于大片段等位基因扩增效率角度，而小片段等位基因易与先扩增的缘故。

3 讨论

由于Profiler PlusTM、IdentifilerTM以及Powerplex16在同一基因座上的引物侧翼位置有所差异，因此易造成相应的序列存在差异[5-7]。同时基因序列发生点突变可能导致样本扩增时部分个体的序列以及引物序列不想匹配。导致相应的等位基因扩增失败或产物量较少，导致扩增不平衡及等位基因缺失现象。最终结果造成不同扩增试剂盒对血样DNA检验分型不相一致。导致这两种现象发生的原因也有可能是由于退火温度较高或其中一个等位基因片段过大造成未对数据进行收集，导致超过检验范围二出现的假象[8-10]。此外，对所有基因缺失及扩增不平衡现象基因座的STR分型后发现，此类表现均体现在较大片段等位基因中，对小片段不造成较大影响。这一现象原因是小片段等位基因其扩增率相对较低且易于优先扩增[11-12]。

本次实验对Profiler PlusTM及Powerplex16分别加入不同剂量9947A模版DNA进行扩增及监测。检验结果显示两种不同扩增试剂盒扩增所需的模版DNA量为1～3 ng。最低灵敏度为0.075 ng。但模版上限IdentifilerTM为5 ng，Powerplex16则高达8 ng。实验结果分析得出IdentifilerTM及Powerplex16对模版DNA量大小无明显差异，因此在实际应用中可类同把握。对于DNA降解程度的适应性尚未明确显示。

综上所述，使用3种不同扩增试剂盒均会出现等位基因丢失及扩张不平衡现象。但Profiler PlusTM其发生率显著高于其余两种试剂盒。因此，在实际检验操作过程中可选择主要一类扩增试剂盒，其异常百分比可相对较低。另外需再准备一至两种试剂盒作为对比分析时可进行检测，尽量减少两种差异所造成判断类型错误发生。

参考文献

[1]吴微微，郝宏蕾，林锦锋，等.3种国产化试剂盒与Identifiler-（TM）试剂盒检验结果比较[J].中国法医学杂志，2011，11（1）：45-47.

[2]柳天天.几种常用PCR扩增试剂盒检验血样DNA的结果比较[J].中外医疗，2012，13（3）：177.

[3]周翼，吴林军.不同PCR扩增试剂盒检验血样DNA的结果对比分析[J].中国医药科学，2012，12（7）：106.

[4]吴微微，刘振平，傅汀，等.3种常用PCR扩增试剂盒检验血样DNA的结果比较[J].中国法医学杂志，2006，12（4）：203-207.

[5]申琴，倪斌，欧阳曙明，等.湖南地区1013例亲子鉴定中的STR突变位点研究[J].生命科学研究，2009，11（6）：517-520

[6]王林生，苏勇，顾林岗.硅珠法提取PCR模板DNA[J].中国法医学杂志，2000，12（1）：89-90.

[7]吴微微，徐林苗，朱虹辉.浙江汉族人群9个STR基因座的遗传多态性调查[J].中国法医学杂志，2001，13（1）：37-38.

[8]刘超，李越，王穗保.广州地区汉族人群Penta D及Penta E STR基因座频率[J].中国法医学杂志，2001，13（3）：101-102.

[9]刘翠兰，胡家伟，朱传红.Profiler Plus试剂盒扩增Amelogenin基因座变异一例[J].刑事技术，2005，13（4）：25-27.

[10]王军，邢锦山.连云港地区汉族人群15个STR基因座的遗传多态性[J].苏州大学学报（医学版），2010，30（2）：106-108.

[11]胡玉弘，陈玲玲，冯军.标本存放时间对荧光定量PCR检测HBV-DNA结果的影响[J].中国医学创新，2010，7（2）：7-8.

[12]吴泽建，王惠斌，袁锡裕.RT-PCR检测CK19 mRNA青年结直肠癌患者淋巴结微转移[J].中国医学创新，2012，11（07）：6-8.

（收稿日期：2014-03-12） （本文编辑：蔡元元）endprint