略阳乌鸡7～12周龄可消化蛋氨酸需要量的研究

张 静 闵育娜 牛竹叶 刘少凯 王哲鹏 李华磊 何祖富 刘福柱

(西北农林科技大学动物科技学院，杨凌 712100)

略阳乌鸡是陕西古老而特有的珍稀家禽，中心产区位于略阳县以东的黑河流域，故名黑河乌鸡，20世纪80年代更名为略阳乌鸡。略阳乌鸡具有“六黑”特征，即乌皮、乌腿、乌趾、乌喙、乌冠、乌舌。1982年经我国农业部和中国农业科学院考察鉴定和血型因子分析，确认略阳乌鸡是一个单独的乌鸡品种，在全国四大乌鸡品种中，略阳乌鸡体形最大，而且肉质细嫩、味醇香、营养丰富，被列为陕西省唯一的保护鸡种。蛋氨酸是家禽饲粮中第一限制性氨基酸，其含量的多少会影响饲粮中其他氨基酸的利用和需要量。NRC(1994)标准中关于未成熟莱航褐壳蛋鸡7～12周龄蛋氨酸需要量为0.23%，莱航白壳蛋鸡为0.25%。我国《鸡饲养标准》(2004)中，黄羽肉种鸡7～12周龄蛋氨酸的需要量为0.29%。石天虹等［1］根据不同蛋氨酸水平对泰和丝毛乌鸡生长性能的影响，认为7～12周龄泰和丝毛乌鸡蛋氨酸需要量为0.28%～0.29%。瞿明仁等［2］综合研究了不同蛋氨酸水平对泰和丝毛乌鸡生长性能、血清尿素氮含量以及氮存留率的影响，认为7～12周龄泰和丝毛乌鸡的蛋氨酸需要量为:公鸡0.26% ～0.35%，母鸡0.24%～0.31%。然而，目前关于乌鸡蛋氨酸营养需要的研究较少，且多数以泰和乌鸡为研究对象，关于略阳乌鸡蛋氨酸营养需要的研究尚未见报道。为此，本试验旨在将饲养试验与代谢试验相结合，测定不同蛋氨酸水平对略阳乌鸡生长性能、组织器官发育及血清尿酸和尿素氮含量的影响，以期确定7～12周龄略阳乌鸡的可消化蛋氨酸需要量，为合理地设计略阳乌鸡的饲粮配方提供科学依据，进而为略阳乌鸡选育与生产提供关键技术支撑。

1 材料与方法

1.1 试验1:饲养试验

1.1.1 试验动物与分组

试验1采用单因子完全随机试验设计，选取6周龄末健康略阳乌鸡600羽，公母各占1/2，随机分为5组，每组6个重复，每个重复20只鸡，每笼10只鸡。

1.1.2 试验饲粮

基础饲粮参照我国地方黄羽肉种鸡、泰和乌鸡和NRC(2004)肉种鸡饲养标准配制，采用玉米-花生粕型基础饲粮，向基础饲粮中添加0、0.10%、0.20%、0.30%、0.40%的 DL-蛋氨酸，配制成5种含不同水平蛋氨酸的试验饲粮，各试验饲粮其他营养水平一致。7～12周龄略阳乌鸡基础饲粮组成及营养水平见表1。

1.1.3 试验方法

以笼为单位，试验开始称取每笼鸡的初始重，经分析差异不显著(P＞0.05)。试验期间统计试验阶段每笼鸡的采食量。试验期42 d，自由采食和饮水，其他饲养管理按常规［3］进行。

1.1.4 样品采集与指标测定

1.1.4.1 生长性能指标

在整个试验期每周统计各组各重复的饲料消耗。分别在试验期的第1天和最后1天，以笼为单位对试鸡进行空腹称重，以计算平均日增重(ADG，g/d)、平均日采食量(ADFI，g/d)、料重比(F/G，ADFI/ADG)和相对生长率(RGR，%)。

RGR(%)=100×总体增重/初始体重。

1.1.4.2 血清尿酸和尿素氮含量

试验第42天时每个重复抽取1只接近平均体重的鸡，空腹12 h，自由饮水，于第2天08:00时，翅静脉采血4～5 mL，3 000 r/min离心15 min，取血清，-20℃保存，待测尿酸、尿素氮含量。

1.1.4.3 组织器官发育指标

采血后解剖，分别取心脏、肝脏、胸腺、脾脏、法氏囊、肌胃和腺胃(去内容物)进行称重，分别取左侧胸肌和腿肌称重，剥离腹脂称重。其中肠道去肠脂，清出肠道中的内容物并称重。计算各组织器官重量占相应活重的百分比(%)。

1.2 试验2:代谢试验

1.2.1 试验动物与分组

试验2选取体重相近的健康成年雄性略阳乌鸡16只，随机分为2组，一组为内源校正组，体重为(2.14±0.12)kg;另一组为试验组，体重为(2.09±0.14)kg。

1.2.2 试验饲粮

代谢试验所用无氮饲粮组成及营养水平见表2。

表2 无氮饲粮组成及营养水平(风干基础)Table 2 Composition and nutrient levels of the nitrogen-free diet(air-dry basis) %

1.2.3 试验方法

试验分为预试期、禁食排空期、正试期。预试期3 d，试验组和内源校正组鸡只均采食7～12周龄略阳乌鸡基础饲粮。准确记录禁食排空开始时间，随后禁食48 h，在此期间，每只试鸡每天饮水补饲50 g葡萄糖。禁食结束后，用强饲器给试验组每只鸡准确强饲50 g基础饲粮，给内源校正组每只鸡准确强饲50 g风干无氮饲粮，及时准确记录个体强饲时间。强饲后自由饮水［4-5］。

1.2.4 样品采集与指标测定连续分别收集每只鸡48 h排泄物(每2 h收集1次)，将排泄物置于已恒重培养皿中，称取重量，按每100 g鲜粪加入10%盐酸溶液10 mL进行固氮，以防止排泄物中氨的损失及抑制微生物对排泄物中氨基酸和其他营养素的降解作用。将排泄物烘干，返潮后称重，计算每只鸡48 h总排泄物风干样品重量，装瓶待分析。

将饲料样品或排泄物风干样品粉碎，过60目筛，取一部分测定风干样品中的含水量，其余按中华人民共和国国家标准(GB/T 15399—94)经过甲酸氧化后水解，再用氨基酸自动分析仪测定蛋氨酸含量［6］。

基础饲粮的蛋氨酸代谢率计算公式［7］:

基础饲粮蛋氨酸表观消化率(%)=100×［食入蛋氨酸(g)-排泄物中蛋氨酸(g)］∕食入蛋氨酸(g);

基础饲粮蛋氨酸真消化率(%)=100×［食入蛋氨酸(g)-排泄物中蛋氨酸(g)+内源性蛋氨酸(g)］∕食入蛋氨酸(g)。

1.3 数据统计与分析

用Excel软件进行数据整理，采用SPSS 20.0软件进行单因素方差分析(one-way ANOVA)和回归分析，差异显著者进行Duncan氏法多重比较，结果以平均值±标准差(mean±SD)表示。

2 结果与分析

2.1 不同蛋氨酸水平对7～12周龄略阳乌鸡生长性能的影响

由表3可知，不同蛋氨酸水平对7～12周龄略阳乌鸡的ADFI影响极显著(P＜0.01)，随着蛋氨酸水平的增加，ADFI降低;不同蛋氨酸水平对7～12周龄略阳乌鸡的ADG影响极显著(P＜0.01);不同蛋氨酸水平对7～12周龄略阳乌鸡的F/G影响不显著(P＞0.05);不同水平的蛋氨酸对7～12周龄略阳乌鸡的RGR有显著影响(P＜0.05)。回归分析表明，略阳乌鸡ADG(y，g)与饲粮蛋氨酸水平(x，%)之间存在先升高后降低的极显著二次曲线相关(y=-26.331x2+18.647x+15.282，P＜0.01，R2=0.691)。而略阳乌鸡RGR与饲粮蛋氨酸水平之间不存在较强的二次曲线相关(R2=0.365)。略阳乌鸡F/G也表现出先降低后升高的二次曲线变化趋势，但经回归分析相关不显著(P ＞0.05，R2=0.204)。

表3 不同蛋氨酸水平对7～12周龄略阳乌鸡生长性能的影响Table 3 Effects of dietary Met level on growth performance of Lueyang black-boned chickens aged from 7 to 12 weeks

2.2 不同蛋氨酸水平对7～12周龄略阳乌鸡血清尿酸和尿素氮含量的影响

由表4可知，不同蛋氨酸水平对7～12周龄略阳乌鸡血清尿酸、尿素氮含量的影响均不显著(P＞0.05)。但蛋氨酸水平为0.42%时，血清尿酸和尿素氮的含量相对较低。

表4 不同蛋氨酸水平对7～12周龄略阳乌鸡血清尿酸和尿素氮含量的影响Table 4 Effects of dietary Met level on serum uric acid and urea nitrogen contents of Lueyang black-boned chickens aged from 7 to 12 weeks mmol/L

2.3 不同蛋氨酸水平对7～12周龄略阳乌鸡组织器官发育的影响

由表5和表6可知，不同蛋氨酸水平对7～12周龄略阳乌鸡肌肉组织、脂肪组织、免疫器官以及部分消化器官占体重的百分比影响均不显著(P＞0.05)。

表5 不同蛋氨酸水平对7～12周龄略阳乌鸡部分组织发育的影响Table 5 Effects of dietary Met level on some tissues development of Lueyang black-boned chickens aged from 7 to 12 weeks %

2.4 7～12周龄略阳乌鸡蛋氨酸表观消化率和真消化率

由表7可知，试验测得7～12周龄略阳乌鸡蛋氨酸表观消化率为92.05%，真消化率为94.97%。

表6 不同蛋氨酸水平对7～12周龄略阳乌鸡部分器官发育的影响Table 6 Effects of dietary Met level on some organ development of Lueyang black-boned chickens aged from 7 to 12 weeks %

表7 7～12周龄略阳乌鸡蛋氨酸表观消化率和真消化率Table 7 Met apparent and true digestibility of Lueyang black-boned chickens aged from 7 to 12 weeks

3 讨论

3.1 不同蛋氨酸水平对7～12周龄略阳乌鸡生长性能的影响

蛋氨酸是禽类第一限制性氨基酸，在家禽生长中发挥着重要作用。许多研究证明，饲粮中蛋氨酸的缺乏会导致肉鸡生长明显抑制，饲料利用率显著降低;适当添加蛋氨酸可改善肉鸡的生长性能;当饲粮中的蛋氨酸达到一定的水平后，若继续添加蛋氨酸则对肉鸡生长性能无影响，甚至产生毒害作用［2，8-14］。但也有一些研究结果表明，在家禽生长的某些时期，一定范围内饲粮蛋氨酸水平的变化对家禽的生长并未产生显著的影响［1，15-20］。

石天虹等［1］研究了蛋氨酸对0～12周龄泰和乌鸡生产性能的影响，以乌鸡生产性能和经济效益为判断指标，研究结果认为乌鸡蛋氨酸的需要量为:0～4周龄蛋氨酸0.32%，5～8周龄蛋氨酸0.29%，9～12周龄蛋氨酸0.28%。瞿明仁等［2］对泰和乌鸡0～12周龄蛋氨酸的需要量进行了研究，发现不同处理对乌鸡的体增重影响不显著，但对ADFI和F/G影响显著，研究结果认为不同性别乌鸡的蛋氨酸需要量为:5～8周龄公鸡0.35%，母鸡 0.31%;9～12周龄公鸡 0.26%，母鸡0.24%。谢明等［8］研究了蛋氨酸对3～6周龄雄性北京鸭生产性能的影响，结果表明:蛋氨酸对3～6周龄雄性北京鸭ADG和ADFI均产生了显著影响，但对F/G无显著影响。以ADG为评价指标，依据二次曲线模型，3～6周龄雄性北京鸭的蛋氨酸需要量为0.365%。

本研究结果表明蛋氨酸水平极显著影响了略阳乌鸡的 ADFI，进而显著影响了其 ADG以及RGR，但对F/G的影响没有达到显著水平。分析结果后发现，饲粮蛋氨酸水平对略阳乌鸡7～12周的ADFI有极显著影响，随着蛋氨酸水平的增加，ADFI总体呈下降趋势，ADG、RGR呈先升高后降低的二次曲线变化，F/G也有先降低后上升的二次曲线变化趋势，表明饲粮中蛋氨酸水平较低时，略阳乌鸡的ADFI较高，ADG较低，饲料效率较低，随着饲粮中合成蛋氨酸的添加，ADFI逐渐降低，ADG升高，提高了饲料效率，达到适宜蛋氨酸水平后继续添加蛋氨酸则导致蛋氨酸过量，进一步降低了略阳乌鸡的ADFI，过量蛋氨酸不利于略阳乌鸡的生长，导致ADG降低，饲料效率降低。本试验通过略阳乌鸡ADG与饲粮蛋氨酸水平之间的二次曲线模型估算出，7～12周龄略阳乌鸡蛋氨酸需要量为0.354%，以蛋氨酸/粗蛋白质为基础，本试验结果(0.022 12)高于NRC(1994)7～12周龄未成熟褐壳莱航蛋鸡(0.015 33)、白壳莱航蛋鸡(0.015 63)、中国鸡饲养标准(2004)7～12周龄黄羽肉种鸡(0.019 33)以及瞿明仁等［2］7～12周龄泰和乌鸡(0.141 2～0.201 5)的研究结果，低于 Saki等［12］的研究结果(0.023)。

3.2 不同蛋氨酸水平对7～12周龄略阳乌鸡血清尿酸和尿素氮含量的影响

尿酸是禽类蛋白质代谢的主要终产物。Featherston［21］研究认为，当禽类因从饲粮中摄取的外源性必需氨基酸不足或氨基酸不平衡时，将引起机体蛋白质的分解，进而导致血清尿酸含量上升，氮的利用率下降。Miles等［22］研究发现，当第一限制性氨基酸不足时，鸡排出尿酸的量增加，氮利用率降低，对其补充限制性氨基酸后，尿酸的排出量减少。

姚元枝等［10］研究了0～8周龄雪峰乌鸡饲粮不同蛋氨酸水平的影响，结果表明，蛋氨酸水平对血清尿素氮含量影响显著，使尿素氮含量最低的饲粮蛋氨酸水平0～4周龄为0.560%，5～8周龄为0.404% ～0.464%。瞿明仁等［23］研究了不同蛋氨酸水平对0～12周龄泰和乌鸡血清尿素氮的影响，结果表明，不同蛋氨酸水平对泰和乌鸡血清尿素氮含量有显著影响。车向荣等［13］研究了DL-蛋氨酸对蛋雏鸡的影响，结果表明，蛋氨酸对血清尿素氮和尿酸的含量影响不显著。程茂基等［16］研究了蛋氨酸对0～3周龄肉仔鸡生长性能、血清尿酸含量的影响，结果表明，饲粮蛋氨酸水平低于0.28%或高于1.50%时，肉仔鸡生长性能显著下降，血清尿酸含量显著升高;饲粮蛋氨酸水平为0.50%～1.00%时，蛋氨酸对肉仔鸡生长性能和血清尿酸含量没有显著影响。李忠荣等［18］研究了低蛋白质补充氨基酸对北京鸭血清生化指标的影响，结果表明，低蛋白质补充氨基酸饲粮对北京鸭血清生化指标没有显著影响。

本试验结果表明，饲粮不同蛋氨酸水平对7～12周龄略阳乌鸡血清尿酸和尿素氮的含量均影响不显著，但蛋氨酸水平为0.42%时，血清尿酸和尿素氮的含量都相对较低。该试验结果与上述研究结果相似。原因可能是略阳乌鸡生长周期长，生长较为缓慢，7～12周龄阶段内短期对氨基酸浓度变化的敏感度较低。

3.3 不同蛋氨酸水平对7～12周龄略阳乌鸡组织器官发育的影响

Hickling等［24］研究了不同蛋氨酸水平对雄性肉仔鸡屠宰性能和胸肌率的影响，结果表明，不同蛋氨酸水平对雄性肉仔鸡的屠宰性能和胸肌率的影响趋于显著。席鹏彬等［15］研究了不同蛋氨酸水平对7～9周龄黄羽肉鸡生长性能、胴体品质等的影响，并根据二次回归模型估测取得最低料重比的蛋氨酸饲粮中总需要量为0.353%，结果表明，蛋氨酸水平显著影响了黄羽肉鸡的胸肌率，并对公鸡的腹脂率有显著影响。车向荣等［13］研究表明，蛋氨酸可显著提高蛋雏鸡胸腺指数、脾脏指数和法氏囊指数。黎观红等［25］研究了0～12周龄泰和乌鸡内脏器官的发育规律，结果表明，内脏器官的发育峰期在8周龄以前，但各内脏器官的生长发育速度不一致，心脏、肝脏、肺、腺胃、胰腺、小肠的发育早于其他内脏器官的发育，全消化道、小肠、肌胃、胰腺、肝脏的发育早于体重的发育。

本试验测得在0.22% ～0.62%，不同饲粮蛋氨酸水平对7～12周龄略阳乌鸡各内脏器官重量占体重的百分比无显著影响，与上述研究一致。

3.4 略阳乌鸡蛋氨酸的表观消化率和真消化率

石天虹等［26］采用强饲法测定了成年泰和乌鸡对饲料原料氨基酸的表观消化率和真消化率，结果表明，成年泰和乌鸡对玉米蛋氨酸的表观消化率为85.39%，真消化率为90.49%;对豆粕蛋氨酸的表观消化率为89.06%，真消化率为90.29%。席鹏彬等［14］采用强饲法测得玉米、豆粕和花生粕的蛋氨酸真消化率分别为91.7%、90.6%和85.5%，基础饲粮(玉米68.08%、豆粕20.44%、花生粕5.00%，代谢能为12.62 MJ/kg、粗蛋白质为17.50%)的蛋氨酸真消化率为90.63%。瞿明仁等［27］采用强饲法测定了20周龄泰和公鸡对基础饲粮(玉米70.0%、豆粕19.0%、菜籽粕6.5%、鱼粉2.0%，代谢能为11.96 MJ/kg，粗蛋白质为16.97%)蛋氨酸的表观消化率和真消化率，测得其对基础饲粮蛋氨酸的表观消化率为94.10%，真消化率为95.28%。

经分析计算，本试验测得略阳乌鸡对本试验基础饲粮的蛋氨酸表观消化率为92.05%，真消化率为 94.97%，高于石天虹等［26］以及席鹏彬等［14］的研究结果，低于瞿明仁等［27］的研究结果。

4 结论

①通过ADG与饲粮蛋氨酸水平之间的二次曲线模型估算得出，7～12周龄略阳乌鸡饲粮蛋氨酸适宜水平为0.354%。

②不同蛋氨酸水平对7～12周龄略阳乌鸡血清尿酸和尿素氮含量以及部分组织器官发育无显著影响。

③7～12周龄略阳乌鸡对基础饲粮的蛋氨酸表观消化率为92.05%，真消化率为94.97%。其表观可消化蛋氨酸需要量为0.326%，真可消化蛋氨酸需要量为0.336%。

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